낮은 산소 장력을 갖는 CAPA-IVM 배양

CAPA-IVM(Capacitation in-vitro maturation)은 최근 배아 소포(GV) 단계에서 난모세포를 배양하는 데 발전되었습니다. 이 접근법은 가벼운 자극을 받거나 통제된 난소 자극이 발생하지 않은 후 기존의 체외 수정(IVF) 및 세포질 내 정자 주입(ICSI)의 수정된 버전입니다. 특히, IVM은 다낭성 난소 증후군(PCOS) 진단을 받은 환자, 더 많은 수의 이차 난포(전체 환자의 거의 15% 구성), 난소 과다자극, 정맥 혈전색전증 또는 난소 질환의 위험이 있는 다양한 환자를 치료할 때 적응증을 얻을 수 있습니다. 비틀림. 또한 CAPA-IVM은 치료 시간 단축과 비용 절감, 여러 번의 추적 검사 없이 환자의 편의성을 높여준다. CAPA-IVM군의 첫 번째 배아 이식 후 정상 출산율은 35.2%로 IVF군 43.2%(위험차이 -8.1%, 95% 신뢰구간 -16.6%~0.5%)와 통계적으로 유의한 차이가 없었다. ). 그러나 각 주기의 고품질 배아 수와 CAPA-IVM의 누적 임상 임신율은 cIVF보다 여전히 낮았습니다.

또한 동시보고에 대한 질 높은 근거가 부족하므로 추가 조사를 고려해야 한다. 따라서 최적의 난자 수를 수확하고 배아 발생 가능성을 최대한 높이기 위해서는 CAPA-IVM의 난모세포 성숙 조건을 개선하는 것이 필수적입니다. 동물 모델과 인간 모델 모두에서 수행된 많은 연구에서 CAPA-IVM의 효과는 다양한 요인에 따라 달라진다는 것이 입증되었습니다. 이 중 산소(O2) 농도와 같은 환경 배양 조건은 건강한 성숙 난모세포를 생산하는 데 중요한 역할을 합니다. O2는 나팔관, 자궁 및 난포의 중요한 물리적, 화학적 구성 요소이며 대사 활동, 난모세포 성숙 및 초기 배아 발달과 밀접한 관련이 있습니다. 최근 연구에서는 O2 농도가 저산소증 유발 인자(HIF)를 통해 난모세포 성숙과 초기 배아 발달을 크게 조절할 수 있다고 제안했습니다. IVM 배양 환경의 O2 농도 지수에 대한 합의는 이루어지지 않았습니다. 난모세포 포매 배양 시스템은 전 세계적으로 두 가지 O2 농도, 5%와 20%로 일반적으로 사용되었습니다. 인체에서 적운-난모세포 복합체(COC)는 2~9% 범위의 낮은 O2 농도 조건에서 성숙됩니다.

반대로, COC는 IVM 조작 및 배양 중에 대기 O2 농도 20%에 노출됩니다. 5% 농도가 나팔관과 자궁의 가장 적절한 환경을 모방하지만 20% O2는 IVM 기술에 널리 적용됩니다. 고농도를 사용하면 분화 과정이 더 잘 진행되고 난모세포의 성숙 속도가 높아집니다. 그러나 일부 참고 프레임에서는 20% O2가 반응성 산화 스트레스(ROS)의 위험을 초래하여 산화 방지제에 대한 산화촉진제 비율의 불균형을 초래하여 세포 손상을 초래할 수 있다고 지적했습니다. 또한, 5% O2에서 배양된 난모세포의 실시간 호흡 분석은 생체 내에서 발달한 난모세포와 유사하지만 20% O2에서 세포 활동과 산소 소비를 유도합니다. VUB(Vrije Universiteit Brussel) - 벨기에의 연구에서 마우스의 CAPA-IVM 배양 중 대기 O2 농도(20%) 및 낮은 O2 농도(5%)의 영향은 5% O2에서 배양된 COC의 호흡 능력이 생체 내에서 발달하고 성숙하는 COC와 상대적으로 유사합니다.

