Stimulovaný glukagon jako biomarker hypoglykemického rizika u diabetu 1. typu (MUGGLE)

Hladiny glukózy v krvi jsou normálně řízeny inzulínem, hormonem, který snižuje vysoké hladiny glukózy v krvi, a glukagonem, který se uvolňuje do krve ke zvýšení glukózy, když jsou hladiny nízké. U lidí s diabetem 1. typu (T1D) může užívání inzulínu ke snížení hladiny glukózy někdy vést k nebezpečně nízké hladině cukru v krvi (hypoglykémii). Schopnost uvolňovat glukagon a korigovat hladinu glukózy v krvi se může lišit, zejména u lidí, kteří mají T1D po celá léta. Cílem studie je zjistit, jak jsou hladiny glukagonu v krvi po stimulu v porovnání s vlastní zkušeností osoby s hypoglykémií a hypoglykémií. Tento výzkum určí, zda by glukagon měřený po jídle mohl být použit jako krevní marker rizika hypoglykémie a pomoci identifikovat jedince s vysokým rizikem.

Hypotéza: Nízká sekrece glukagonu stimulovaná po smíšeném jídle (MM) předpovídá hypoglykémii.

Před udělením souhlasu budou všem potenciálním účastníkům poskytnuty podrobné písemné informace o studii (které jsou v souladu s britským obecným nařízením o ochraně osobních údajů (GDPR) a zákonem o ochraně osobních údajů z roku 2018) a příležitostí prodiskutovat to s jedním z výzkumných týmů. Všichni účastníci budou informováni o svém právu kdykoli odstoupit ze studie, aniž by tím byla dotčena nebo ohrožena jakákoli budoucí klinická péče.

Účastníkovi bude přiděleno jedinečné identifikační číslo studie, které propojí všechny informace a vzorky účastníků studie. Klinické charakteristiky účastníka a výsledky vzorků budou zaznamenány na formuláři zprávy o případu účastníka a vloženy do databáze studie.

Všichni účastníci podstoupí sběr základních dat, měření a poskytnou nalačno a stimulované krevní vzorky prostřednictvím kanyly při výchozích návštěvách MMTT a AST 1 a 2 a znovu při 6měsíční návštěvě „Light MMTT“ / opakované návštěvě AST. Pořadí testů MMTT a AST při návštěvách 1 a 2 bude náhodně vybráno, aby se zkontroloval účinek pořadí. Výběr testu pro návštěvu 3 závisí na maximálních výsledcích glukagonu z návštěv 1 a 2. Při návštěvách 1 a 3 budou účastníci požádáni, aby vyplnili údaje z dotazníku o hypoglykémii (skóre Clarke a Gold), aby bylo možné posoudit povědomí o hypoglykémii a měření kvality života, která se může týkat MM-glukagonu. Účastníci dostanou kontinuální monitor glukózy v krvi Abbot FreeStyle Libre Pro (CGM) a budou požádáni, aby provedli 2týdenní kontinuální měření glykémie (CGM). Klinická péče o diabetes se nezmění a účastníci s T1D budou během studie používat své vlastní inzulínové režimy a sebemonitorování (i když CGM nebo Abbot FreeStyle Libre Pro).

Budou získány vzorky nalačno pro základní měření: rutinní glukóza a HbA1c, plazma a sérum pro skladování a budoucí dávkovou analýzu včetně měření glukózy, glukagonu, inzulínu (C-peptidu) a dalších sledovaných markerů, plus vzorky heparinu sodného a PAXgenesRNA pro T1D analýza imunitních funkcí.

Stimulované vzorky (viz popisy testů níže): inzulín (C-peptid), glukóza a glukagon budou měřeny ve všech časových bodech.

Na konci každého testovacího období bude účastníkovi zkontrolována hladina glukózy v krvi a bude mu poskytnuto vhodné doporučení týkající se úpravy dávkování inzulínu a bude poskytnuto lehké jídlo.

A) Test tolerance smíšeného jídla (MMTT) při návštěvě 1 nebo 2 (přibližně 2½ hodiny) Odůvodnění: MMTT poskytne konfirmační analýzu glukagonu po smíšeném jídle uloženého ve vzorcích plazmy BD P800 a EDTA v rozmezí standardních časových bodů MMTT ( 0, 30, 60, 90 a 120 min) u 75 osob. Glukóza bude měřena ve vzorcích fluoridoxalátu ve stejných časových bodech.

