Culture CAPA-IVM avec une faible tension d'oxygène

La maturation in vitro par capacitation (CAPA-IVM) a récemment progressé dans la culture d'ovocytes à partir du stade vésicule germinale (GV). Cette approche est une version modifiée de la fécondation in vitro (FIV) conventionnelle et de l'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI), suite à une légère stimulation ou à l'absence de stimulation ovarienne contrôlée. Plus précisément, la MIV peut être indiquée chez les patientes diagnostiquées avec le syndrome des ovaires polykystiques (SOPK), un nombre plus élevé de follicules secondaires (constituant près de 15 % du total des patients), et traiter une gamme de patientes présentant des risques d'hyperstimulation ovarienne, de thromboembolie veineuse ou de maladies ovariennes. torsion. De plus, CAPA-IVM contribue à réduire la durée du traitement, est moins coûteux et améliore le confort du patient sans examens de suivi multiples. Le taux de naissances vivantes après le premier transfert d'embryons dans le groupe CAPA-IVM était de 35,2 %, ce qui n'était pas statistiquement différent de celui du groupe FIV à 43,2 % (différence de risque -8,1 % ; intervalle de confiance à 95 % de -16,6 % à 0,5 % ). Cependant, le nombre d'embryons de haute qualité dans chaque cycle et le taux de grossesse clinique cumulé dans CAPA-IVM étaient encore inférieurs à ceux de la FIVc.

De plus, des investigations plus approfondies devraient être envisagées en raison du manque de preuves de haute qualité provenant de rapports concomitants. Par conséquent, il est essentiel d’améliorer les conditions de maturation des ovocytes dans CAPA-IVM pour récolter le nombre optimal d’ovocytes et la plus grande possibilité de développement embryonnaire. De nombreuses études menées sur des modèles animaux et humains ont démontré que l’efficacité du CAPA-IVM dépend de divers facteurs. Parmi celles-ci, les conditions environnementales de culture telles que la concentration en oxygène (O2) jouent un rôle crucial dans la production d’ovocytes matures et sains. L'O2 est un composant physique et chimique vital de la trompe de Fallope, de l'utérus et du follicule ovarien. Il est étroitement lié à l'activité métabolique, à la maturation des ovocytes et au développement précoce de l'embryon. Des recherches récentes ont suggéré que la concentration d'O2 pourrait réguler de manière significative la maturation des ovocytes et le développement précoce de l'embryon grâce au facteur inductible par l'hypoxie (HIF). Un consensus sur l’indice de concentration d’O2 dans l’environnement de culture IVM n’a pas été atteint. Les systèmes de culture incorporant des ovocytes ont été couramment utilisés dans deux concentrations d’O2, 5 % et 20 % dans le monde. Dans le corps humain, les complexes cumulus-ovocytes (COC) mûrissent dans des conditions de faibles concentrations d'O2 allant de 2 % à 9 %.

À l’inverse, les COC sont exposés à une concentration atmosphérique d’O2 de 20 % lors de la manipulation et de la culture de l’IVM. Bien que la concentration de 5 % imite l’environnement le plus approprié dans la trompe de Fallope et l’utérus, la concentration de 20 % d’O2 est largement utilisée dans les techniques de MIV. L'utilisation de concentrations élevées facilite une meilleure progression des processus de différenciation et augmente le taux de maturation des ovocytes. Cependant, certains référentiels indiquent qu'un taux d'O2 de 20 % peut présenter un risque de stress oxydatif réactif (ROS), entraînant un déséquilibre du rapport pro-oxydants/antioxydants, entraînant des dommages cellulaires. De plus, l’analyse respiratoire en temps réel des ovocytes cultivés à 5 % d’O2 est similaire à celle des ovocytes développés in vivo mais induit une activité cellulaire et une consommation d’oxygène à 20 % d’O2. L'impact de la concentration atmosphérique d'O2 (20 %) et de la faible concentration d'O2 (5 %) lors de la culture CAPA-IVM chez la souris a montré dans l'étude de la Vrije Universiteit Brussel (VUB) - Belgique que la capacité respiratoire des COC cultivés à 5 % d'O2 était relativement similaires aux COC se développant et mûrissant in vivo.

