Glucagone stimolato come biomarcatore del rischio ipoglicemico nel diabete di tipo 1 (MUGGLE)

I livelli di glucosio nel sangue sono normalmente controllati dall'insulina, un ormone che abbassa i livelli elevati di glucosio nel sangue, e dal glucagone che viene rilasciato nel sangue per aumentare il glucosio quando i livelli sono bassi. Per le persone con diabete di tipo 1 (T1D), l'assunzione di farmaci insulinici per abbassare i livelli di glucosio a volte può portare a livelli di zucchero nel sangue pericolosamente bassi (ipoglicemia). La capacità di rilasciare glucagone e correggere la glicemia può variare, in particolare nelle persone che hanno avuto T1D per anni. Lo studio mira a scoprire in che modo i livelli di glucagone nel sangue dopo uno stimolo si confrontano con l'esperienza di una persona di ipoglicemia e ipoglicemia. Questa ricerca stabilirà se il glucagone misurato dopo un pasto potrebbe essere utilizzato come marcatore ematico del rischio di ipoglicemia e aiutare a identificare le persone ad alto rischio.

Ipotesi: una bassa secrezione di glucagone stimolata dopo il pasto misto (MM) predice l'ipoglicemia.

Prima del consenso, a tutti i potenziali partecipanti verranno fornite informazioni scritte dettagliate sullo studio (che è conforme al Regolamento generale sulla protezione dei dati del Regno Unito (GDPR) e al Data Protection Act 2018) e l'opportunità di discuterne con uno dei membri del gruppo di ricerca. Tutti i partecipanti saranno informati del loro diritto di ritirarsi dallo studio in qualsiasi momento senza pregiudizio o pericolo per qualsiasi futura assistenza clinica.

Al partecipante verrà assegnato un ID studio univoco per collegare tutte le informazioni e i campioni dello studio del partecipante. Le caratteristiche cliniche e i risultati del campione del partecipante saranno registrati sul Modulo di segnalazione del caso del partecipante e inseriti nel database dello studio.

Tutti i partecipanti saranno sottoposti alla raccolta dei dati di base, alle misurazioni e forniranno campioni di sangue a digiuno e stimolati tramite una cannula al basale MMTT e AST visite 1 e 2 e di nuovo ai 6 mesi "Light MMTT" / ripetere la visita AST. L'ordine dei test MMTT e AST nelle visite 1 e 2 sarà randomizzato per verificare l'effetto dell'ordine. La scelta del test per la Visita 3 dipende dai risultati del picco di glucagone delle Visite 1 e 2. Alle Visite 1 e 3, ai partecipanti verrà chiesto di completare i dati del questionario sull'ipoglicemia (punteggi Clarke e Gold) per valutare la consapevolezza dell'ipoglicemia e le misure della qualità della vita che può riguardare il MM-glucagone. Ai partecipanti verrà fornito un monitor continuo della glicemia (CGM) Abbot FreeStyle Libre Pro e verrà chiesto di eseguire una misurazione continua della glicemia (CGM) di 2 settimane. La cura clinica del diabete non verrà modificata e i partecipanti con T1D utilizzeranno i propri regimi insulinici e l'automonitoraggio (anche se CGM o Abbot FreeStyle Libre Pro) durante lo studio.

Verranno ottenuti campioni a digiuno per le misurazioni di base: glucosio di routine e HbA1c, plasma e siero per la conservazione e future analisi in lotti comprese le misurazioni di glucosio, glucagone, insulina (peptide C) e altri marcatori di interesse, oltre a campioni di eparina sodica e PAXgenesRNA per T1D analisi della funzione immunitaria.

Campioni stimolati (vedere le descrizioni dei test di seguito): insulina (peptide C), glucosio e glucagone saranno misurati in tutti i punti temporali.

Alla fine di ogni periodo di test, verrà controllata la glicemia del partecipante e verranno forniti consigli appropriati relativi agli aggiustamenti del dosaggio di insulina e verrà fornito un pasto leggero.

A) Test di tolleranza al pasto misto (MMTT) alla visita 1 o 2 (circa 2 ore e mezza) Motivazione: L'MMTT fornirà un'analisi di conferma del glucagone post-pasto misto conservato in campioni di plasma BD P800 ed EDTA in un intervallo di punti temporali MMTT standard ( 0, 30, 60, 90 e 120 min) in 75 persone. Il glucosio sarà misurato in campioni di ossalato di fluoruro agli stessi punti temporali.