Účastníci budou:

• být během návštěvy pečlivě sledováni, zda nedochází k nepohodlí nebo problémům, a v případě potřeby jim bude poskytnuta vhodná rada/podpora.
• být podán Ujistěte se, že HP nebo Fortisip (6 ml/kg až max. 360 ml)
• nechat si odebírat vzorky krve pro měření inzulinu, C-peptidu, glukózy a glukagonu ve specifických intervalech: -10, 0, 30, 60, 90, 120 minut po jídle.

B) Argininový stimulační test (AST) Návštěva 1 nebo 2 (přibližně 1 hodina) Odůvodnění. MMTT (přestože je vhodný, protože se vyhýbá potřebě IV stimulu) má omezení, včetně rozdílů ve vyprazdňování žaludku, vychytávání a účinků na enteroendokrinní sekreci. Proto budou odpovědi během MMTT porovnány s odpověďmi získanými během intravenózní stimulace argininem, argininovým stimulačním testem (AST), (5 g argininu během 1 minuty) při návštěvě oddělené od návštěvy MMTT. Glukóza, plazmatický glukagon a C-peptid budou měřeny na začátku a ve specifických intervalech po bolusové injekci argininu. Tento test je určen především k testování maximální kapacity sekrece inzulínu beta buněk účastníka.

Test AST zahrnuje:

• Založit. Intravenózní katétry budou zavedeny do antekubitálních žil na obou pažích. Jedno rameno bude použito pro infuzi argininu (aminokyseliny) a druhé rameno pro přerušovaný odběr vzorků.
• Základní vzorky budou odebrány v -10 a 0 minutách. Maximálně stimulující dávka hydrochloridu argininu (5 g) bude aplikována intravenózně po dobu 45 sekund. Vzorky budou odebírány v intervalech 2, 5, 10, 15 a 30 minut po bolusu argininu.

C) „Světlý MMTT“ – návštěva 3, přibližně 6 měsíců po návštěvě 1 (2 hodiny) Tento test je stejný, jako je popsáno výše pro MMTT, ale bude odebrán pouze jeden vzorek v nejinformativnějším čase, jak bylo hodnoceno z prvního MMTT a AST . Budou shromažďována klinická data plus dotazníky o hypoglykémii a 2týdenní sběr dat CGM s Abbott FreeStyle Libre Pro zaslepenými účastníky.

Při návštěvě 3 bude výběr testu buď „lehký MMTT“ nebo opakovaný AST, určený podle maximálních výsledků glukagonu z testů provedených při návštěvách 1 a 2.

Sběr a záznam dat: Data budou zpočátku zaznamenána pomocí formuláře zprávy o případu specifického pro studii (CRF), s tištěnými kopiemi uloženými v Trial Master File (TMF). Anonymizovaná výzkumná data budou zaznamenána do databáze specifické pro studii a před analýzou zkontrolována, zda v nich nejsou nesrovnalosti a chybějící data.

Definice konce studie: Konec studie je 3 měsíce po 7měsíčním období následného sledování posledního účastníka, aby se umožnil konečný sběr dat.

Kritéria pro předčasné vyřazení ze studie: Pokud účastník odstoupí, budou data až do odstoupení shromážděna v souladu s protokolem a SOP studie. Pokud účastník předčasně odvolal, ale neodvolal svůj souhlas, data a vzorky zůstanou ve studii a budou zahrnuty do jakékoli analýzy. Pokud je souhlas odvolán, vzorky a data studie budou uchovávány/zničeny v souladu s místními směrnicemi.

Vzorky: Podrobný SOP/pracovní instrukce bude podrobně popisovat klinický postup pro odběr vzorků, značení, protokolování a správu. Centrální laboratorní analýza vzorků pro studii bude provedena v Exeter Blood Sciences Laboratory.

Skladované vzorky: Přebytečné vzorky pro skladování by měly být zpracovány, zaznamenány a zmraženy na -80 °C do 24 hodin od přijetí. Všechny uložené vzorky budou uloženy pod ID studie se souborem propojujícím kód studie s osobními identifikovatelnými informacemi, které bezpečně uchovávají hlavní zkoušející, a jsou přístupné pouze pracovníkům se školením v oblasti ochrany údajů, kteří tyto informace potřebují k plnění svých povinností.

Bezpečnost, definice a hlášení:

Rizika: Vzorky krve budou odebírat členové výzkumného týmu vyškolení v venepunkci. Během testu MMTT/AST existuje možné riziko hyperglykémie a v případě potřeby bude poskytnuta vhodná rada/podpora.

Výhody: Studie může zlepšit porozumění riziku hypoglykémie účastníků. Z dlouhodobého hlediska může tato práce poskytnout důkaz, že schopnost alfa buněk uvolňovat glukagon po smíšeném jídle je u lidí s T1D proměnlivá, spojená s rizikem hypoglykémie a mohla by být biomarkerem pro riziko hypoglykémie.

