高峰期间住院患者重症登革热进展的临床和实验室因素 (PROSED)

主要目标：确定住院患者进展为重症登革热的因素。

次要目标：

1. 确定孟加拉国不同登革热谱系的流行登革热血清型（DENV-1、DENV-2、DENV-3、DNEV-4 等）。
2. 确定登革热感染后的初次和二次免疫反应（IgG 和 IgM）[通过检查 IgG 与 IgM 比率 (ELISA) 并分析 DENV NS1 IgG 亚类类型 (ELISA)] 以及免疫反应与不同谱登革热的关联在孟加拉国。
3. 表征与重症登革热病例相关的特定实验室生物标志物（血细胞比容水平、白细胞计数、血小板计数、凝血特征、血清白蛋白水平、肝酶、LDH）和免疫学参数（NS1、IgM 和 IgG）。
4. 对各医院死亡病例进行口头尸检和回顾性分析。
5. 探索医生治疗登革热的障碍和挑战，并通过形成性研究确定和开发最佳治疗方法。

全球视野：

蚊媒登革热是热带和亚热带地区的一个全球公共卫生问题。 据世界卫生组织称，登革热在 100 多个国家流行。 约占世界人口的 40%-3.6 十亿人生活在登革热流行地区。 登革热每年感染 4 亿人，导致 1 亿人患病，并导致 21,000 人死亡。 在对从中南部和东南亚、南美洲、墨西哥和加勒比地区返回的美国游客进行的急性发热性疾病研究中，由于国际旅行的增加和登革热流行目的地的受欢迎，登革热是主要原因。 因此，美国与登革热相关的住院人数正在上升。 早期发现和及时临床治疗等预防方法可以将病死率从 10% 降低至 <1%。

国家视角：

自 2000 年以来，登革热一直在孟加拉国流行。 目前的登革热高峰具有特殊的季节性，与往年相比，登革热高峰早在六月底就开始快速增长。 据世界卫生组织统计，今年的病死率为0.47%，高于往年。 然而，孟加拉国的临床谱、血清型优势、新型和改良血清型（DEVN-5）以及免疫反应需要更多研究。 然而，未来的登革热预防和治疗技术需要血清型特异性的临床和实验室指标以及不同谱系的免疫反应性。

我们正在医院进行这项研究，以确定我国严重登革热的负担及其与登革热的联系。 现在，登革热无需抗病毒药物即可得到支持性治疗。 严重且可能致命的登革热的原因尚不清楚。 既往登革热病毒暴露、合并症和遗传倾向可能会增加患严重登革热病的风险。 研究结果将有助于我们理解和解决问题。 我们的目的是评估与严重登革热相关的临床和实验室参数以及住院孟加拉国人从非严重登革热到严重登革热的转变。

研究设计：观察队列研究 研究地点：患者入组将在三个登革热专门医院进行，即达卡北部城市公司医院 (DNCCH)、穆格达医学院医院 (MuMCH) 和达卡医学院医院 (DMCH)。 icddr 达卡医院，b。

研究人群：我们将仅招募来自 DMCH 内科的成人（>18 岁）以及来自上述其他医院儿科和内科的儿童（1-18 岁）和成人（>18 岁）。

研究持续时间：2024年1月1日至2024年6月31日。 总入组时间为 6 个月或直到完成预计的患者入组。 第一份报告将在患者入组开始三个月后提交。

纳入标准：

1. 年龄在 1-18 岁之间或 >18 岁（无论性别）。
2. 发烧和任何两个标准（腹泻呕吐、皮疹、身体疼痛、止血带测试阳性、白细胞减少、任何警告信号）
3. 实验室证实或临床怀疑的登革热病例。
4. 知情书面同意或同意。
5. 最近2-6天内有发热史

排除标准：

1. 入组时需要挽救生命的复苏的患者。
2. 不同意。

学习活动：

准备和组织材料的程序 筛选：研究护士和卫生工作者将在入院期间识别符合条件的患者。 满足注册要求后，将要求看护者或出席者提供书面知情同意书。 同意后，患者将被纳入。 患者将提供完整的病史，研究护士将其记录在 CRF 中。 将记录社会人口统计、家庭、合并症和病史。

临床监测和记录：研究医生将每小时记录四次生命体征和警告信号在病例报告表中。 护士和研究中心的夜间医生将在夜班试验期间记录生命体征。 警告指标将在操作上进行定义。 项目研究医师将在入组期间进行止血带测试。 腋窝温度达到38°C或以上表明发烧。

实验室调查：DMCH、MuMCH 和 DNCC 血液样本将送往 icddr,b 实验室以确保参考值一致性。 DMCH、MuMCH 和 DNCC 的收治医生将在同一天通过 WhatsApp 群组收到结果，并收到患者档案的纸质副本。

将在入组、出院或病情恶化时以及康复期间的第 21 天（18-28 天）从研究参与者身上采集血液样本。 如果第 5 或 6 天出现发烧，将抽取 2.5 ml 血液检测 IgM 和 IgG。 包括腹泻患者也将提供粪便样本。 IEDCR 和 icddr,b 实验室将进行测试。 5 岁以下儿童可以采集 10 毫升血液，成人可以采集 15 毫升血液。 采集后 6 小时内，血清测试应冷藏于 -70°C。 医院政策要求使用无菌塑料管从达卡医院的腹泻患者采集样本。