그럼에도 불구하고, 20% O2에서 배양된 COC는 호흡 활동과 산소 소비를 현저하게 증가시켰습니다. 이 연구에서는 20% O2에서 IVM 전 COC 배양이 발달 장애를 일으키는 것으로 관찰되었습니다. 또한 마우스 COC를 5% O2로 IVM 단계에서 배양한 경우 결과가 좋지 않았습니다. 이러한 분석을 바탕으로 연구자들은 5% O2가 IVM 전 단계의 최적 배양 조건인 반면 20% O2는 IVM 배양 단계와 더 관련이 있다는 가설을 세웠습니다. 이러한 발견을 VUB의 결과 및 CAPA-IVM 난모세포의 분화 과정의 특성과 결합하여, 이 연구는 IVM 전 5% 및 IVM 전 20% 대 IVM 전 및 IVM 20%를 포함하는 두 가지 주요 그룹으로 나뉘며 다음과 같은 여부를 보여줍니다. 이 가설은 CAPA-IVM을 인간에게 적용해야 합니다. CAPA-IVM 배양 시스템의 향상은 이 기술의 치료 효율성을 향상시키고 보조 생식 기술을 받는 환자에게 다양한 이점을 제공합니다.

연구 절차:

적격성 및 무작위 배정에 대한 심사

• 이번 임상시험은 베트남 호치민시에 위치한 My Duc 병원에서 진행될 예정이다.
• 잠재적으로 자격이 있는 여성에게는 IVM 치료 적응증 시점에 임상시험에 대한 정보가 제공됩니다.
• 자격 여부에 대한 심사는 IVM 치료가 필요한 첫 방문 당일에 수행됩니다.
• 환자에게는 사전 동의서와 함께 연구와 관련된 정보가 제공됩니다. 조사관은 등록 전에 모든 여성으로부터 서명된 사전 동의서를 얻을 것입니다.

난모세포는 2개의 그룹으로 나뉩니다:

그룹 1(2개의 하위 그룹 포함: 1A 및 1B): 공기 산소 농도 CAPA-IVM 배양 T = OR 후 난모세포의 총 수이며 두 개의 하위 그룹이 있습니다.

난모세포의 수는 다음과 같이 나뉩니다.

T가 짝수인 경우:

• 그룹 1A의 난모세포 수: 난모세포 1개.
• 그룹 1B의 난모세포 수: T1B = (T-2)/2.

T가 홀수인 경우:

• 그룹 1A의 난모세포 수: 난모세포 1개.
• 그룹 1B의 난모세포 수: T1B = ([T-1]-2)/2. 첫 번째 환자의 남은 난모세포 1개는 그룹 1B에 배정되고, 다음 환자의 나머지 난모세포는 그룹 2B에 배정됩니다. 다음 남은 시간 동안 계속해서 순차적으로 수행합니다.

그룹 2(2개의 하위 그룹 포함: 2A 및 2B): 저산소 농도 CAPA-IVM 배양 T = OR 후 난모세포의 총 수이며 2개의 하위 그룹이 있습니다.

난모세포의 수는 다음과 같이 나뉩니다.

T가 짝수인 경우:

• 그룹 2A의 난모세포 수: 난모세포 1개.
• 그룹 2B의 난모세포 수: T2B = (T-2)/2.

T가 홀수인 경우:

• 그룹 2A의 난모세포 수: 난모세포 1개.
• 그룹 2B의 난모세포 수: T2B = ([T-1]-2)/2. 첫 번째 환자의 남은 난모세포 1개는 그룹 1B에 배정되고, 다음 환자의 나머지 난모세포는 그룹 2B에 배정됩니다. 다음 남은 시간 동안 계속해서 순차적으로 수행합니다.

그룹 1A, 2A: 수정화 후 수집: 난모세포 및 난구 세포.

그룹 1B, 2B: 용량화 후 수집: 사용한 미디어, 빈 웰. 성숙 후 수집: 사용한 배지, 큐뮬러스 셀, 공백 웰.