Definice a hlášení nežádoucích účinků (co by se mělo hlásit?) Časový rámec pro záznam SAE bude od doby souhlasu do jednoho týdne po poslední návštěvě subjektu studie. Jakékoli hlášené nežádoucí účinky budou hlášeny do 24 hodin CI a sponzorovi podle standardních protokolů NHS pro výzkum a vývoj.

Pojištění: Veřejnou odpovědnost sponzora poskytne Univerzita v Exeteru za návrh a řízení studie. Za provedení studie na místě bude žádat odškodnění NHS.

Manipulace s daty a uchovávání záznamů: CI je odpovědná za zajištění ochrany a udržování anonymity účastníků a za zajištění ochrany jejich identity před jakýmikoli neoprávněnými stranami. CI je „správcem“ dat. Všechny informace týkající se účastníků studie budou důvěrné a budou spravovány v souladu s britským GDPR a zákonem o ochraně dat z roku 2018, NHS Caldicott Guardian, britským politickým rámcem pro zdravotní a sociální péči a schválením Etického výboru pro výzkum.

Každému účastníkovi bude přiděleno jedinečné ID studie. Všechna data studie a vzorky budou pseudoanonymizovány a uloženy pod ID studie v zabezpečené databázi studie chráněné heslem. Identifikovatelné informace budou uloženy v samostatné zabezpečené databázi chráněné heslem na serveru NHS, aby výzkumný tým mohl provést studii.

Všechny papírové kopie studijních dat budou uchovávány pod identifikačním číslem a uchovávány v uzamčených kancelářích s kontrolovaným přístupem v rámci výzkumných zařízení; údaje z výzkumu budou uchovávány odděleně od identifikovatelných informací. Výzkumníci zapojení do analýzy dat nebudou mít přístup k osobním identifikovatelným datům, pouze k anonymizovaným výzkumným datům. Ve výzkumných publikacích nebo zprávách o pokroku nebudou zahrnuta žádná identifikovatelná data.

Veškeré informace o účastnících, které mají být zaslány třetí straně, budou dodržovat tyto pseudoanonymizované parametry. Mimo EU nebudou zasílány žádné údaje umožňující identifikaci účastníků.

Uchovávání a archivace záznamů: Po dokončení výzkumné studie je požadavkem Rámce politiky Spojeného království pro zdravotní a sociální péči a Politiky důvěry sponzorů, aby byly záznamy uchovávány po dobu dalších 15 let. Na konci studie budou anonymizovaná data zahrnuta do konečného souboru dat studie a uložena na dobu neurčitou na vivli.org nebo podobné úložiště dat schválené sponzorem/financujícím subjektem. Osobní údaje budou uloženy tam, kde účastník udělí souhlas s tím, aby byl kontaktován za účelem sledování jeho budoucího zdravotního stavu a/nebo účasti na budoucích studiích. Pokud účastník dá souhlas, jeho vzorky a data z projektu budou předány Peninsula Research Bank (schválená tkáňová banka, REC ref. 19/SW/1059) k použití pro budoucí výzkum.

Na konci studie bude archivován CI na University of Exeter.

Statistická analýza: Pro velikost vzorku 75 by mělo být možné detekovat korelaci mezi stimulovaným glukagonem a hypoglykémií r=0,3, s 95% intervalem spolehlivosti 0,08 až 0,49, plus korelaci zvýšení plazmatického glukagonu vyvolaného MM k plazmatické ko - peptin.

Soulad: CI zajistí, že studie bude provedena v souladu se zásadami Helsinské deklarace (2013), zásadami GCP a v souladu se všemi platnými regulačními požadavky, včetně mimo jiné Rámce politiky Spojeného království pro zdraví a sociální oblast. Nařízení o péči a léčivech pro humánní použití (klinická hodnocení) z roku 2004, ve znění pozdějších předpisů v letech 2006, 2008 a 2009 a veškerá budoucí relevantní nebo nahrazující nařízení EU, zásady a postupy svěřeneckého úřadu a úřadu pro výzkum a vývoj a jakékoli následné změny.

Publikační politika: Výsledky budou sepsány a předloženy k publikaci v recenzovaném časopise (časopisech). Abstrakty budou zaslány na národní a mezinárodní konference. Výsledky budou prezentovány klinickým kolegům na pravidelných interních setkáních. Všem účastníkům bude zaslán dopis/zpravodaj popisující klíčová zjištění studie a bude nahrán na webovou stránku studie. Lze domluvit i osobní/online akci.