백반증의 외과적 치료에서 자가 세포 이식

수술 전에 두 개의 유사한 병변이 선택됩니다.

병변은 다음에 대해 평가됩니다.

1. 포인트 카운팅 기법을 사용한 표면적.
2. VESTA 점수를 사용한 모든 색소 침착 시도. 병변은 부분 레이저 CO2 표면 재포장을 사용하여 국소 마취 하에 더마 브레이딩될 것입니다. 도트 모드 표면 재포장을 사용하여 18-20W의 출력, 1,000밀리초의 체류 시간(DEKA, 플로렌스, 이탈리아)에서 수행됩니다. 표피가 균일하게 제거될 때까지 1~3회 통과합니다.

재생 기술로 생성된 자가 세포 미세이식(ACM) 현탁액 국소 마취하에 Rigeneracons 의료 기기(CE 인증 클래스 I, 인간 뇌파 , 토리노, 이탈리아). 수집된 표본은 1.5mL의 멸균 생리학적 용액을 장치에 추가하여 Rigeneracons에 배치됩니다. 그런 다음 장치는 Rigeneracons를 80 RPM으로 2분 동안 회전시켜 세포 현탁액을 생성합니다. 그 후, 얻은 현탁액을 추가 3mL의 멸균 생리학적 용액으로 희석합니다. 생성된 현탁액을 NCES 기술에 의해 생성된 멜라닌 세포 펠렛에 첨가하고 더마 브레이드 백반 패치 중 하나에 퍼뜨릴 것입니다.

비배양 표피 현탁액(NCES):

멜라노사이트 케라티노사이트 펠릿이 준비됩니다. 병변내 Mepicaine L로 해당 부위를 마취한 후 둔부 부위에서 기증자 피부를 채취합니다. Kocher 겸자에 장착된 멸균 면도날을 사용합니다. 이식된 모든 병변에서 동등한 멜라닌 세포 농도를 보장하기 위해 각 병변에 대해 1:2의 확장 비율을 개별적으로 사용했습니다. 세포 현탁액은 기증자 피부를 0.25% 트립신-EDTA(GIBCO) 용액에 40분 동안 37℃에서 두어 준비합니다. 각 샘플과 트립신은 라벨이 붙은 페트리 접시에 부은 다음 링거의 젖산염을 사용하여 중화됩니다. 모든 단계는 엄격한 무균 조건 하에서 층류 공기 흐름 벤치에서 수행됩니다. 표피는 폐기될 진피로부터 분리될 것이다. 그런 다음 표피를 작은 조각으로 자르고 표면에 색소가 남지 ​​않도록 긁어냅니다. 그런 다음 라벨이 부착된 멸균 팔콘 튜브 2개로 ​​옮기고 1,000rpm에서 10분 동안 원심분리합니다. 떠다니는 표피 조각과 상층액은 제거되어 하단에 멜라닌 세포와 각질 세포가 풍부한 표피 세포를 포함하는 세포 펠렛을 남깁니다. 생성된 펠릿을 재생 기술에 의해 생성된 ACM에 한 번, 모낭 현탁액에 한 번, 링거 락테이트 1ml에 한 번 현탁합니다.

여포 세포 현탁액:

• 국소 마취하에 1mm 펀치를 사용하여 귀 뒤의 후두부 두피에서 모낭을 추출합니다. 이식할 부위에 따라 1cm2당 1개의 색소 모낭을 추출합니다. 적출된 모낭은 인산완충식염수(PBS)로 약 3회 세척한다. 그런 다음 모낭을 0.25% 트립신 - 0.05% 에틸렌 디아민 테트라 아세트산(EDTA)과 함께 37°C에서 60분 동안 3번 간격으로 나누어 단일 세포 현탁액을 준비하여 배양합니다. 첫 번째 간격은 30분 동안 지속되었으며, 그 후 분리된 세포를 포함하는 상청액을 새 매 튜브에 붓고 1% 태아 소 혈청으로 중화했습니다. 그런 다음 신선한 트립신을 모낭에 첨가하고 15분 동안 두 번 재인큐베이션했습니다.
• 이러한 세 번의 주기가 끝나면 얇은 각질이 남습니다. 모든 튜브의 세포 현탁액을 단일 튜브에 추가합니다. 결합된 세포 현탁액을 1000rpm에서 5분 동안 원심분리하여 최종 세포 펠릿을 얻습니다. 생성된 현탁액을 NCES 기술에 의해 생성된 멜라닌 세포 펠릿에 첨가하고 비교 가능한 피부 브레이드 병변에 퍼뜨릴 것입니다.

생성된 현탁액은 더마 브레이드 백반 패치에 도포하기 전에 수혜자 영역의 250개 이상의 생존 세포/mm2를 보장하기 위해 트리판 블루 염료 배제 방법을 사용하여 멜라닌 세포 수 및 생존력에 대해 확인됩니다.

두 부위 모두 건조 콜라겐 시트로 덮은 다음 멸균 수술용 패드와 테가덤으로 덮을 것입니다.

붕대를 감은 후 해당 부위를 고정하고 환자에게 수술 부위의 움직임을 제한하도록 안내합니다.

환자는 항생제의 1주 과정을 시작합니다. 1주일 후 드레싱을 제거하고 환자는 3개월 동안 주 3회 엑시머 레이저 세션을 받게 됩니다.

환자는 1주일에 첫 방문 후 3개월 동안 매월 추적 관찰됩니다.

3개월 후에는 정성 및 정량 평가를 모두 수행합니다. 질적으로, 일련의 사진을 사용하여 재색소화 및 색상 일치에 대한 맹검 의사 평가가 수행됩니다. 정량적으로는 포인트 카운팅 방법과 VESTA 점수를 사용하여 재착색 정도를 평가합니다.