Gestimuleerd glucagon als biomarker van hypoglykemisch risico bij diabetes type 1 (MUGGLE)

Bloedglucosespiegels worden normaal gesproken gereguleerd door insuline, een hormoon dat hoge bloedglucosespiegels verlaagt, en glucagon dat aan het bloed wordt afgegeven om glucose te verhogen wanneer de bloedglucosespiegels laag zijn. Voor mensen met diabetes type 1 (T1D) kan het nemen van insulinemedicatie om de glucosespiegel te verlagen soms leiden tot gevaarlijk lage bloedsuikerspiegels (hypoglykemie). Het vermogen om glucagon af te geven en de bloedglucose te corrigeren kan variëren, vooral bij mensen die al jaren T1D hebben. De studie heeft tot doel erachter te komen hoe de glucagonspiegels in het bloed na een stimulus zich verhouden tot iemands eigen ervaring met hypoglykemie en hypoglykemie. Dit onderzoek zal vaststellen of glucagon gemeten na een maaltijd kan worden gebruikt als bloedmarker voor het risico op hypoglykemie en kan helpen om personen met een hoog risico te identificeren.

Hypothese: Lage post-mixed meal (MM) gestimuleerde glucagonsecretie voorspelt hypoglykemie.

Voorafgaand aan hun toestemming krijgen alle potentiële deelnemers gedetailleerde schriftelijke informatie over het onderzoek (die voldoet aan de Britse Algemene Verordening Gegevensbescherming (AVG) en de Wet op de gegevensbescherming van 2018) en krijgen ze de kans om dit te bespreken met een van de onderzoeksteams. Alle deelnemers zullen op de hoogte worden gebracht van hun recht om zich op elk moment terug te trekken uit het onderzoek, zonder afbreuk te doen aan of gevaar te lopen voor toekomstige klinische zorg.

Aan de deelnemer wordt een unieke onderzoeks-ID toegewezen om alle onderzoeksinformatie en monsters van de deelnemer te koppelen. De klinische kenmerken en monsterresultaten van de deelnemer worden vastgelegd op het Case Report Form van de deelnemer en ingevoerd in de onderzoeksdatabase.

Alle deelnemers zullen kerngegevensverzameling en -metingen ondergaan en nuchtere en gestimuleerde bloedmonsters verstrekken via een canule bij de baseline MMTT- en AST-bezoeken 1 en 2 en opnieuw bij het 6 maanden durende 'Light MMTT' /herhaal AST-bezoek. De volgorde van MMTT- en AST-tests in bezoeken 1 en 2 wordt gerandomiseerd om te controleren op een volgorde-effect. Testkeuze voor Bezoek 3 hangt af van de piekglucagonresultaten van Bezoeken 1 en 2. Bij Bezoeken 1 en 3 wordt de deelnemers gevraagd om de hypoglykemievragenlijstgegevens (Clarke- en Gold-scores) in te vullen om het bewustzijn van hypoglykemie en maatregelen voor de kwaliteit van leven te beoordelen die kan betrekking hebben op de MM-glucagon. Deelnemers krijgen een Abbot FreeStyle Libre Pro continue bloedglucosemeter (CGM) en worden gevraagd om gedurende 2 weken continu de bloedglucose (CGM) te meten. Klinische diabeteszorg zal niet worden gewijzigd en deelnemers met T1D zullen hun eigen insulineregimes en zelfcontrole gebruiken (zelfs als CGM of Abbot FreeStyle Libre Pro) tijdens het onderzoek.

Nuchtere monsters zullen worden verkregen voor basislijnmetingen: routinematige glucose en HbA1c, plasma en serum voor opslag en toekomstige batchanalyse inclusief metingen van glucose, glucagon, insuline (C-peptide) en andere interessante markers, plus natriumheparine en PAXgenesRNA-monsters voor T1D analyse van de immuunfunctie.

Gestimuleerde monsters (zie onderstaande testbeschrijvingen): insuline (C-peptide), glucose en glucagon worden op alle tijdstippen gemeten.

Aan het einde van elke testperiode wordt de bloedglucose van de deelnemer gecontroleerd en wordt passend advies gegeven met betrekking tot aanpassing van de insulinedosering en wordt een lichte maaltijd verstrekt.

A) Mixed Meal Tolerance Test (MMTT) bij bezoek 1 of 2 (ongeveer 2½ uur) Achtergrond: De MMTT zal een bevestigende analyse geven van post-mixed meal glucagon opgeslagen in BD P800- en EDTA-plasmamonsters op een reeks standaard MMTT-tijdstippen ( 0, 30, 60, 90 en 120 min) bij 75 personen. Glucose wordt gemeten in fluoride-oxalaatmonsters op dezelfde tijdstippen.

Deelnemers zullen:

• tijdens hun bezoek nauwlettend worden gecontroleerd op eventuele ongemakken of problemen en indien nodig zal passend advies/ondersteuning worden gegeven.
• worden gegeven Zorg HP of Fortisip (6ml/kg tot een maximum van 360mls)
• laat bloedmonsters nemen om insuline, C-peptide, glucose en glucagon te meten, met specifieke tussenpozen: -10, 0, 30, 60, 90, 120 minuten na de maaltijd.

