自体细胞移植手术治疗白癜风

在手术之前，将选择两个可比较的病变。

病变将被评估为：

1. 使用点计数技术的表面积。
2. 使用 VESTA 评分的任何色素沉着尝试。 将在局部麻醉下使用点阵激光 CO2 表面修整对病灶进行皮肤磨损，使用点模式关闭表面修整将在 18-20 W 的功率下进行，停留时间为 1,000 毫秒（DEKA，佛罗伦萨，意大利）。 将执行一到三遍，直到表皮被均匀去除。

再生技术产生的自体细胞微移植（ACM）悬浮液 在局部麻醉下，使用 Rigeneracons 医疗设备（CE 认证 I 类；人脑波，都灵，意大利）。 通过向设备中添加 1.5 mL 无菌生理溶液，将收集的标本放置在 Rigeneracons 中。 然后，该设备通过以 80 RPM 的速度旋转 Rigeneracons 2 分钟来生成细胞悬浮液。 随后，将获得的悬浮液用额外的 3 mL 无菌生理溶液稀释。 将所得悬浮液添加到由 NCES 技术生成的黑素细胞沉淀中，并将散布在真皮磨损的白斑斑之一上。

非培养表皮悬液 (NCES)：

将制备黑素细胞角质形成细胞沉淀。 在用病灶内美比卡因 L 麻醉该区域后，将从臀部区域采集供体皮肤；使用安装在 Kocher 镊子上的无菌剃须刀片。 每个病灶分别使用 1:2 的扩张比，以确保所有移植病灶中的黑素细胞浓度相等。 细胞悬液将通过将供体皮肤置于 0.25% 胰蛋白酶-EDTA (GIBCO) 溶液中并在 37 ᴼC 下放置 40 分钟来制备。 每个样品和胰蛋白酶将被倒入一个标记的培养皿中，然后使用乳酸林格氏液中和。 所有步骤都将在严格无菌条件下的层流气流工作台中进行。 表皮将从将被丢弃的真皮上分离。 然后将表皮切成小块并刮掉，这样表面就不会留下任何色素。 之后，将它们转移到两个标记的无菌 falcon 管中，并以 1,000 rpm 的速度离心 10 分钟。 漂浮的表皮碎片和上清液将被去除，在底部留下含有富含黑色素细胞和角质细胞的表皮细胞的细胞沉淀。 将所得颗粒悬浮一次在再生技术产生的 ACM 中，一次悬浮在毛囊悬浮液中，一次悬浮在 1 ml 乳酸盐林格氏液中。

滤泡细胞悬液：

• 在局部麻醉下，将使用 1 毫米的穿孔器从耳后的枕骨头皮中提取毛囊。 根据要移植的区域，每 1 cm2 将提取一个色素毛囊。 提取的毛囊用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤约3次。 然后将毛囊与 0.25% 胰蛋白酶 - 0.05% 乙二胺四乙酸 (EDTA) 在 37°C 下孵育 60 分钟，分成 3 个间隔，以制备单细胞悬液。 第一个间隔持续 30 分钟，之后将含有分离细胞的上清液倒入新的 falcon 管中，并用 1% 的胎牛血清中和。 然后将新鲜胰蛋白酶添加到毛囊中并重新孵育两次，每次 15 分钟。
• 在三个这样的周期结束时，会留下一个薄的角质轴。 所有试管的细胞悬液都添加到一个试管中。 通过以 1000 rpm 离心合并的细胞悬浮液 5 分钟获得最终的细胞沉淀。 将所得悬浮液添加到通过 NCES 技术生成的黑素细胞沉淀中，并将散布在类似的真皮磨损病变上。

将使用台盼蓝染料排除法检查所得悬浮液的黑素细胞计数和活力，以确保在其扩散到真皮磨砂白斑贴片上之前受体区域有超过 250 个活细胞/mm2。

两个部位都将覆盖有干燥的胶原蛋白片，然后是无菌手术垫和 tegaderm。

包扎后该区域将被固定，并建议患者在手术部位限制活动。

患者将开始为期 1 周的抗生素疗程。 1 周后将去除敷料，患者将接受准分子激光治疗，每周 3 次，持续 3 个月。

在 1 周第一次就诊后，患者将每月接受一次随访，持续 3 个月。

在 3 个月时，将进行定性和定量评估。 定性地，将使用系列照片对复色和颜色匹配进行盲法评估。 定量地，还将使用点计数法和 VESTA 评分来评估复色程度。