刺激的胰高血糖素作为 1 型糖尿病低血糖风险的生物标志物 (MUGGLE)

血糖水平通常由胰岛素和胰高血糖素控制，胰岛素是一种降低高血糖水平的激素，当血糖水平低时，胰高血糖素会释放到血液中以升高葡萄糖。 对于 1 型糖尿病 (T1D) 患者，服用胰岛素药物降低血糖水平有时会导致危险的低血糖水平（低血糖症）。 释放胰高血糖素和纠正血糖的能力各不相同，尤其是在患有 T1D 多年的人群中。 该研究旨在找出刺激后血液胰高血糖素水平与一个人自己的低血糖和低血糖经历相比如何。 这项研究将确定饭后测量的胰高血糖素是否可以用作低血糖风险的血液标志物，并有助于识别高风险个体。

假设：低混合餐后 (MM) 刺激的胰高血糖素分泌预示着低血糖症。

在同意之前，将向所有潜在参与者提供有关该研究的详细书面信息（符合英国通用数据保护条例 (GDPR) 和 2018 年数据保护法），并有机会与研究团队之一进行讨论。 所有参与者都将被告知他们有权随时退出研究，而不会影响或危及任何未来的临床护理。

将向参与者分配一个唯一的研究 ID，以链接所有参与者的研究信息和样本。 参与者的临床特征和样本结果将记录在参与者的病例报告表中并输入研究数据库。

所有参与者都将进行核心数据收集、测量，并在基线 MMTT 和 AST 访问 1 和 2 以及 6 个月的“轻度 MMTT”/重复 AST 访问时通过插管提供禁食和刺激的血液样本。 访问 1 和访问 2 中的 MMTT 和 AST 测试的顺序将被随机化以检查顺序效应。 第 3 次就诊的测试选择取决于第 1 次和第 2 次就诊的胰高血糖素峰值结果。在第 1 次和第 3 次就诊时，将要求参与者完成低血糖问卷数据（Clarke 和 Gold 评分）以评估低血糖意识和生活质量测量可能与 MM-胰高血糖素有关。 参与者将获得 Abbot FreeStyle Libre Pro 连续血糖监测仪 (CGM)，并被要求进行为期 2 周的连续血糖测量 (CGM)。 临床糖尿病护理不会改变，T1D 参与者将在研究期间使用他们自己的胰岛素方案和自我监测（即使是 CGM 或 Abbot FreeStyle Libre Pro）。

将获得禁食样本用于基线测量：常规葡萄糖和 HbA1c、血浆和血清用于储存和未来的批量分析，包括葡萄糖、胰高血糖素、胰岛素（C 肽）和其他感兴趣的标记物的测量，以及用于 T1D 的肝素钠和 PAXgenesRNA 样本免疫功能分析。

刺激样品（参见下面的测试说明）：胰岛素（C 肽）、葡萄糖和胰高血糖素将在所有时间点测量。

在每个测试期结束时，将检查参与者的血糖，并提供有关胰岛素剂量调整的适当建议，并提供便餐。

A) 第 1 次或第 2 次访视（约 2.5 小时）的混合膳食耐受性测试 (MMTT) 理由：MMTT 将在一系列标准 MMTT 时间点（ 0、30、60、90 和 120 分钟）75 人。 将在同一时间点测量氟化物草酸盐样品中的葡萄糖。

参与者将：

• 在整个访问过程中密切监测是否有任何不适或问题，并在需要时提供适当的建议/支持。
• 给予 Ensure HP 或 Fortisip（6ml/kg 至最大 360mls）
• 在特定时间间隔采集血液样本，以测量胰岛素、C 肽、葡萄糖和胰高血糖素：餐后 -10、0、30、60、90、120 分钟。

B) 精氨酸刺激试验 (AST) 就诊 1 或 2（约 1 小时） 基本原理。 MMTT（尽管方便，因为它避免了对 IV 刺激的需要）有局限性，包括胃排空、摄取和对肠内分泌分泌的影响的差异。 因此，将在 MMTT 期间将反应与在 MMTT 访问的单独访问、静脉内精氨酸刺激、精氨酸刺激试验 (AST)（1 分钟内 5 g 精氨酸）期间获得的反应进行比较。 葡萄糖、血浆胰高血糖素和 C 肽将在精氨酸推注后的基线和特定时间间隔进行测量。 该测试主要用于测试参与者 β 细胞的最大胰岛素分泌能力。

AST 测试包括：

• 设置。 静脉导管将插入双臂的肘前静脉。 一只手臂将用于输注精氨酸（氨基酸），另一只手臂用于间歇取样。
• 基线样本将在 -10 和 0 分钟时采集。 静脉注射最大刺激剂量的盐酸精氨酸 (5 g) 45 秒。 在精氨酸推注后，将以 2、5、10、15 和 30 分钟的间隔收集样本。

C) 'Light MMTT' - 第 3 次访问，大约在第 1 次访问后 6 个月（2 小时） 此测试与上面对 MMTT 的描述相同，但根据第一次 MMTT 和 AST 的评估，将在信息最丰富的时间仅收集一个样本. 将收集临床数据，以及低血糖问卷和为期 2 周的 CGM 数据收集，参与者采用盲法雅培 FreeStyle Libre Pro。

