Glucagon estimulado como um biomarcador de risco hipoglicêmico no diabetes tipo 1 (MUGGLE)

Os níveis de glicose no sangue são normalmente controlados pela insulina, um hormônio que reduz os níveis elevados de glicose no sangue, e pelo glucagon, que é liberado no sangue para aumentar a glicose quando os níveis estão baixos. Para pessoas com diabetes tipo 1 (DM1), tomar insulina para diminuir os níveis de glicose pode, às vezes, resultar em níveis perigosamente baixos de açúcar no sangue (hipoglicemia). A capacidade de liberar glucagon e corrigir a glicemia pode variar, principalmente em pessoas com DM1 há anos. O estudo visa descobrir como os níveis de glucagon no sangue após um estímulo se comparam à experiência de hipoglicemia e hipoglicemia de uma pessoa. Esta pesquisa estabelecerá se o glucagon medido após uma refeição pode ser usado como um marcador sanguíneo de risco de hipoglicemia e ajudará a identificar indivíduos com alto risco.

Hipótese: Baixa secreção de glucagon estimulada após refeição mista (MM) prediz hipoglicemia.

Antes do consentimento, todos os participantes em potencial receberão informações escritas detalhadas sobre o estudo (que cumprem o Regulamento Geral de Proteção de Dados do Reino Unido (GDPR) e a Lei de Proteção de Dados de 2018) e uma oportunidade de discuti-lo com um membro da equipe de pesquisa. Todos os participantes serão informados de seu direito de desistir do estudo a qualquer momento, sem prejuízo ou prejuízo para qualquer atendimento clínico futuro.

Um ID de estudo exclusivo será atribuído ao participante para vincular todas as informações e amostras do estudo do participante. As características clínicas do participante e os resultados da amostra serão registrados no Formulário de Relato de Caso do participante e inseridos no banco de dados do estudo.

Todos os participantes serão submetidos à coleta de dados básicos, medições e fornecerão amostras de sangue em jejum e estimuladas por meio de uma cânula nas visitas MMTT e AST 1 e 2 da linha de base e novamente nos 6 meses 'MMTT leve'/repetir visita AST. A ordem dos testes MMTT e AST nas visitas 1 e 2 será randomizada para verificar um efeito de ordem. A escolha do teste para a Visita 3 depende dos resultados de pico de glucagon das Visitas 1 e 2. Nas Visitas 1 e 3, os participantes serão solicitados a preencher os dados do questionário de hipoglicemia (escores de Clarke e Gold) para avaliar a consciência da hipoglicemia e as medidas de qualidade de vida que pode estar relacionado com o MM-glucagon. Os participantes receberão um monitor contínuo de glicose no sangue (CGM) Abbot FreeStyle Libre Pro e solicitados a realizar uma medição contínua de glicose no sangue (CGM) por 2 semanas. O tratamento clínico do diabetes não será alterado e os participantes com DM1 usarão seus próprios regimes de insulina e automonitoramento (mesmo se CGM ou Abbot FreeStyle Libre Pro) durante o estudo.

Amostras em jejum serão obtidas para medições de linha de base: glicose de rotina e HbA1c, plasma e soro para armazenamento e análises futuras em lote, incluindo medidas de glicose, glucagon, insulina (peptídeo C) e outros marcadores de interesse, além de heparina sódica e amostras de PAXgenesRNA para DM1 análise da função imunológica.

Amostras estimuladas (ver descrições de teste abaixo): insulina (C-peptídeo), glicose e glucagon serão medidos em todos os pontos de tempo.

No final de cada período de teste, a glicemia do participante será verificada e orientações apropriadas serão fornecidas em relação aos ajustes de dosagem de insulina e uma refeição leve será fornecida.

A) Teste de Tolerância a Refeições Mistas (MMTT) na Visita 1 ou 2 (aproximadamente 2 horas e meia) Justificativa: O MMTT fornecerá análise confirmatória de glucagon pós-refeição misturada armazenado em amostras de plasma BD P800 e EDTA em uma faixa de pontos de tempo MMTT padrão ( 0, 30, 60, 90 e 120 min) em 75 pessoas. A glicose será medida em amostras de fluoreto de oxalato nos mesmos pontos de tempo.

Os participantes irão:

• ser monitorado de perto durante a visita para qualquer desconforto ou problema e aconselhamento/apoio apropriado será dado, se necessário.
• ser administrado Assegurar HP ou Fortisip (6ml/kg até um máximo de 360mls)
• ter amostras de sangue coletadas, para medir insulina, peptídeo C, glicose e glucagon, em intervalos específicos: -10, 0, 30, 60, 90, 120 minutos após a refeição.