对选定医院的经验丰富的医疗保健专业人员进行定性评估，将检查他们的现实生活中的治疗经历（包括症状管理、住院和康复）、治疗方案（包括传统药物、替代疗法和其他当地疗法）、治疗面临的挑战/障碍治疗、当前治疗方法的差距以及患者和医疗保健专业人士的偏好。 一名拥有人类学学位和定性研究经验的研究官员 (RO) 将选择参与者并在高级人类学家的监督下进行访谈。 RO将根据他们在指定医院和品种的登革热治疗经验来选择定性受访者。 来自四家医院的登革热治疗专业人员将进行八次关键知情人访谈 (KII)。 此外，我们还将与在选定医院积极治疗的八名医生和八名护士进行深度访谈（IDIs），以了解当前的治疗实践和最佳治疗方法，以便在其他地方复制以改善治疗，特别是针对弱势群体。 数据饱和后，将计算访谈数量。

如果护理人员同意，我们希望对每例死亡进行口头尸检。 我们将回顾性评估死亡病例、收集数据并安排 DNCC 医院护理人员进行口头尸检。

计算样本量：

本研究的样本量分两步计算，以达到 5% 的严重登革热进展。 该计算确保该研究具有统计能力来确定效应大小以及临床和实验室参数是否影响严重登革热的发展。

首先，计算出最小样本量为 321。 因此，如果包括 321 名患者，则 16 名患者（321 名患者的 5%）将患有严重登革热病例，305 名患者将是非严重病例。

数据分析 数据管理和统计分析将使用 STATA (16.0) 和 SPSS for Windows。 数据集将使用频率 (%)、平均值、标准差、中位数和四分位数范围进行总结。 为了说明数据分布并识别异常值，将使用统计图。 在适当的情况下，卡方检验或 FisheFisher'st 检验将比较分类变量，而 StudeStudent'sst 或 Mann-Whitney 检验将比较连续变量。

多变量逻辑回归将检查二元结果（例如，严重登革热与非严重登革热）和预测因素（例如，年龄、性别、入院疾病状况、实验室检查结果）之间的关系。 为了测量关联强度，将计算比值比 (OR) 和 95% 置信区间 (CI)。 当 p 值 < 0.05 时评估统计显着性。

对口头尸检数据进行主题分析将揭示与登革热相关的死亡趋势。 形成性研究数据将按主题进行编码，以了解治疗方法及其可行性。 研究开始后，正式的统计分析计划 (SAP) 将指导分析过程，提供开放性和严谨性。

icddr,b的研究审查委员会（RRC）和伦理审查委员会（ERC）的快速委员会将在研究开始前审查研究方案、数据收集工具和知情同意书。 该研究将遵循“赫尔辛基宣言”（2000 年）、ICH、三方指南和 GCP。 这些协议保护研究参与者的权利和完整性，正确执行所有研究程序，收集足够的数据，记录并验证数据。

除了常规治疗和监测之外，预计患者不会受益。 该研究在血液采集过程中仅对参与者构成适度的风险。 本次调查不会采集额外的样本。 孟加拉语将用于编写和构建未受过正规教育的学习科目的许可表。 如果患者和研究对象的陪同人员无法阅读同意书，他们将听到同意书。 参与者可以离开研究并拒绝回答任何问题。 如果拒绝研究，医院将照常对待患者。 患者数据将被保密、匿名和保密。 我们的研究人员将拥有特定病房的所有医疗信息、治疗描述和实验室测试结果的独家访问权。

合作计划

1. 我们将在三家医院招募患者： 1. 达卡医学院医院； 2. 穆格达医院和医学院； 3. 达卡北部公司医院。
2. 我们的研究将包括 IEDCR 血清学实验室标本。
3. 为了监测国家建议和治疗更新，我们将定期联系 CDC-DGHS。

为患者服务的医院：

这项研究是在 icddr,b 达卡医院进行的。 该机构自 1962 年以来一直治疗患有合并症的腹泻患者。 2019 年治疗了超过 15 万例腹泻病例 (17)。 icddr 的大多数患者都很贫困，居住在孟加拉国大都市达卡的城市和城郊。 icddr,b 开展基于实验室的临床、流行病学和卫生系统研究，以解决低收入和中等收入国家的公共卫生问题。 根据新的登革热指南，腹泻和呕吐是登革热和住院的关键危险因素。 我们医院的一些腹泻患者已经进行了登革热快速 NS1 检测。

认可测试的实验室：

孟加拉国国际腹泻病研究中心 (icddr,b) 聘请了多学科的国际和国家科学家。 它拥有足够的设施来治疗休克、严重败血症和腹泻引起的电解质异常。 icddr,b 的达卡医院设有重症监护室，为病情严重的儿童提供治疗。 提供24小时备用发电机、冰箱（-20°C）和冷冻柜（-80°C）。 所有与研究相关的研究都可以在生物化学实验室进行，该实验室 24/7 开放。