Stimuleret glukagon som en biomarkør for hypoglykæmisk risiko ved type 1-diabetes (MUGGLE)

Blodglukoseniveauer styres normalt af insulin, et hormon, der sænker høje blodsukkerniveauer, og glukagon, som frigives til blodet for at hæve glukose, når niveauet er lavt. For personer med type 1-diabetes (T1D) kan insulinmedicin for at sænke glukoseniveauerne nogle gange resultere i farligt lave blodsukkerniveauer (hypoglykæmi). Evnen til at frigive glukagon og korrigere blodsukkeret kan variere, især hos personer, der har haft T1D i årevis. Undersøgelsen har til formål at finde ud af, hvordan blodglucagonniveauer efter en stimulus sammenlignes med en persons egen oplevelse af hypoglykæmi og hypoglykæmi. Denne forskning vil fastslå, om glukagon målt efter et måltid kan bruges som blodmarkør for hypoglykæmirisiko og hjælpe med at identificere personer med høj risiko.

Hypotese: Lavt efterblandet måltid (MM) stimuleret glukagonsekretion forudsiger hypoglykæmi.

Forud for samtykke vil alle potentielle deltagere blive forsynet med detaljerede skriftlige oplysninger om undersøgelsen (der overholder den britiske databeskyttelsesforordning (GDPR) og databeskyttelsesloven 2018) og en mulighed for at diskutere det med en af ​​forskerholdet. Alle deltagere vil blive informeret om deres ret til at trække sig fra undersøgelsen til enhver tid uden at det berører eller er til fare for fremtidig klinisk behandling.

Et unikt undersøgelses-id vil blive tildelt deltageren for at forbinde alle deltagernes undersøgelsesoplysninger og prøver. Deltagerens kliniske karakteristika og prøveresultater vil blive registreret på deltagerens Case Report Form og indtastet i undersøgelsesdatabasen.

Alle deltagere vil gennemgå kernedataindsamling, målinger og give fastende og stimulerede blodprøver via en kanyle ved baseline MMTT- og AST-besøg 1 og 2 og igen ved 6-måneders 'Light MMTT' / gentagne AST-besøg. Rækkefølgen af ​​MMTT- og AST-test i besøg 1 og 2 vil blive randomiseret for at kontrollere for en rækkefølge-effekt. Testvalg for besøg 3 afhænger af topglucagonresultaterne fra besøg 1 og 2. Ved besøg 1 og 3 vil deltagerne blive bedt om at udfylde hypoglykæmi-spørgeskemadataene (Clarke og Gold-score) for at vurdere bevidstheden om hypoglykæmi og livskvalitetsmål, som kan relatere til MM-glukagon. Deltagerne vil få udleveret en Abbot FreeStyle Libre Pro kontinuerlig blodsukkermonitor (CGM) og bedt om at udføre en 2-ugers kontinuerlig måling af blodsukker (CGM). Klinisk diabetesbehandling vil ikke blive ændret, og deltagere med T1D vil bruge deres egne insulinregimer og selvovervågning (selv om CGM eller Abbot FreeStyle Libre Pro) under undersøgelsen.

Fastende prøver vil blive opnået til basislinjemålinger: rutinemæssig glucose og HbA1c, plasma og serum til opbevaring og fremtidig batchanalyse, herunder målinger af glucose, glucagon, insulin (C-peptid) og andre markører af interesse, plus natriumheparin og PAXgenesRNA-prøver til T1D immunfunktionsanalyse.

Stimulerede prøver (se testbeskrivelser nedenfor): insulin (C-peptid), glucose og glukagon vil blive målt på alle tidspunkter.

Ved afslutningen af ​​hver testperiode vil deltagerens blodsukker blive kontrolleret, og der vil blive givet passende råd vedrørende insulindosisjusteringer, og der vil blive serveret et let måltid.

A) Mixed Meal Tolerance Test (MMTT) ved besøg 1 eller 2 (ca. 2½ time) Begrundelse: MMTT vil give bekræftende analyse af post-blandet måltid glukagon opbevaret i BD P800 og EDTA plasmaprøver på en række standard MMTT tidspunkter ( 0, 30, 60, 90 og 120 min) hos 75 personer. Glukose vil blive målt i fluoridoxalatprøver på samme tidspunkter.

Deltagerne vil:

• blive overvåget nøje under deres besøg for ubehag eller problemer, og passende råd/støtte vil blive givet, hvis det er nødvendigt.
• gives Ensure HP eller Fortisip (6ml/kg til et maksimum på 360mls)
• få taget blodprøver for at måle insulin, C-peptid, glukose og glukagon med specifikke intervaller: -10, 0, 30, 60, 90, 120 minutter efter måltid.