B) Teste de Estimulação de Arginina (AST) Visita 1 ou 2 (aproximadamente 1 hora) Justificativa. Um MMTT (apesar de ser conveniente porque evita a necessidade de um estímulo IV) tem limitações, incluindo diferenças no esvaziamento gástrico, captação e efeitos na secreção enteroendócrina. Portanto, as respostas serão comparadas durante o MMTT com aquelas obtidas durante um desafio de arginina intravenosa, Arginine Stimulation Test (AST), (5 g Arginina durante 1 min) em uma visita separada da visita MMTT. A glicose, o glucagon plasmático e o peptídeo C serão medidos na linha de base e em intervalos específicos após a injeção em bolus de arginina. Este teste é projetado principalmente para testar a capacidade máxima de secreção de insulina das células beta de um participante.

O teste AST envolve:

• Configuração. Cateteres intravenosos serão inseridos nas veias antecubitais em ambos os braços. Um braço será usado para infusão de Arginina (aminoácido) e o outro braço para amostragem intermitente.
• As amostras de linha de base serão coletadas em -10 e 0 minutos. Uma dose estimulante máxima de Cloridrato de Arginina (5 g) será injetada por via intravenosa por 45s. As amostras serão coletadas em intervalos de 2, 5, 10, 15 e 30 minutos após o bolus de Arginina.

C) 'MMTT Leve' - Visita 3, aproximadamente 6 meses após a Visita 1 (2 horas) Este teste é conforme descrito acima para MMTT, mas apenas uma única amostra será coletada no momento mais informativo, conforme avaliado a partir do primeiro MMTT e AST . Serão coletados dados clínicos, além de questionários de hipoglicemia e coleta de dados CGM de 2 semanas com o Abbott FreeStyle Libre Pro cego do participante.

Na Visita 3, a escolha do teste será 'Light MMTT' ou uma repetição de AST, determinada pelos resultados de pico de glucagon dos testes realizados nas Visitas 1 e 2.

Coleta e Registro de Dados: Os dados serão inicialmente registrados usando um formulário de relatório de caso específico do estudo (CRF), com cópias impressas armazenadas no Arquivo Mestre do Estudo (TMF). Dados de pesquisa anonimizados serão registrados em um banco de dados específico do estudo e revisados ​​quanto a discrepâncias e dados ausentes antes da análise.

Definição de Fim do Estudo: O fim do estudo é 3 meses após o período de acompanhamento de 7 meses do participante final para permitir a coleta final de dados.

Critérios para retirada prematura do estudo: Quando um participante se retira, os dados serão coletados até o ponto de retirada de acordo com o protocolo e os SOPs do estudo. Quando um participante retirou prematuramente, mas não revogou o consentimento, os dados e as amostras permanecerão no estudo e serão incluídos em qualquer análise. Quando o consentimento for retirado, as amostras e os dados do estudo serão mantidos/destruídos de acordo com as diretrizes locais.

Amostras: Uma instrução de trabalho/POP detalhada detalhará o procedimento clínico para coleta de amostras, rotulagem, registro e gerenciamento. A análise laboratorial central das amostras do estudo será realizada no Exeter Blood Sciences Laboratory.

Amostras armazenadas: As amostras excedentes para armazenamento devem ser processadas, registradas e congeladas a -80°C dentro de 24 horas após o recebimento. Todas as amostras salvas serão armazenadas sob o ID do estudo, com o arquivo vinculando o código do estudo às informações de identificação pessoal mantidas em segurança pelo Pesquisador Principal, acessíveis apenas ao pessoal com treinamento em proteção de dados que precisa dessas informações para desempenhar suas funções.

Segurança, definições e relatórios:

Riscos: As amostras de sangue serão coletadas por membros da equipe de pesquisa treinados em punção venosa. Durante o teste MMTT/AST, existe um possível risco de hiperglicemia e será dado aconselhamento/suporte adequado, se necessário.

Benefícios: O estudo pode melhorar a compreensão do risco de hipoglicemia dos participantes. A longo prazo, este trabalho pode fornecer evidências de que a capacidade das células alfa de liberar glucagon após uma refeição mista é variável em pessoas com DM1, associada ao risco de hipoglicemia e pode ser um biomarcador para o risco de hipoglicemia.

