低氧张力 CAPA-IVM 培养

获能体外成熟（CAPA-IVM）最近在生发囊泡（GV）阶段的卵母细胞培养方面取得了进展。 这种方法是传统体外受精（IVF）和胞浆内单精子注射（ICSI）的改良版本，在轻度刺激或不发生受控卵巢刺激后进行。 具体而言，IVM 可用于诊断为多囊卵巢综合征 (PCOS)、次级卵泡数量较多（占患者总数的近 15%）的患者，并治疗一系列存在卵巢过度刺激、静脉血栓栓塞或卵巢癌风险的患者。扭转。 此外，CAPA-IVM 有助于缩短治疗时间，成本更低，并且无需多次后续检查即可提高患者的便利性。 CAPA-IVM组首次胚胎移植后的活产率为35.2%，与IVF组的43.2%没有统计学差异（风险差异-8.1%；95%置信区间为-16.6%至0.5%） ）。 但CAPA-IVM每个周期的优质胚胎数量和累计临床妊娠率仍低于cIVF。

此外，由于缺乏同时报告的高质量证据，应考虑进一步调查。 因此，改善CAPA-IVM中的卵母细胞成熟条件以收获最佳数量的卵母细胞和最高的胚胎发育可能性至关重要。 对动物和人体模型进行的许多研究表明，CAPA-IVM 的有效性取决于多种因素。 其中，氧气（O2）浓度等环境培养条件对于产生健康成熟的卵母细胞起着至关重要的作用。 O2是输卵管、子宫和卵泡的重要理化成分，与代谢活动、卵母细胞成熟和早期胚胎发育密切相关。 最近的研究表明，氧气浓度可能通过缺氧诱导因子（HIF）显着调节卵母细胞成熟和早期胚胎发育。 关于IVM培养环境中的O2浓度指标尚未达成共识。 卵母细胞包埋培养系统在全球范围内常用两种 O2 浓度：5% 和 20%。 在人体内，卵丘-卵母细胞复合体 (COC) 在氧气浓度较低（2% 至 9%）的条件下成熟。

相反，COC 在 IVM 操作和培养过程中暴露于 20% 的大气 O2 浓度。 尽管5%的浓度模拟了输卵管和子宫中最合适的环境，但20%的O2在IVM技术中被广泛应用。 高浓度的使用有利于分化过程更好地进行并提高卵母细胞的成熟率。 然而，一些参考框架表明，20%的氧气可能会带来反应性氧化应激（ROS）的风险，导致促氧化剂与抗氧化剂的比例失衡，从而导致细胞损伤。 此外，在 5% O2 下培养的卵母细胞的实时呼吸分析与体内发育的卵母细胞相似，但在 20% O2 下诱导细胞活动和耗氧量。 比利时布鲁塞尔自由大学 (VUB) 的研究显示，CAPA-IVM 培养过程中大气 O2 浓度 (20%) 和低 O2 浓度 (5%) 对小鼠的影响，在 5% O2 下培养的 COC 的呼吸能力为与COC在体内的发育和成熟相对相似。

尽管如此，在 20% O2 下培养的 COC 显着增加了呼吸活动和耗氧量。 研究观察到，在 20% O2 下进行 IVM 前的 COC 培养会导致发育中断。 此外，如果小鼠 COC 在 IVM 步骤中用 5% O2 培养，结果也不理想。 根据这些分析，研究人员假设 5% O2 是 IVM 前步骤的最佳培养条件，而 20% O2 与 IVM 培养步骤更相关。 将这些发现与 VUB 结果和 CAPA-IVM 卵母细胞分化过程的特征相结合，本研究分为两个主要组，包括 5% IVM 前和 20% IVM 与 20% IVM 前和 IVM），并证明是否这个假设应该应用于人类的CAPA-IVM。 CAPA-IVM培养系统的增强提高了该技术的治疗效率，并为接受辅助生殖技术的患者提供了多种益处。

研究程序：

资格筛选和随机化

• 该试验将在越南胡志明市 My Duc 医院进行。
• 可能符合资格的女性将在出现 IVM 治疗指征时获得有关试验的信息。
• 当需要 IVM 治疗时，将在首次就诊当天进行资格筛查。
• 将向患者提供与研究相关的信息以及知情同意文件。 研究人员将在入组前获得所有女性签署的知情同意书。

卵母细胞将分为 2 组：

第 1 组（包括 2 个亚组：1A 和 1B）：空气氧浓度 CAPA-IVM 培养物 T = OR 后的卵母细胞总数，有两个亚组。

卵母细胞的数量划分如下：

如果 T 是偶数：

• 1A组卵母细胞数量：1个卵母细胞。
• 1B 组中的卵母细胞数量：T1B = (T-2)/2。

如果 T 是奇数：

• 1A组卵母细胞数量：1个卵母细胞。
• 1B 组中的卵母细胞数量：T1B = ([T-1]-2)/2。 第一个患者的一个卵母细胞剩余部分将被分配到 1B 组，下一个患者的剩余卵母细胞将被分配到 2B 组。 继续按顺序进行下一个剩余部分。

第 2 组（包括 2 个亚组：2A 和 2B）：低氧浓度 CAPA-IVM 培养物 T = OR 后的卵母细胞总数，有两个亚组。

卵母细胞的数量划分如下：

如果 T 是偶数：

• 2A组中的卵母细胞数量：1个卵母细胞。
• 2B 组中的卵母细胞数量：T2B = (T-2)/2。

如果 T 是奇数：

• 2A组中的卵母细胞数量：1个卵母细胞。
• 2B 组中的卵母细胞数量：T2B = ([T-1]-2)/2。 第一个患者的一个卵母细胞剩余部分将被分配到 1B 组，下一个患者的剩余卵母细胞将被分配到 2B 组。 继续按顺序进行下一个剩余部分。

第1A、2A组：获能后收集：卵母细胞和卵丘细胞。

组1B、2B：获能后收集：用过的培养基、空白孔。 成熟后收集：用过的培养基、卵丘细胞、空白孔。