Kereskedelmi DHA-kiegészítés

A vizsgálók a harmadik trimeszter végén 73 terhes nőt vettek fel egy alacsony kockázatú szülésznői klinikáról a vizsgálók intézményi felülvizsgálati bizottsági szabályzata (HRPO #10-417) által jóváhagyott protokoll szerint. A klinikán lévő összes nőnek felajánlották a részvételt, és a beiratkozást 34-36 hetes terhességi korban végezték el azok számára, akik beleegyeztek. A kizárási kritériumok közé tartozott a preeclampsia, a terhességi cukorbetegség vagy a terhesség előtti diabétesz, a krónikus gyógyszerhasználat és a terhesség egyéb egészségügyi szövődményei. Az anyai adatok, köztük az életkor, a súlyozás, a paritás, a terhességi kor, az etnikai hovatartozás, a szüléskori BMI és a szülés módja, az egészségbiztosítási hordozhatóságról és elszámoltathatóságról szóló törvény irányelveinek megfelelően gyűjtöttük össze. Az újszülöttkori adatokat, beleértve a nemet, a születési súlyt, a magasságot és a fejkörfogatot, valamint az anyai szülési jellemzőket, a szülési nyilvántartás áttekintése után gyűjtöttük össze.

Az alanyok beleegyeztek a véletlenszerű besorolásba egy olyan csoportba, amely halolaj alapú 275 mg Promise DHA-t (Biotegrity; Granbury, TX) kapott szájon át minden nap, vagy alga alapú 200 mg Expecta DHA-t (Mead Johnson; Evansville, IN) szájon át minden nap, vagy étrenden keresztül. szokások szokás szerint. A véletlenszerűsítési feladatokat átlátszatlan borítékokba rejtették, és a beiratkozáskor felfedték. A kiegészítő használat dokumentálására naptárakat vezettek, a fel nem használt kiegészítőket pedig a vajúdás és a szállítás időpontjában leadták. A naptárak pontosságának ellenőrzése érdekében tablettákat számláltak.

A minta méretével kapcsolatos megfontolások: A vizsgálók elsődleges eredménymérője az anyai szérum és az újszülött köldökzsinórvér DHA-szintje volt. A DHA arányának 15%-os növekedésének kimutatásához minden csoportban 19-es mintaszámra lenne szükség. Ez a tanulmány egy kísérleti vizsgálat, amelynek célja annak meghatározása, hogy megvalósítható-e egy nagyobb kiegészítő vizsgálat a vizsgálók körében.

Vérminták gyűjtése Minden résztvevőtől vénás vérmintát vettünk a beiratkozás és a randomizálás során. Anyai vért vettünk az antecubitalis üregből EDTA-t tartalmazó csövekbe, és -4 °C-on tároltuk. Hasonló módon egy második anyai mintát vettünk a vajúdáskor. Az újszülöttkori mintákat hasonló módon gyűjtöttük a szüléskor, közvetlenül a zsinór leszorítása után. A begyűjtést követő 72 órán belül a nem hemolizált anyai és újszülött mintákat azonosítottuk, és 5 percig centrifugáltuk egy klinikai centrifugában, majd a plazmarészletet extraháltuk és 2 ml-es fiolákban tároltuk -78 °C-on, amíg a zsírsavelemzést el nem végezték.

Zsírsav elemzések:

A mintákat hagytuk szobahőmérsékleten felolvadni, és a lipid extrakciót kloroform/metanol (2:1, v/v) eleggyel végeztük Folch és munkatársai (1957) módszere szerint. Az extrahált lipidmaradványt 45 °C-on nitrogénáramban történő szárítás után lemértük. A szérum teljes foszfolipid komponensét kovasav-oszlopkromatográfiával (26) izoláltuk a szérum 1 ml-es alikvot részét kloroform:metanol (2:1, v/v) eleggyel extrahált teljes lipidfrakcióból. A zsírsavakat átészterezve metil-észtereket állítunk elő 0,5 N metanolos NaOH és 14 tömeg/térfogat%-os bór-trifluorid metanolban (27) alkalmazásával. Undecénsavat (Nu-Check Prep, Elysian, MN) adtunk hozzá a metilezés előtt, és belső standardként szolgált.

A zsírsav-metil-észterek mennyiségi meghatározását gázkromatográf (6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA) segítségével végeztük, amely autoinjektorral, osztott/osztatlan kapilláris befecskendező rendszerrel és lángionizációs detektorral van felszerelve a máshol leírtak szerint(28)(). A Loor és Herbein által leírt testreszabott zsírsavkeveréket (28) használták, amely tiszta metil-észter szabványokkal készült, beleértve az AA-t és a DHA-t (Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA) csúcsok azonosítására és válaszfaktorok meghatározására a Chem DataStationnel való integrációhoz (Agilent Technologies, Sunnyvale, CA).