I partecipanti:

• essere monitorati attentamente durante la loro visita per eventuali disagi o problemi e, se necessario, verranno forniti consigli/supporto appropriati.
• essere somministrato Assicurare HP o Fortisip (6 ml/kg fino a un massimo di 360 ml)
• raccogliere campioni di sangue, per misurare l'insulina, il peptide C, il glucosio e il glucagone, a intervalli specifici: -10, 0, 30, 60, 90, 120 minuti dopo il pasto.

B) Test di stimolazione con arginina (AST) Visita 1 o 2 (circa 1 ora) Razionale. Un MMTT (nonostante sia conveniente perché evita la necessità di uno stimolo EV) ha dei limiti, comprese le differenze nello svuotamento gastrico, l'assorbimento e gli effetti sulla secrezione enteroendocrina. Pertanto, le risposte saranno confrontate durante l'MMTT con quelle ottenute durante un test di stimolazione con arginina endovenosa, Arginine Stimulation Test (AST), (5 g di arginina durante 1 minuto) in una visita separata dalla visita MMTT. Il glucosio, il glucagone plasmatico e il peptide C saranno misurati al basale e ad intervalli specifici dopo l'iniezione in bolo di arginina. Questo test è progettato principalmente per testare la massima capacità di secrezione di insulina delle cellule beta di un partecipante.

Il test AST prevede:

• Impostare. I cateteri endovenosi verranno inseriti nelle vene antecubitali di entrambe le braccia. Un braccio verrà utilizzato per l'infusione di arginina (amminoacido) e l'altro braccio per il campionamento intermittente.
• I campioni di riferimento verranno prelevati a -10 e 0 minuti. Una dose stimolante massima di arginina cloridrato (5 g) verrà iniettata per via endovenosa per 45 secondi. I campioni saranno raccolti a intervalli di 2, 5, 10, 15 e 30 minuti dopo il bolo di arginina.

C) "MMTT leggero" - Visita 3, circa 6 mesi dopo la Visita 1 (2 ore) Questo test è come descritto sopra per MMTT ma verrà raccolto un solo campione nel momento più informativo, come valutato dal primo MMTT e AST . Verranno raccolti dati clinici, oltre a questionari sull'ipoglicemia e raccolta di dati CGM di 2 settimane con Abbott FreeStyle Libre Pro in cieco.

Alla Visita 3, la scelta del test sarà un "MMTT leggero" o un AST ripetuto, determinato dai risultati del picco di glucagone dai test condotti alle Visite 1 e 2.

Raccolta e registrazione dei dati: i dati verranno inizialmente registrati utilizzando un modulo di segnalazione del caso specifico dello studio (CRF), con copie cartacee archiviate nel Trial Master File (TMF). I dati di ricerca resi anonimi saranno registrati su un database specifico dello studio e rivisti per discrepanze e dati mancanti prima dell'analisi.

Fine dello studio Definizione: la fine dello studio è 3 mesi dopo il periodo di follow-up di 7 mesi del partecipante finale per consentire la raccolta finale dei dati.

Criteri per il ritiro prematuro dallo studio: se un partecipante si ritira, i dati verranno raccolti fino al momento del ritiro in linea con il protocollo e le SOP dello studio. Laddove un partecipante abbia ritirato prematuramente ma non revocato il consenso, i dati e i campioni rimarranno all'interno dello studio e inclusi in qualsiasi analisi. In caso di revoca del consenso, i campioni e i dati dello studio verranno conservati/distrutti secondo le linee guida locali.

Campioni: una SOP/istruzione di lavoro dettagliata descriverà in dettaglio la procedura clinica per la raccolta, l'etichettatura, la registrazione e la gestione dei campioni. L'analisi del laboratorio centrale dei campioni di studio sarà effettuata presso l'Exeter Blood Sciences Laboratory.

Campioni conservati: i campioni in eccedenza per la conservazione devono essere elaborati, registrati e congelati a -80°C entro 24 ore dal ricevimento. Tutti i campioni salvati verranno archiviati sotto l'ID dello studio, con il file che collega il codice dello studio alle informazioni di identificazione personale conservate in modo sicuro dal Ricercatore principale, accessibile solo al personale con formazione in protezione dei dati che richiede queste informazioni per svolgere le proprie mansioni.

Sicurezza, definizioni e segnalazione:

Rischi: i campioni di sangue saranno raccolti dai membri del gruppo di ricerca addestrati alla venopuntura. Durante il test MMTT/AST, esiste un possibile rischio di iperglicemia e, se necessario, verranno forniti consigli/supporto appropriati.

Benefici: lo studio può migliorare la comprensione del rischio di ipoglicemia dei partecipanti. A lungo termine, questo lavoro può fornire la prova che la capacità delle cellule alfa di rilasciare glucagone dopo un pasto misto è variabile all'interno delle persone con T1D, associata al rischio di ipoglicemia e potrebbe essere un biomarcatore per il rischio di ipoglicemia.