Néanmoins, les COC cultivés à 20 % d’O2 ont remarquablement augmenté l’activité respiratoire et la consommation d’oxygène. L’étude a observé que la culture pré-IVM de COC à 20 % d’O2 provoquait des perturbations du développement. En outre, le résultat était défavorable si les COC de souris étaient cultivés à l’étape IVM avec 5 % d’O2. Sur la base de ces analyses, les chercheurs ont émis l’hypothèse qu’une concentration d’O2 de 5 % était la condition de culture optimale pour l’étape pré-IVM, tandis qu’une concentration d’O2 de 20 % était plus pertinente pour l’étape de culture IVM. En combinant ces résultats avec les résultats de la VUB et les caractéristiques du processus de différenciation dans les ovocytes CAPA-IVM, cette étude est divisée en deux groupes principaux, dont 5 % pré-IVM et 20 % IVM contre 20 % pré-IVM et IVM) et démontre si cette hypothèse devrait être appliquée CAPA-IVM chez l'homme. L'amélioration du système de culture CAPA-IVM conduit à une meilleure efficacité du traitement de cette technique et offre divers avantages aux patients bénéficiant d'une technologie de procréation médicalement assistée.

Déroulement de l'étude :

Dépistage d’éligibilité et randomisation

• Cet essai sera mené à l'hôpital My Duc, Hô Chi Minh-Ville, Viet Nam.
• Les femmes potentiellement éligibles recevront des informations sur l'essai au moment de l'indication du traitement IVM.
• Le dépistage de l'éligibilité sera effectué le jour de la première visite lorsque le traitement IVM est indiqué.
• Les patients recevront des informations relatives à l'étude ainsi que les documents de consentement éclairé. Des formulaires de consentement éclairé signés seront obtenus par les enquêteurs de toutes les femmes avant l'inscription.

Les ovocytes seront divisés en 2 groupes :

Groupe 1 (comprend 2 sous-groupes : 1A et 1B) : Concentration en oxygène de l'air Culture CAPA-IVM T = Nombre total d'ovocytes après OR et il y a deux sous-groupes.

Le nombre d’ovocytes est réparti ci-dessous :

Si T est un nombre pair :

• Nombre d'ovocytes dans le groupe 1A : un ovocyte.
• Nombre d'ovocytes dans le groupe 1B : T1B = (T-2)/2.

Si T est un nombre impair :

• Nombre d'ovocytes dans le groupe 1A : un ovocyte.
• Nombre d'ovocytes dans le groupe 1B : T1B = ([T-1]-2)/2. Un reste d'ovocytes du premier patient sera affecté au groupe 1B et le reste du patient suivant sera affecté au groupe 2B. Continuez à le faire séquentiellement pour le reste suivant.

Groupe 2 (comprend 2 sous-groupes : 2A et 2B) : Culture CAPA-IVM à faible concentration en oxygène T = Nombre total d'ovocytes après salle d'opération et il y a deux sous-groupes.

Le nombre d’ovocytes est réparti ci-dessous :

Si T est un nombre pair :

• Nombre d'ovocytes dans le groupe 2A : un ovocyte.
• Nombre d'ovocytes dans le groupe 2B : T2B = (T-2)/2.

Si T est un nombre impair :

• Nombre d'ovocytes dans le groupe 2A : un ovocyte.
• Nombre d'ovocytes dans le groupe 2B : T2B = ([T-1]-2)/2. Un reste d'ovocytes du premier patient sera affecté au groupe 1B et le reste du patient suivant sera affecté au groupe 2B. Continuez à le faire séquentiellement pour le reste suivant.

Groupe 1A, 2A : Collecte après capacitation : cellule ovocytaire et cumulus.

Groupe 1B, 2B : Collecte après capacitation : milieux usés, puits à blanc. Collecte après maturation : milieux usés, cellule cumulus, puits à blanc.