Kaupallinen DHA-lisä

Tutkijat rekrytoivat 73 raskaana olevaa naista kolmannen raskauskolmanneksen lopussa matalariskiseltä kätilöklinikalta tutkijoiden instituutioiden arviointilautakunnan määräysten (HRPO #10-417) hyväksymän protokollan mukaisesti. Kaikille klinikan naisille tarjottiin osallistumista ja ilmoittautuminen tehtiin 34-36 raskausviikon iässä niille, jotka suostuivat. Poissulkemiskriteereitä olivat preeklampsia, raskausdiabetes tai esiraskausdiabetes, krooninen lääkkeiden käyttö ja muut raskauden lääketieteelliset komplikaatiot. Äidin tiedot, kuten ikä, painovoima, pariteetti, raskausikä, etnisyys, BMI synnytyksessä ja toimitustapa, kerättiin sairausvakuutuksen siirrettävyys- ja vastuullisuuslain ohjeiden mukaisesti. Vastasyntyneiden tiedot, mukaan lukien sukupuoli, syntymäpaino, pituus ja pään ympärysmitta sekä äidin synnytyksen ominaisuudet, kerättiin synnytystietojen tarkastelun jälkeen.

Koehenkilöt suostuivat satunnaistamiseen ryhmään, joka sai kalaöljypohjaista 275 mg Promise DHA:ta (Biotegrity; Granbury, TX) suun kautta joka päivä tai leväpohjaista 200 mg Expecta DHA:ta (Mead Johnson; Evansville, IN) suun kautta joka päivä tai ruokavaliosta. tottumukset tavalliseen tapaan. Satunnaistehtävät piilotettiin läpinäkymättömiin kirjekuoriin ja paljastettiin ilmoittautumisen yhteydessä. Kalentereita säilytettiin lisäravinteiden käytön dokumentoimiseksi ja käyttämättömät lisäravinteet palautettiin työhönoton ja toimituksen yhteydessä. Pillerit suoritettiin kalenterin tarkkuuden varmistamiseksi.

Näytteen kokoa koskevat näkökohdat: Tutkijoiden ensisijainen tulosmitta oli DHA-taso äidin seerumissa ja vastasyntyneen napanuoraveressä. DHA-osuuksien 15 prosentin kasvun havaitsemiseksi vaadittaisiin 19 näytekoko kussakin ryhmässä. Tämä tutkimus on pilottitutkimus, jonka tarkoituksena on määrittää, olisiko laajempi lisätutkimus mahdollista tutkijajoukossa.

Verinäytteiden otto Laskimoverinäyte kerättiin jokaiselta osallistujalta ilmoittautumisen ja satunnaistamisen yhteydessä. Äidin verta otettiin kyynärpääkuopasta putkiin, jotka sisälsivät EDTA:ta, ja niitä säilytettiin -4 °C:ssa. Toinen äidin näyte otettiin synnytykseen saapumisen yhteydessä samalla tavalla. Vastasyntyneiden näytteet otettiin samalla tavalla synnytyksen yhteydessä, heti narun kiinnittämisen jälkeen. 72 tunnin kuluessa keräämisestä identifioitiin hemolysoimattomat äidin ja vastasyntyneen näytteet ja sentrifugoitiin 5 minuuttia kliinisessä sentrifugissa, ja plasmaosa uutettiin ja säilytettiin 2 ml:n pulloissa -78 °C:ssa, kunnes rasvahappoanalyysi suoritettiin.

Rasvahappoanalyysit:

Näytteiden annettiin sulaa huoneenlämpötilassa ja lipidiuutto suoritettiin käyttämällä kloroformi/metanolia (2:1, tilavuus/tilavuus) Folchin et al (1957) menetelmän mukaisesti. Uutettu lipidijäännös punnittiin kuivauksen jälkeen 45 °C:ssa typpivirrassa. Seerumin kokonaisfosfolipidikomponentti eristettiin piihappopylväskromatografialla (26) kokonaislipidifraktiosta, joka oli saatu uuttamalla 1 ml:n alikvootti seerumia kloroformi:metanolilla (2:1, tilavuus/tilavuus). Rasvahapot transesteröitiin metyyliestereiden muodostamiseksi käyttämällä 0,5 N NaOH:ta metanolissa ja 14 % (w/v) booritrifluoridia metanolissa (27). Undekeenihappoa (Nu-Check Prep, Elysian, MN) lisättiin ennen metylointia ja se toimi sisäisenä standardina.

Rasvahappojen metyyliesterit määritettiin käyttämällä kaasukromatografia (6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA), joka oli varustettu autoinjektorilla, jaetulla/jakamattomalla kapillaariinjektiojärjestelmällä ja liekki-ionisaatiodetektorilla, kuten muualla on kuvattu(28)(). Käytettiin mukautettua rasvahapposeosta, jonka ovat kuvanneet Loor ja Herbein (28) ja valmistettu puhtailla metyyliesteristandardeilla, mukaan lukien AA ja DHA (Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA). tunnistaa huiput ja määrittää vastetekijät integraatiota varten Chem DataStationin kanssa (Agilent Technologies, Sunnyvale, CA).