Kommersiellt DHA-tillägg

Utredarna rekryterade 73 gravida kvinnor i slutet av tredje trimestern från en barnmorskemottagning med låg risk i enlighet med protokollet som godkänts av utredarnas institutionella granskningsnämnds bestämmelser (HRPO #10-417). Alla kvinnor på kliniken erbjöds att delta och inskrivningen gjordes vid 34-36 veckors graviditetsålder för de som tackade ja. Uteslutningskriterier inkluderade havandeskapsförgiftning, graviditetsdiabetes eller pre-gestationell diabetes, kronisk användning av mediciner och andra medicinska komplikationer av graviditeten. Moderns data inklusive ålder, graviditet, paritet, graviditetsålder, etnicitet, BMI vid förlossningen och förlossningssätt samlades in i enlighet med riktlinjerna för Health Insurance Portability and Accountability Act. Neonatala data, inklusive kön, födelsevikt, längd och huvudomkrets och moderns förlossningsegenskaper samlades in efter att ha granskat förlossningsregistret.

Försökspersonerna samtyckte till randomisering till en grupp som fick en fiskoljebaserad 275 mg Promise DHA (Biotegrity; Granbury, TX) genom munnen varje dag, eller en algbaserad 200 mg Expecta DHA (Mead Johnson; Evansville, IN) via munnen varje dag, eller diet vanor som vanligt. Randomiseringsuppdrag gömdes i ogenomskinliga kuvert och avslöjades vid tidpunkten för registreringen. Kalendrar fördes för att dokumentera kosttillskottsanvändning och oanvända kosttillskott lämnades in vid antagningen till förlossningen och förlossningen. Pillerantal utfördes för att verifiera kalendrarnas riktighet.

Överväganden om provstorlek: Utredarnas primära resultatmått var DHA-nivån i moderns serum och neonatalt navelsträngsblod. För att upptäcka en 15 % ökning av DHA-proportionerna skulle det krävas en provstorlek på 19 i varje grupp. Denna studie är en pilotundersökning, utformad för att avgöra om en större kompletteringsstudie skulle vara genomförbar i utredarnas population.

Insamling av blodprov Ett venöst blodprov togs från varje deltagare vid tidpunkten för inskrivning och randomisering. Moderns blod togs från antecubital fossa i rör innehållande EDTA och lagrades vid -4 grader C. Ett andra moderns prov togs ut vid tidpunkten för inläggningen för förlossning på liknande sätt. Neonatala prover togs på liknande sätt vid tidpunkten för förlossningen, precis efter sladdklämning. Inom 72 timmar efter insamling identifierades icke-hemolyserade maternala och neonatala prover och centrifugerades under 5 minuter i en klinisk centrifug, och plasmadelen extraherades och förvarades i 2 ml flaskor vid -78 grader C tills fettsyraanalys utfördes.

Fettsyraanalyser:

Prover fick tina vid rumstemperatur och lipidextraktion utfördes med användning av kloroform/metanol (2:1, v/v) enligt metoden enligt Folch et al (1957). Den extraherade lipidåterstoden vägdes efter torkning vid 45°C under en ström av kväve. Den totala fosfolipidkomponenten i serum isolerades genom kiselsyrakolonnkromatografi (26) av den totala lipidfraktionen erhållen genom att extrahera en 1-ml alikvot av serum med kloroform:metanol (2:1, v/v). Fettsyror transesterifierades för att generera metylestrar med användning av 0,5 N NaOH i metanol och 14 % (vikt/volym) bortrifluorid i metanol (27). Undecensyra (Nu-Check Prep, Elysian, MN) tillsattes före metylering och tjänade som en intern standard.

Fettsyrametylestrar kvantifierades med hjälp av en gaskromatograf (6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA) utrustad med en autoinjektor, ett delat/splitfritt kapillärinsprutningssystem och en flamjoniseringsdetektor som beskrivs på annat ställe(28)(). En anpassad fettsyrablandning som beskrivs av Loor och Herbein (28) och gjord med rena metylesterstandarder, inklusive AA och DHA, (Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA) användes för att identifiera toppar och bestämma svarsfaktorer för integration med en Chem DataStation (Agilent Technologies, Sunnyvale, CA).