Commerciële DHA-suppletie

De onderzoekers rekruteerden 73 zwangere vrouwen in het late derde trimester van een verloskundigenkliniek met een laag risico, in overeenstemming met het protocol dat was goedgekeurd door de reglementen van de onderzoekscommissie van de onderzoekers (HRPO #10-417). Alle vrouwen in de kliniek kregen deelname aangeboden en inschrijving vond plaats bij een zwangerschapsduur van 34-36 weken voor degenen die ermee instemden. Uitsluitingscriteria waren onder meer pre-eclampsie, zwangerschapsdiabetes of pre-zwangerschapsdiabetes, chronisch gebruik van medicijnen en andere medische complicaties van zwangerschap. Maternale gegevens, waaronder leeftijd, graviditeit, pariteit, zwangerschapsduur, etniciteit, BMI bij bevalling en wijze van bevalling, werden verzameld in overeenstemming met de richtlijnen van de Health Insurance Portability and Accountability Act. Neonatale gegevens, waaronder geslacht, geboortegewicht, lengte en hoofdomtrek en kenmerken van de bevalling van de moeder, werden verzameld na bestudering van het bevallingsdossier.

Proefpersonen stemden in met randomisatie in een groep die elke dag een op visolie gebaseerde 275 mg Promise DHA (Biotegrity; Granbury, TX) via de mond kreeg, of een op algen gebaseerde 200 mg Expecta DHA (Mead Johnson; Evansville, IN) elke dag via de mond, of dieet gewoonten zoals gewoonlijk. Randomisatie-opdrachten werden verborgen in ondoorzichtige enveloppen en onthuld op het moment van inschrijving. Er werden kalenders bijgehouden om het gebruik van supplementen te documenteren en ongebruikte supplementen werden ingeleverd op het moment van toelating tot de bevalling en bevalling. Er werden pillentellingen uitgevoerd om de juistheid van kalenders te verifiëren.

Overwegingen bij de grootte van de steekproef: De primaire uitkomstmaat van de onderzoeker was het DHA-gehalte in maternale serum en neonatale navelstrengbloed. Om een ​​toename van 15% in DHA-aandelen te detecteren, zou een steekproefomvang van 19 in elke groep nodig zijn. Deze studie is een pilootonderzoek, ontworpen om te bepalen of een grotere suppletiestudie haalbaar zou zijn in de onderzoekspopulatie.

Afname van bloedmonsters Bij elke deelnemer werd een veneus bloedmonster afgenomen op het moment van inschrijving en randomisatie. Maternaal bloed werd afgenomen uit de antecubitale fossa in buisjes die EDTA bevatten en bewaard bij -4°C. Een tweede maternale monster werd op vergelijkbare wijze afgenomen op het moment van opname voor de bevalling. Neonatale monsters werden op dezelfde manier verzameld op het moment van levering, net na het vastklemmen van de navelstreng. Binnen 72 uur na verzameling werden niet-gehemolyseerde maternale en neonatale monsters geïdentificeerd en gedurende 5 minuten gecentrifugeerd in een klinische centrifuge, en het plasmagedeelte werd geëxtraheerd en bewaard in flesjes van 2 ml bij -78°C totdat de vetzuuranalyse was uitgevoerd.

Vetzuuranalyses:

Men liet de monsters ontdooien bij kamertemperatuur en extractie van lipiden werd uitgevoerd met behulp van chloroform/methanol (2:1, v/v) volgens de methode van Folch et al (1957). Het geëxtraheerde lipideresidu werd gewogen na drogen bij 45°C onder een stikstofstroom. De totale fosfolipidencomponent van het serum werd geïsoleerd door middel van kiezelzuurkolomchromatografie (26) van de totale lipidenfractie die werd verkregen door een aliquot van 1 ml serum te extraheren met chloroform:methanol (2:1, v/v). Vetzuren werden omgeësterd om methylesters te genereren met behulp van 0,5 N NaOH in methanol en 14% (w/v) boortrifluoride in methanol (27). Undeceenzuur (Nu-Check Prep, Elysian, MN) werd voorafgaand aan methylering toegevoegd en diende als interne standaard.

Vetzuurmethylesters werden gekwantificeerd met behulp van een gaschromatograaf (6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA) uitgerust met een auto-injector, een split/splitless capillair injectiesysteem en een vlamionisatiedetector zoals elders beschreven(28)(). Er werd een aangepast vetzuurmengsel gebruikt, beschreven door Loor en Herbein (28) en gemaakt met zuivere methylesterstandaarden, waaronder AA en DHA (Nu-Check Prep, Elysian, MN, VS; Sigma, St. Louis, MO, VS). om pieken te identificeren en responsfactoren te bepalen voor integratie met een Chem DataStation (Agilent Technologies, Sunnyvale, CA).