B) Arginine Stimulatie Test (AST) Bezoek 1 of 2 (ongeveer 1 uur) Rationale. Een MMTT (ondanks dat het handig is omdat het de noodzaak van een IV-stimulus vermijdt) heeft beperkingen, waaronder verschillen in maaglediging, opname en effecten op entero-endocriene secretie. Daarom zullen de reacties tijdens de MMTT worden vergeleken met die verkregen tijdens een intraveneuze arginine-uitdaging, Arginine Stimulation Test (AST), (5 g arginine gedurende 1 minuut) bij een ander bezoek dan het MMTT-bezoek. Glucose, plasmaglucagon en C-peptide worden gemeten bij aanvang en specifieke intervallen na de Arginine-bolusinjectie. Deze test is in de eerste plaats bedoeld om de maximale insulinesecretiecapaciteit van de bètacellen van een deelnemer te testen.

De AST-test omvat:

• Opgericht. Intraveneuze katheters worden in beide armen in antecubitale aderen ingebracht. Eén arm zal worden gebruikt voor infusie van arginine (aminozuur) en de andere arm voor intermitterende bemonstering.
• Basislijnmonsters worden genomen bij -10 en 0 minuten. Een maximaal stimulerende dosis argininehydrochloride (5 g) wordt gedurende 45 seconden intraveneus geïnjecteerd. Monsters worden verzameld met tussenpozen van 2, 5, 10, 15 en 30 minuten na de argininebolus.

C) 'Light MMTT' - Bezoek 3, ongeveer 6 maanden na Bezoek 1 (2 uur) Deze test is zoals hierboven beschreven voor MMTT, maar er wordt slechts één monster afgenomen op het meest informatieve tijdstip, zoals beoordeeld vanaf de eerste MMTT en AST . Klinische gegevens zullen worden verzameld, plus vragenlijsten over hypoglykemie en 2 weken durende CGM-gegevensverzameling met door de deelnemer geblindeerde Abbott FreeStyle Libre Pro.

Bij bezoek 3 is de keuze van de test een 'lichte MMTT' of een herhaalde AST, bepaald door de piekglucagonresultaten van de tests die zijn uitgevoerd bij bezoeken 1 en 2.

Gegevensverzameling en -registratie: Gegevens worden in eerste instantie geregistreerd met behulp van een onderzoeksspecifiek casusrapportformulier (CRF), met gedrukte exemplaren die worden opgeslagen in het Trial Master File (TMF). Geanonimiseerde onderzoeksgegevens worden vastgelegd in een studiespecifieke database en voorafgaand aan de analyse beoordeeld op discrepanties en ontbrekende gegevens.

Einde van de studie Definitie: Het einde van de studie is de 3 maanden na de follow-upperiode van 7 maanden van de laatste deelnemer om de laatste gegevensverzameling mogelijk te maken.

Criteria voor voortijdige terugtrekking uit het onderzoek: Wanneer een deelnemer zich terugtrekt, worden gegevens verzameld tot het punt van terugtrekking in overeenstemming met het protocol en de SOP's van het onderzoek. Als een deelnemer de toestemming voortijdig heeft ingetrokken maar niet heeft ingetrokken, blijven de gegevens en monsters in het onderzoek en worden ze in elke analyse opgenomen. Als de toestemming wordt ingetrokken, worden onderzoeksmonsters en -gegevens bewaard/vernietigd volgens de lokale richtlijnen.

Monsters: Een gedetailleerde SOP/werkinstructie beschrijft de klinische procedure voor het verzamelen, labelen, loggen en beheren van monsters. Centrale laboratoriumanalyse van de onderzoeksmonsters zal worden uitgevoerd in het Exeter Blood Sciences Laboratory.

Bewaarde monsters: Overtollige monsters voor opslag moeten binnen 24 uur na ontvangst worden verwerkt, gelogd en ingevroren bij -80°C. Alle opgeslagen monsters worden opgeslagen onder de onderzoeks-ID, waarbij het bestand dat de onderzoekscode koppelt aan persoonlijk identificeerbare informatie die veilig wordt bewaard door de hoofdonderzoeker, alleen toegankelijk is voor personeel met een opleiding in gegevensbescherming die deze informatie nodig hebben om hun taken uit te voeren.

Veiligheid, definities en rapportage:

Risico's: De bloedmonsters worden afgenomen door leden van het onderzoeksteam die getraind zijn in venapunctie. Tijdens de MMTT/AST-test bestaat er een mogelijk risico op hyperglykemie en wordt indien nodig passend advies/ondersteuning gegeven.

Voordelen: De studie kan het begrip van het hypoglykemierisico van de deelnemers verbeteren. Op de langere termijn kan dit werk het bewijs leveren dat het vermogen van alfacellen om glucagon af te geven na een gemengde maaltijd variabel is bij mensen met T1D, geassocieerd met het risico op hypoglykemie, en een biomarker zou kunnen zijn voor het risico op hypoglykemie.