在第 3 次就诊时，测试的选择将是“轻度 MMTT”或重复 AST，由第 1 次和第 2 次就诊时进行的测试的峰值胰高血糖素结果确定。

数据收集和记录：数据最初将使用研究特定的病例报告表 (CRF) 进行记录，硬拷贝存储在试验主文件 (TMF) 中。 匿名研究数据将记录在特定于研究的数据库中，并在分析之前审查差异和缺失数据。

研究结束定义：研究结束是指最终参与者 7 个月的随访期之后的 3 个月，以便最终收集数据。

提前退出研究的标准：如果参与者退出，数据将根据协议和研究 SOP 收集到退出点。 如果参与者提前退出但未撤销同意，则数据和样本将保留在研究中并包含在任何分析中。 如果撤回同意，研究样本和数据将根据当地指南保存/销毁。

样品：详细的 SOP/工作说明将详细说明样品收集、标记、记录和管理的临床程序。 研究样本的中央实验室分析将在埃克塞特血液科学实验室进行。

储存样本：用于储存的多余样本应在收到后 24 小时内处理、记录并冷冻在 -80°C 下。 所有保存的样本都将存储在研究 ID 下，该文件将研究代码链接到由首席研究员安全保存的个人身份信息，只有接受过数据保护培训并需要此信息来履行其职责的人员才能访问。

安全、定义和报告：

风险：血样将由受过静脉穿刺训练的研究小组成员采集。 在 MMTT/AST 测试期间，可能存在高血糖风险，如果需要，将提供适当的建议/支持。

好处：该研究可以提高对参与者低血糖风险的理解。 从长远来看，这项工作可能提供证据表明，混合餐后 α 细胞释放胰高血糖素的能力在 T1D 患者中是可变的，与低血糖风险相关，并且可能是低血糖风险的生物标志物。

不良反应的定义和报告（应该报告什么？） 记录 SAE 的时间范围是从同意的时间到研究对象最后一次访问后的一周。 根据标准 NHS 研发协议，将在 24 小时内向 CI 和赞助商报告任何注意到的可报告不良反应。

保险：赞助商的公共责任将由埃克塞特大学提供，用于研究的设计和管理。 NHS 赔偿将申请在现场进行研究。

数据处理和记录保存：CI 负责确保参与者的匿名性得到保护和维护，确保他们的身份不受任何未经授权方的影响。 CI 是数据的“保管人”。 与研究参与者相关的所有信息都将根据英国 GDPR 和 2018 年数据保护法、NHS Caldicott Guardian、英国健康与社会关怀政策框架以及研究伦理委员会批准进行保密和管理。

将向每位参与者分配一个唯一的研究 ID。 所有研究数据和样本都将进行伪匿名处理，并根据研究 ID 存储在受密码保护的安全研究数据库中。 可识别信息将存储在 NHS 服务器上一个单独的、受密码保护的安全数据库中，以使研究团队能够进行研究。

研究数据的所有纸质副本将存储在 ID 号下，并保存在研究设施内的上锁、门禁控制的办公室内；研究数据将与可识别信息分开保存。 参与数据分析的研究人员将无法访问个人身份数据，只能访问匿名研究数据。 研究出版物或进展报告中不会包含任何可识别的数据。

任何需要发送给第三方的参与者信息都将遵守这些伪匿名参数。 参与者的可识别数据不会发送到欧盟以外的地区。

记录保留和存档：研究完成后，英国健康与社会关怀政策框架和赞助商信托政策要求记录再保存 15 年。 在研究结束时，匿名数据将包含在研究的最终数据集中，并无限期存储在 vivli.org 上 或类似的赞助商/资助者批准的数据存储库。 个人数据将存储在参与者同意的情况下，以便与他们联系以跟进他们未来的健康状况，和/或参与未来的研究。 如果参与者同意，他们的样本和项目数据将赠送给半岛研究银行（经批准的组织银行，REC ref 19/SW/1059）以用于未来的研究。

研究结束时，它将由埃克塞特大学的 CI 存档。

统计分析：对于 75 的样本量，应该可以检测到刺激胰高血糖素与低血糖之间的相关性 r = 0.3，95% 置信区间为 0.08 至 0.49，加上 MM 诱导的血浆胰高血糖素增加与血浆 co 的相关性-胃蛋白酶。

合规性：CI 将确保研究的进行符合赫尔辛基宣言 (2013) 的原则、GCP 的原则以及所有适用的监管要求，包括但不限于英国健康与社会政策框架2004 年护理和人用药物（临床试验）条例，于 2006 年、2008 年和 2009 年修订，以及任何未来相关或替代的欧盟条例、信托和研发办公室政策和程序以及任何后续修订。

出版政策：结果将被撰写并提交发表在同行评审的期刊上。 摘要将提交给国内和国际会议。 结果将在定期的内部会议上提交给临床同事。 概述研究主要发现的信件/通讯将发送给所有参与者，并将上传到研究网站。 也可以安排现场/在线活动。