Definizioni e segnalazione degli effetti avversi (cosa dovrebbe essere segnalato?) Il periodo di tempo per la registrazione degli SAE sarà dal momento del consenso a una settimana dopo l'ultima visita di un soggetto dello studio. Eventuali effetti avversi segnalabili rilevati verranno segnalati entro 24 ore all'IC e allo sponsor secondo i protocolli standard di ricerca e sviluppo del NHS.

Assicurazione: la responsabilità pubblica dello sponsor sarà fornita dall'Università di Exeter per la progettazione e la gestione dello studio. Verrà applicata l'indennità del SSN per la conduzione dello studio presso il sito.

Gestione dei dati e conservazione dei registri: l'IC è responsabile di garantire che l'anonimato dei partecipanti sia protetto e mantenuto, assicurando che le loro identità siano protette da qualsiasi parte non autorizzata. L'IC è il "Custode" dei dati. Tutte le informazioni relative ai partecipanti allo studio saranno mantenute riservate e gestite in conformità con il GDPR del Regno Unito e il Data Protection Act 2018, NHS Caldicott Guardian, UK Policy Framework for Health & Social Care e Research Ethics Committee Approval.

A ciascun partecipante verrà assegnato un ID studio univoco. Tutti i dati e i campioni dello studio saranno pseudoanonimizzati e archiviati con l'ID dello studio in un database dello studio protetto da password. Le informazioni identificabili verranno archiviate in un database separato, protetto da password, conservato su un server NHS per consentire al gruppo di ricerca di intraprendere lo studio.

Tutte le copie cartacee dei dati dello studio saranno archiviate con numero di identificazione e conservate in uffici chiusi e ad accesso controllato all'interno delle strutture di ricerca; i dati della ricerca saranno tenuti separatamente dalle informazioni identificabili. I ricercatori coinvolti nell'analisi dei dati non avranno accesso ai dati personali identificabili, solo ai dati di ricerca resi anonimi. Nessun dato identificabile sarà incluso nelle pubblicazioni di ricerca o nelle relazioni sullo stato di avanzamento.

Tutte le informazioni sui partecipanti che devono essere inviate a terzi aderiranno a questi parametri pseudo-anonimi. Nessun dato identificabile del partecipante verrà inviato al di fuori dell'UE.

Conservazione e archiviazione dei record: quando lo studio di ricerca è completo, è un requisito del Policy Framework for Health & Social Care e della Sponsor Trust Policy del Regno Unito che i record vengano conservati per altri 15 anni. Alla fine dello studio, i dati resi anonimi saranno inclusi nel set di dati finale dello studio e archiviati a tempo indeterminato su vivli.org o simile repository di dati approvato da sponsor/finanziatori. I dati personali verranno archiviati laddove il partecipante fornisca il consenso a essere contattato per il follow-up sul suo futuro stato di salute e/o sulla partecipazione a studi futuri. Se il partecipante dà il consenso, i suoi campioni e i dati del progetto saranno donati alla Peninsula Research Bank (una banca dei tessuti approvata, REC ref 19/SW/1059) per essere utilizzati per ricerche future.

Alla fine dello studio, sarà archiviato dal CI presso l'Università di Exeter.

Analisi statistica: per una dimensione del campione di 75, dovrebbe essere possibile rilevare una correlazione tra glucagone stimolato e ipoglicemia di r=0,3, con intervalli di confidenza al 95% da 0,08 a 0,49, più la correlazione degli aumenti indotti da MM nel glucagone plasmatico rispetto alla co plasma -peptina.

Conformità: l'IC garantirà che lo studio sia condotto in conformità con i principi della Dichiarazione di Helsinki (2013), i principi della GCP e in conformità con tutti i requisiti normativi applicabili, inclusi, a titolo esemplificativo ma non esaustivo, il quadro normativo del Regno Unito per la salute e l'assistenza sociale Regolamento 2004 sulla cura e sui medicinali per uso umano (sperimentazione clinica), come modificato nel 2006, 2008 e 2009 e qualsiasi futuro regolamento UE rilevante o sostitutivo, politiche e procedure dell'ufficio Trust e R&S ed eventuali modifiche successive.

Politica di pubblicazione: i risultati saranno redatti e inviati per la pubblicazione in una o più riviste sottoposte a revisione paritaria. Gli abstract saranno presentati a convegni nazionali e internazionali. I risultati saranno presentati ai colleghi clinici in occasione di regolari riunioni interne. Una lettera/newsletter che delinei i principali risultati dello studio sarà inviata a tutti i partecipanti e sarà caricata sul sito web dello studio. È inoltre possibile organizzare un evento di persona/online.