Definities en melding van bijwerkingen (wat moet er gemeld worden?) Het tijdsbestek voor het vastleggen van SAE's is vanaf het moment van toestemming tot een week na het laatste bezoek van een proefpersoon. Alle gerapporteerde nadelige effecten die worden opgemerkt, worden binnen 24 uur gerapporteerd aan de CI en de sponsor volgens de standaard R&D-protocollen van de NHS.

Verzekering: de openbare aansprakelijkheid van de sponsor wordt verstrekt door de Universiteit van Exeter voor het ontwerp en het beheer van het onderzoek. NHS-vrijwaring is van toepassing voor het uitvoeren van het onderzoek op de locatie.

Gegevensverwerking en archivering: De CI is verantwoordelijk om ervoor te zorgen dat de anonimiteit van deelnemers wordt beschermd en behouden, en ervoor te zorgen dat hun identiteit wordt beschermd tegen onbevoegde partijen. Het CI is de 'bewaarder' van de gegevens. Alle informatie met betrekking tot studiedeelnemers zal vertrouwelijk worden behandeld en worden beheerd in overeenstemming met de UK GDPR en Data Protection Act 2018, NHS Caldicott Guardian, UK Policy Framework for Health & Social Care, en Research Ethics Committee Approval.

Aan elke deelnemer wordt een uniek Studie-ID toegewezen. Alle onderzoeksgegevens en monsters worden pseudo-geanonimiseerd en opgeslagen onder de Study ID in een beveiligde, met een wachtwoord beveiligde onderzoeksdatabase. Identificeerbare informatie zal worden opgeslagen in een aparte, beveiligde, met een wachtwoord beveiligde database op een NHS-server om het onderzoeksteam in staat te stellen het onderzoek uit te voeren.

Alle papieren kopieën van onderzoeksgegevens worden onder een ID-nummer opgeslagen en bewaard in afgesloten, toegang gecontroleerde kantoren binnen de onderzoeksfaciliteiten; onderzoeksgegevens worden gescheiden gehouden van identificeerbare informatie. Onderzoekers die betrokken zijn bij data-analyse krijgen geen toegang tot persoonlijk identificeerbare data, alleen de geanonimiseerde onderzoeksdata. In onderzoekspublicaties of voortgangsrapportages worden geen identificeerbare gegevens opgenomen.

Alle deelnemersinformatie die naar een derde partij moet worden verzonden, voldoet aan deze pseudo-geanonimiseerde parameters. Er worden geen identificeerbare gegevens van deelnemers verzonden buiten de EU.

Bewaren en archiveren van documenten: Wanneer het onderzoek is voltooid, is het een vereiste van het UK Policy Framework for Health & Social Care en Sponsor Trust Policy dat de records nog eens 15 jaar worden bewaard. Aan het einde van het onderzoek worden geanonimiseerde gegevens opgenomen in de definitieve dataset van het onderzoek en voor onbepaalde tijd opgeslagen op vivli.org of vergelijkbare door sponsor/financier goedgekeurde gegevensopslagplaats. Persoonlijke gegevens worden opgeslagen wanneer de deelnemer toestemming geeft om gecontacteerd te worden voor de follow-up van zijn toekomstige gezondheidsstatus en/of over deelname aan toekomstige studies. Wanneer toestemming wordt gegeven door de deelnemer, zullen hun monsters en gegevens van het project worden geschonken aan de Peninsula Research Bank (een goedgekeurde weefselbank, REC ref 19/SW/1059) om te worden gebruikt voor toekomstig onderzoek.

Aan het einde van het onderzoek zal het worden gearchiveerd door het CI van de Universiteit van Exeter.

Statistische analyse: Voor een steekproefomvang van 75 zou het mogelijk moeten zijn om een ​​correlatie te detecteren tussen gestimuleerd glucagon en hypoglykemie van r=0,3, met 95% betrouwbaarheidsintervallen van 0,08 tot 0,49, plus correlatie van MM-geïnduceerde verhogingen van plasma glucagon tot plasma co -peptine.

Naleving: De CI zal ervoor zorgen dat het onderzoek wordt uitgevoerd in overeenstemming met de principes van de Verklaring van Helsinki (2013), de principes van GCP en in overeenstemming met alle toepasselijke wettelijke vereisten, inclusief maar niet beperkt tot het UK Policy Framework for Health & Social Care and the Medicines for Human Use (Clinical Trial) Regulations 2004, zoals gewijzigd in 2006, 2008 en 2009 en eventuele toekomstige relevante of vervangende EU-regelgeving, beleidslijnen en procedures van het trust- en R&D-bureau en eventuele latere wijzigingen.

Publicatiebeleid: de resultaten worden opgeschreven en ingediend voor publicatie in (een) collegiaal getoetste tijdschrift(en). Abstracts zullen worden voorgelegd aan nationale en internationale conferenties. De resultaten zullen worden gepresenteerd aan klinische collega's tijdens regelmatige interne bijeenkomsten. Een brief/nieuwsbrief met de belangrijkste bevindingen van het onderzoek zal naar alle deelnemers worden gestuurd en zal worden geüpload naar de onderzoekswebsite. Er kan ook een persoonlijk/online evenement worden georganiseerd.