B) Arginin-stimuleringstest (AST) Besøg 1 eller 2 (ca. 1 time) Begrundelse. En MMTT (på trods af at den er praktisk, fordi den undgår behovet for en IV-stimulus) har begrænsninger, herunder forskelle i gastrisk tømning, optagelse og effekter på enteroendokrin sekretion. Derfor vil svarene blive sammenlignet under MMTT med dem, der opnås under en intravenøs arginin-challenge, Arginin Stimulation Test (AST), (5 g Arginin i løbet af 1 min) ved et separat besøg fra MMTT-besøget. Glucose, plasmaglucagon og C-peptid vil blive målt ved baseline og specifikke intervaller efter arginin bolusinjektionen. Denne test er primært designet til at teste den maksimale insulinsekretionskapacitet af en deltagers betaceller.

AST-testen involverer:

• Opsætning. Intravenøse katetre vil blive indsat i antecubitale vener i begge arme. Den ene arm vil blive brugt til infusion af arginin (aminosyre), og den anden arm til intermitterende prøvetagning.
• Baseline prøver vil blive taget ved -10 og 0 minutter. En maksimalt stimulerende dosis af argininhydrochlorid (5 g) vil blive injiceret intravenøst ​​i 45 sekunder. Prøver vil blive indsamlet med 2, 5, 10, 15 og 30 minutters intervaller efter argininbolus.

C) 'Let MMTT' - Besøg 3, ca. 6 måneder efter besøg 1 (2 timer) Denne test er som beskrevet ovenfor for MMTT, men kun en enkelt prøve vil blive indsamlet på det mest informative tidspunkt, som vurderet fra den første MMTT og AST . Kliniske data vil blive indsamlet, plus hypoglykæmi-spørgeskemaer og 2-ugers CGM-dataindsamling med deltagerblindede Abbott FreeStyle Libre Pro.

Ved besøg 3 vil valget af test være enten en 'Light MMTT' eller en gentagen AST, bestemt af topglucagonresultaterne fra testene udført ved besøg 1 og 2.

Dataindsamling og -registrering: Data vil i første omgang blive registreret ved hjælp af en undersøgelsesspecifik case-rapportformular (CRF), med papirkopier gemt i Trial Master File (TMF). Anonymiserede forskningsdata vil blive registreret i en undersøgelsesspecifik database og gennemgået for uoverensstemmelser og manglende data før analyse.

Slut på undersøgelse Definition: Slutningen af ​​undersøgelsen er de 3 måneder efter den endelige deltagers 7 måneders opfølgningsperiode for at muliggøre endelig indsamling af data.

Kriterier for tidlig tilbagetrækning fra undersøgelsen: Hvis en deltager trækker sig, vil der blive indsamlet data indtil tilbagetrækningen i overensstemmelse med protokollen og undersøgelsens SOP'er. Hvis en deltager for tidligt har trukket sit samtykke tilbage, men ikke tilbagekaldt, vil data og prøver forblive i undersøgelsen og inkluderet i enhver analyse. Hvis samtykke trækkes tilbage, vil undersøgelsesprøver og data blive opbevaret/ødelagt i henhold til lokale retningslinjer.

Prøver: En detaljeret SOP/arbejdsinstruktion vil detaljere den kliniske procedure for prøveindsamling, mærkning, logning og håndtering. Central laboratorieanalyse af undersøgelsesprøverne vil blive udført på Exeter Blood Sciences Laboratory.

Opbevarede prøver: Overskydende prøver til opbevaring skal behandles, logges og fryses ved -80°C inden for 24 timer efter modtagelsen. Alle gemte prøver vil blive gemt under undersøgelses-id'et, med filen, der forbinder undersøgelseskoden til personlig identificerbar information, der opbevares sikkert af hovedefterforskeren, og som kun er tilgængelig for personale med uddannelse i databeskyttelse, som kræver disse oplysninger for at udføre deres opgaver.

Sikkerhed, definitioner og rapportering:

Risici: Blodprøverne vil blive indsamlet af medlemmer af forskerholdet, der er uddannet i venepunktur. Under MMTT/AST-testen er der en mulig risiko for hyperglykæmi, og passende råd/støtte vil blive givet, hvis det er nødvendigt.

Fordele: Studiet kan forbedre forståelsen af ​​deltagernes risiko for hypoglykæmi. På længere sigt kan dette arbejde give bevis for, at alfacellernes evne til at frigive glukagon efter et blandet måltid er variabel hos mennesker med T1D, forbundet med hypoglykæmirisiko, og kan være en biomarkør for hypoglykæmirisiko.