Definições e notificação de efeitos adversos (o que deve ser relatado?) O prazo para registrar SAEs será desde o momento do consentimento até uma semana após a última visita de um sujeito do estudo. Quaisquer efeitos adversos reportáveis ​​observados serão relatados dentro de 24 horas ao CI e ao Patrocinador de acordo com os protocolos padrão de P&D do NHS.

Seguro: A responsabilidade pública do patrocinador será fornecida pela Universidade de Exeter para a concepção e gestão do estudo. A indenização do NHS será aplicada para a condução do estudo no local.

Manipulação de dados e manutenção de registros: O IC é responsável por garantir que o anonimato dos participantes seja protegido e mantido, garantindo que suas identidades sejam protegidas de quaisquer partes não autorizadas. O CI é o 'Custodiante' dos dados. Todas as informações relacionadas aos participantes do estudo serão mantidas em sigilo e gerenciadas de acordo com o GDPR do Reino Unido e a Lei de Proteção de Dados de 2018, NHS Caldicott Guardian, Estrutura de Política do Reino Unido para Saúde e Assistência Social e Aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa.

Uma ID de estudo exclusiva será alocada para cada participante. Todos os dados e amostras do estudo serão pseudo-anonimizados e armazenados sob a ID do estudo em um banco de dados de estudo seguro e protegido por senha. As informações identificáveis ​​serão armazenadas em um banco de dados separado e protegido por senha, mantido em um servidor do NHS para permitir que a equipe de pesquisa realize o estudo.

Todas as cópias em papel dos dados do estudo serão armazenadas sob o número de identificação e mantidas em escritórios trancados e com acesso controlado dentro das instalações de pesquisa; os dados da pesquisa serão mantidos separados das informações identificáveis. Os pesquisadores envolvidos na análise de dados não terão acesso aos dados de identificação pessoal, apenas aos dados de pesquisa anonimizados. Nenhum dado identificável será incluído em publicações de pesquisa ou relatórios de progresso.

Qualquer informação de participante que deva ser enviada a terceiros seguirá esses parâmetros pseudo-anonimizados. Nenhum dado de identificação do participante será enviado para fora da UE.

Retenção e arquivamento de registros: Quando o estudo de pesquisa estiver concluído, é um requisito do Quadro de Políticas de Saúde e Assistência Social do Reino Unido e da Política de Fideicomisso do Patrocinador que os registros sejam mantidos por mais 15 anos. No final do estudo, os dados anônimos serão incluídos no conjunto de dados final do estudo e armazenados indefinidamente em vivli.org ou repositório de dados semelhante aprovado pelo patrocinador/financiador. Os dados pessoais serão armazenados quando for dado o consentimento do participante para ser contactado para acompanhamento do seu estado de saúde futuro e/ou sobre a participação em estudos futuros. Quando o consentimento for dado pelo participante, suas amostras e dados do projeto serão doados ao Peninsula Research Bank (um banco de tecidos aprovado, REC ref 19/SW/1059) para serem usados ​​em pesquisas futuras.

Ao final do estudo, ele será arquivado pelo CI da Universidade de Exeter.

Análise estatística: para um tamanho de amostra de 75, deve ser possível detectar uma correlação entre o glucagon estimulado e a hipoglicemia de r = 0,3, com intervalos de confiança de 95% de 0,08 a 0,49, além da correlação dos aumentos induzidos por MM no glucagon plasmático para o co plasmático -peptina.

Conformidade: O CI garantirá que o estudo seja conduzido em conformidade com os princípios da Declaração de Helsinque (2013), os princípios do GCP e de acordo com todos os requisitos regulatórios aplicáveis, incluindo, entre outros, o Quadro de Políticas de Saúde e Social do Reino Unido Regulamentos de Cuidados e Medicamentos para Uso Humano (Ensaios Clínicos) de 2004, conforme alterado em 2006, 2008 e 2009 e quaisquer regulamentos da UE relevantes ou substitutos futuros, políticas e procedimentos de Trust e R&D Office e quaisquer alterações subsequentes.

Política de Publicação: Os resultados serão redigidos e enviados para publicação em periódicos revisados ​​por pares. Os resumos serão submetidos a congressos nacionais e internacionais. Os resultados serão apresentados aos colegas clínicos em reuniões internas regulares. Uma carta/newsletter descrevendo as principais descobertas do estudo será enviada a todos os participantes e será carregada no site do estudo. Um evento presencial/online também pode ser organizado.