Ověření 24hodinového vyvolání příjmu kofeinu

Cílem této studie bylo vyhodnotit přesnost CIR-24 ve srovnání s biomarkery koncentrace kofeinu v moči a screenerem frekvence příjmu kofeinových nápojů (CBQ) u mladé dospělé populace.

Pro odhad spotřeby kofeinu za předchozích 24 hodin byl vyvinut 24hodinový zpětný odběr kofeinu (CIR-24). Online, samostatně podávaný CIR-24 byl vyvinut pro měření dietárního příjmu kofeinu z potravin, nápojů a doplňků. Tento nástroj byl založen na Automated Self-Administered 24-hour Dietary Assessment Tool (ASA24), což je webový, samoobslužný nástroj pro shromažďování dietních stažení a záznamů. ASA24 používá víceprůchodovou metodu upravenou z Automated Multiple-Pass Method (AMPM) používané v NHANES v USA a Kanadském komunitním průzkumu zdraví v Kanadě. V tomto vlastním online průzkumu byla použita stejná obecná struktura otázek, ale dotazované položky byly omezeny na potraviny, nápoje a doplňky stravy, které mohou obsahovat kofein. Nástroj byl vytvořen pro kanadský kontext uvedením pouze kanadských produktů, změnou velikostí kontejnerů tak, aby odpovídaly kanadskému trhu, a zahrnutím francouzské verze. Kategorie a podkategorie potravin, nápojů a doplňků naleznete v doplňkové tabulce 1. Konkrétní uvedené položky byly založeny na ASA24 a Canadian Nutrient File, přičemž další položky byly identifikovány prostřednictvím národních nutričních databází USDA a vyhledáváním na internetu. Respondenti byli dotazováni na spotřebu položek z každé ze čtyř hlavních kategorií (nápoje, potraviny, energetické produkty s přidaným kofeinem a doplňky stravy) v předchozím dni. Na základě každého nahlášeného jídla nebo nápoje obdrží účastník přizpůsobené sondy na základě svých odpovědí, aby identifikoval konkrétní položky, které mohly obsahovat kofein (např. pokud byla hlášena spotřeba sycených nápojů, je účastník požádán, aby specifikoval typ syceného nápoje a spotřebovaná značka). Množství každé zkonzumované položky bylo zjišťováno na základě konkrétní kategorie: množství potravin bylo odhadnuto podle počtu zkonzumovaných položek/kusů nebo podle objemového množství (v závislosti na položce); množství nápojů bylo odhadnuto pomocí obrázků typů a velikostí nádob (upravených podle ASA24) (nebo objemu pro prášky, kapaliny a koncentráty); a doplňky byly odhadnuty na jednotku (nebo objem pro prášky a tekutiny). Nástroj CIR-24 je k dispozici na http://davidhammond.ca/wp-content/uploads/2015/11/2014-CED-Technical-Report.pdf. Byla sestavena databáze obsahu kofeinu ve všech potravinách a nápojích. v kanadském nutričním souboru uvedeném jako obsahující kofein (s některými dalšími položkami z USDA National Nutrient Database for Standard Reference), plus energetické nápoje, injekce a produkty (získané z nutričních informací o produktech zakoupených v předchozích studiích a také z internetu vyhledávání) a doplňky uvedené jako obsahující kofein v databázi licencovaných přírodních zdravotních produktů Health Canada (http://www.hc-sc.gc.ca/dhp-mps/prodnatur/applications/licen-prod/lnhpd-bdpsnh-eng. php) nebo identifikované prostřednictvím online lékárny (www.well.ca). U oblíbených produktů, jako je káva, byly přidány přesnější a pro značku specifické hodnoty s využitím informací poskytnutých výrobci (např. Starbucks, Tim Horton's, McDonald's) a/nebo webovými stránkami, které agregují nutriční informace (http://www.cspinet.org/ nový/cafchart.htm).

Byla také podána papírová verze dotazníku o kofeinových nápojích (CBQ) z Fred Hutchison Cancer Centre, mírně upravená pro použití v Kanadě (např. kromě tekutých uncí byly zahrnuty i odměrky v ml). CBQ zahrnovalo 13 kategorií nápojů, včetně kofeinová a bezkofeinová káva (vařená a instantní) a čaj, energetické nápoje a limonády s vysokým obsahem kofeinu, běžné kolové a kořenové pivo a kolové a kořenové pivo bez kofeinu. Bylo zahrnuto devět kategorií frekvence: Nikdy nebo méně než jednou za měsíc; 1-3 za měsíc; 1 za týden; 2-4 týdně; 5-6 za týden; 1 za den; 2-3 za den; 4-5 za den; 6+ za den. Byl poskytnut odkaz na „střední“ velikost pro každý typ kategorie nápojů; respondenti uváděli, zda každá velikost nápoje byla malá, střední nebo velká ve srovnání s referenčním množstvím. Odpovědi na CBQ byly použity k výpočtu průměrné denní spotřeby kofeinu pro každého respondenta. Za prvé, počet ročních porcí spotřebovaných pro každou položku dotazníku byl vypočítán vynásobením hlášené frekvence uváděnou velikostí porce. „Malá“ velikost byla vynásobena poměrem porce 0,5 a „velká“ velikost byla vynásobena 1,5. Dále byl průměrný roční objem každého zkonzumovaného nápoje vydělen 365, aby se odhadl denní příjem každého nápoje. K výpočtu množství spotřebovaného kofeinu v miligramech byla použita databáze kofeinu, která nástroj doprovází. V případech, kdy chyběly údaje o frekvenci pro položky, jsme předpokládali, že žádná nebyla spotřebována, a když byla zadána frekvence, ale nebyla uvedena žádná velikost porce, předpokládala se „střední“ velikost.

U každého účastníka byly všechny vzorky moči spojeny a byl zaznamenán celkový objem celého 24hodinového vzorku. Vzorek od každého účastníka byl rozdělen do alikvotů do 2ml kryozkumavky a okamžitě zmražen na -80 °C. Vzorky byly přesunuty na 8 dní do mrazáku -20 °C kvůli logistickým problémům a později byly vráceny do -80 °C. Na konci období studie byly všechny vzorky převezeny v izolovaných nádobách se suchým ledem do pobočky CDC Nutritional Biomarkers v Atlantě, GA k analýze.

Koncentrace kofeinu (1,3,7-trimethylxanthin) a 8 metabolitů kofeinu (1,7-dimethylxanthin (Paraxanthin nebo 17X); 1,3-dimethylxanthin (theofylin, 13X); 1,3,7-trimethylurová kyselina (137U) v moči ); 1,3-dimethylurová kyselina (13 U); 1,7-dimethylurová kyselina (17 U); 1-methylurová kyselina (1 U); 1-methylxanthin (1X); a 5-acetylamino-6-amino-3-methyluracil ( AAMU)) byly kvantifikovány pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s přepínáním polarity elektrosprejovou ionizací a tandemovou kvadrupólovou hmotnostní spektrometrií se stabilními izotopy značenými vnitřními standardy na základě dříve popsané metody.(26) Stávající studie naznačují, že tyto metabolity mají mírnou korelaci s příjmem kofeinu (14). Limity detekce byly: 0,05 μmol/l pro 1U; 0,01 μmol/l pro theofylin; 0,02 μmol/l pro 13U a 17U; 0,005 μmol/L 137U; 0,03 μmol/l pro 1X; 0,003 mmol/l pro kofein; 0,006 μmol/l pro 17X; a 0,1 μmol/l pro AAMU. Vzorky, které měly množství pod limity detekce, byly pro tento konkrétní metabolit vyloučeny.