Definitioner og rapportering af bivirkninger (hvad skal rapporteres?) Tidsrammen for registrering af SAE'er vil være fra tidspunktet for samtykke til en uge efter det sidste besøg af en undersøgelsesperson. Eventuelle rapporterbare bivirkninger vil blive rapporteret inden for 24 timer til CI og sponsoren i henhold til standard NHS F&U-protokoller.

Forsikring: Sponsorens offentlige ansvar vil blive leveret af University of Exeter for design og ledelse af undersøgelsen. NHS-skadeserstatning vil gælde for udførelsen af ​​undersøgelsen på stedet.

Datahåndtering og registrering: CI er ansvarlig for at sikre, at deltagernes anonymitet beskyttes og vedligeholdes, og sikrer, at deres identiteter er beskyttet mod uautoriserede parter. CI er dataenes 'depotholder'. Alle oplysninger relateret til undersøgelsesdeltagere vil blive holdt fortrolige og administreret i overensstemmelse med UK GDPR og Data Protection Act 2018, NHS Caldicott Guardian, UK Policy Framework for Health & Social Care og Research Ethics Committee Godkendelse.

Et unikt studie-id vil blive tildelt hver deltager. Alle undersøgelsesdata og prøver vil blive pseudo-anonymiseret og gemt under undersøgelses-id'et på en sikker adgangskodebeskyttet undersøgelsesdatabase. Identificerbare oplysninger vil blive lagret på en separat, sikker adgangskodebeskyttet database, der holdes på en NHS-server for at gøre det muligt for forskerholdet at gennemføre undersøgelsen.

Alle papirkopier af undersøgelsesdata vil blive opbevaret under ID-nummer og opbevaret i aflåste, adgangskontrollerede kontorer inden for forskningsfaciliteterne; forskningsdata vil blive opbevaret separat til identificerbare oplysninger. Forskere involveret i dataanalyse vil ikke have adgang til personhenførbare data, kun de anonymiserede forskningsdata. Ingen identificerbare data vil blive inkluderet i forskningspublikationer eller fremskridtsrapporter.

Enhver deltagerinformation, der skal sendes til en tredjepart, vil overholde disse pseudo-anonymiserede parametre. Ingen deltageridentificerbare data vil blive sendt uden for EU.

Opbevaring og arkivering af journaler: Når forskningsundersøgelsen er afsluttet, er det et krav i UK Policy Framework for Health & Social Care og Sponsor Trust Policy, at optegnelserne opbevares i yderligere 15 år. Ved afslutningen af ​​undersøgelsen vil anonymiserede data blive inkluderet i undersøgelsens endelige datasæt og gemt på ubestemt tid på vivli.org eller lignende sponsor/finansierer godkendt datalager. Personoplysninger vil blive opbevaret, hvor der gives samtykke fra deltageren til at blive kontaktet til opfølgning på deres fremtidige helbredstilstand og/eller om deltagelse i fremtidige undersøgelser. Hvor samtykke er givet af deltageren, vil deres prøver og data fra projektet blive givet til Peninsula Research Bank (en godkendt vævsbank, REC ref 19/SW/1059) til brug for fremtidig forskning.

Ved afslutningen af ​​undersøgelsen vil den blive arkiveret af CI ved University of Exeter.

Statistisk analyse: For en prøvestørrelse på 75 burde det være muligt at påvise en korrelation mellem stimuleret glukagon og hypoglykæmi på r=0,3, med 95 % konfidensintervaller 0,08 til 0,49, plus korrelation af MM-inducerede stigninger i plasmaglucagon til plasma co -peptin.

Overholdelse: CI vil sikre, at undersøgelsen udføres i overensstemmelse med principperne i Helsinki-deklarationen (2013), principperne for GCP og i overensstemmelse med alle gældende lovkrav, herunder men ikke begrænset til UK Policy Framework for Health & Social Care and the Medicines for Human Use (Clinical Trial) Regulations 2004, som ændret i 2006, 2008 og 2009 og eventuelle fremtidige relevante eller erstattende EU-forordninger, Trust and R&D Office politikker og procedurer og eventuelle efterfølgende ændringer.

Publikationspolitik: Resultaterne vil blive skrevet op og indsendt til offentliggørelse i et eller flere peer-reviewede tidsskrifter. Abstracts vil blive indsendt til nationale og internationale konferencer. Resultaterne vil blive præsenteret for kliniske kolleger på regelmæssige interne møder. Et brev/nyhedsbrev, der beskriver de vigtigste resultater af undersøgelsen, vil blive sendt til alle deltagere og vil blive uploadet til undersøgelsens hjemmeside. Et personligt/online arrangement kan også arrangeres.