Komerční suplementace DHA

Vyšetřovatelé přijali 73 těhotných žen v pozdním třetím trimestru z kliniky porodní asistence s nízkým rizikem v souladu s protokolem schváleným nařízeními institucionální kontrolní komise (HRPO č. 10-417). Všem ženám na klinice byla nabídnuta účast a u těch, které souhlasily, byla registrace provedena ve 34.–36. týdnu gestace. Kritéria vyloučení zahrnovala preeklampsii, gestační diabetes nebo pregestační diabetes, chronické užívání léků a další zdravotní komplikace těhotenství. Údaje o matkách včetně věku, gravidity, parity, gestačního věku, etnického původu, BMI při porodu a způsobu porodu byly shromážděny v souladu s pokyny zákona o přenositelnosti a odpovědnosti zdravotního pojištění. Neonatální údaje, včetně pohlaví, porodní hmotnosti, výšky a obvodu hlavy a charakteristik porodu matky, byly shromážděny po přezkoumání záznamu o porodu.

Subjekty souhlasily s randomizací do skupiny, která dostávala každý den ústně 275 mg Promise DHA na bázi rybího tuku (Biotegrity; Granbury, TX) nebo 200 mg Expecta DHA na bázi řas (Mead Johnson; Evansville, IN) každý den ústy nebo dietou zvyky jako obvykle. Randomizační úkoly byly ukryty v neprůhledných obálkách a odhaleny v době zápisu. Byly vedeny kalendáře, aby se dokumentovalo používání doplňků a nepoužité doplňky byly odevzdány v době přijetí k porodu a porodu. Byly provedeny počty pilulek, aby se ověřila správnost kalendářů.

Úvahy o velikosti vzorku: Primárním výsledným měřítkem výzkumníků byla hladina DHA v mateřském séru a v pupečníkové krvi novorozenců. Pro detekci 15% nárůstu podílů DHA by to vyžadovalo velikost vzorku 19 v každé skupině. Tato studie je pilotním výzkumem, jehož cílem je určit, zda by byla v populaci výzkumníků proveditelná větší studie suplementace.

Odběr vzorků krve Vzorek žilní krve byl odebrán každému účastníkovi v době zařazení a randomizace. Mateřská krev byla odebrána z antekubitální jamky do zkumavek obsahujících EDTA a skladována při -4 °C. Druhý vzorek matky byl odebrán v době přijetí k porodu podobným způsobem. Neonatální vzorky byly podobně odebrány v době porodu, těsně po sevření pupečníku. Do 72 hodin po odběru byly identifikovány nehemolyzované mateřské a neonatální vzorky a centrifugovány po dobu 5 minut v klinické centrifuze a část plazmy byla extrahována a skladována ve 2ml lahvičkách při -78 °C, dokud nebyla provedena analýza mastných kyselin.

Analýza mastných kyselin:

Vzorky byly ponechány roztát při teplotě místnosti a byla provedena extrakce lipidů za použití směsi chloroform/methanol (2:1, obj./obj.) podle metody Folch et al (1957). Extrahovaný lipidový zbytek byl zvážen po vysušení při 45 °C pod proudem dusíku. Celková fosfolipidová složka séra byla izolována sloupcovou chromatografií na kyselině křemičité (26) z celkové lipidové frakce získané extrakcí 1 ml alikvotu séra směsí chloroform:methanol (2:1, obj./obj.). Mastné kyseliny byly transesterifikovány za vzniku methylesterů za použití 0,5N NaOH v methanolu a 14% (w/v) fluoridu boritého v methanolu (27). Kyselina undecenová (Nu-Check Prep, Elysian, MN) byla přidána před methylací a sloužila jako vnitřní standard.

Methylestery mastných kyselin byly kvantifikovány pomocí plynového chromatografu (6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA) vybaveného autoinjektorem, děleným/splitless kapilárním injekčním systémem a plamenovým ionizačním detektorem, jak je popsáno jinde(28)(). Byla použita přizpůsobená směs mastných kyselin popsaná Loorem a Herbeinem (28) a vyrobená s čistými methylesterovými standardy, včetně AA a DHA, (Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA). k identifikaci vrcholů a určení reakčních faktorů pro integraci s Chem DataStation (Agilent Technologies, Sunnyvale, CA).