Коммерческая добавка DHA

Исследователи набрали 73 беременных женщины в конце третьего триместра из акушерской клиники с низким уровнем риска в соответствии с протоколом, утвержденным правилами институционального контрольного совета исследователей (HRPO № 10-417). Всем женщинам в клинике было предложено участие, и для тех, кто согласился, регистрация проводилась на 34-36 неделе гестационного возраста. Критерии исключения включали преэклампсию, гестационный диабет или прегестационный диабет, хронический прием лекарств и другие медицинские осложнения беременности. Данные о матери, включая возраст, степень тяжести, паритет, гестационный возраст, этническую принадлежность, ИМТ при родах и способ родоразрешения, были собраны в соответствии с руководящими принципами Закона о переносимости и подотчетности медицинского страхования. Неонатальные данные, включая пол, вес при рождении, рост и окружность головы, а также характеристики родов у матери были собраны после просмотра истории родов.

Субъекты согласились на рандомизацию в группу, получающую 275 мг ДГК Promise DHA на основе рыбьего жира (Biotegrity; Гранбери, Техас) перорально каждый день или 200 мг ДГК Expecta на основе водорослей (Mead Johnson; Эвансвилл, Индиана) перорально каждый день, или диетические привычки как обычно. Назначения рандомизации были скрыты в непрозрачных конвертах и ​​раскрывались во время зачисления. Календари велись для документирования использования добавок, а неиспользованные добавки сдавались во время поступления в роды и родоразрешения. Для проверки точности календарей был проведен подсчет таблеток.

Соображения относительно размера выборки. Первичным критерием исхода для исследователей был уровень ДГК в материнской сыворотке и пуповинной крови новорожденного. Чтобы обнаружить 15-процентное увеличение содержания ДГК, потребуется выборка из 19 человек в каждой группе. Это исследование является пилотным исследованием, предназначенным для определения возможности проведения более крупного исследования добавок в популяции исследователей.

Сбор образцов крови Образец венозной крови был взят у каждого участника во время регистрации и рандомизации. Кровь матери брали из локтевой ямки в пробирки, содержащие ЭДТА, и хранили при температуре -4°C. Второй образец крови матери брали во время поступления в роды аналогичным образом. Аналогичным образом образцы у новорожденных собирали во время родов, сразу после пережатия пуповины. В течение 72 часов после сбора негемолизированные материнские и неонатальные образцы идентифицировали и центрифугировали в течение 5 минут в клинической центрифуге, а часть плазмы извлекали и хранили в 2-мл флаконах при -78°C до проведения анализа жирных кислот.

Анализ жирных кислот:

Образцам давали оттаять при комнатной температуре и проводили экстракцию липидов с использованием смеси хлороформ/метанол (2:1, об./об.) по методу Folch et al. (1957). Экстрагированный липидный остаток взвешивали после сушки при 45°С в токе азота. Общий фосфолипидный компонент сыворотки выделяли с помощью колоночной хроматографии с кремниевой кислотой (26) из общей липидной фракции, полученной путем экстракции 1 мл аликвоты сыворотки смесью хлороформ:метанол (2:1, об./об.). Жирные кислоты подвергали переэтерификации с получением метиловых эфиров с использованием 0,5 н. раствора NaOH в метаноле и 14% (масса/объем) трифторида бора в метаноле (27). Ундеценовую кислоту (Nu-Check Prep, Elysian, Миннесота) добавляли перед метилированием и использовали в качестве внутреннего стандарта.

Метиловые эфиры жирных кислот определяли количественно с использованием газового хроматографа (6890N, Agilent Technologies, Саннивейл, Калифорния), оснащенного автоинжектором, капиллярной системой ввода с делением/без деления и пламенно-ионизационным детектором, как описано в другом месте (28) (). Была использована адаптированная смесь жирных кислот, описанная Loor и Herbein (28) и приготовленная с использованием стандартов чистого метилового эфира, включая AA и DHA (Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA). для идентификации пиков и определения коэффициентов отклика для интеграции с Chem DataStation (Agilent Technologies, Саннивейл, Калифорния).