Srovnání intramuskulárního a intravenózního ACTH stimulačního testu u normálních dobrovolníků

Zkoušející provedou studii zaměřenou na zdravé subjekty, aby stanovili očekávaný rozsah maximálních hladin kortizolu stimulovaného kosyntropinem u normálních zdravých subjektů se dvěma různými způsoby podávání kosyntropinu. Cílem této studie je porovnat intravenózní (IV) a intramuskulární (IM) podání a pomocí nového testu vytvořit normální rozsah měření sérového kortizolu po kosyntropinu.

Dva cíle studie jsou: (1) Porovnat hodnoty kortizolu na začátku, 30 minut a 60 minut po IV a IM kosyntropinovém stimulačním testování u stejných subjektů. (2) Prostudujte hodnoty získané pomocí nového testu Roche Cortisol II a stanovte nové referenční rozmezí pro hladiny kortizolu stimulované kosyntropinem u zdravých subjektů pro oba způsoby podávání kosyntropinu.

Široce používaný starý test Elecsys® Cortisol Immunoassay od Roche Diagnostics (Cortisol I) je nyní celosvětově nahrazován novým testem Elecsys® Cortisol od Roche Diagnostics (Cortisol II). Nový test Cortisol II je také kompetitivní imunotest, ale využívá monoklonální na rozdíl od polyklonální záchytné protilátky, která byla použita ve starém testu Cortisol I. To má za následek větší specificitu pro kortizol s menší interferencí od jiných endogenních nebo exogenních glukokortikoidů. Ukázalo se, že nový test Cortisol II má silnou korelaci s hladinami kortizolu měřenými kapalinovou chromatografií-tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS), která je považována za zlatý standard pro měření kortizolu. V dřívějších studiích bylo prokázáno, že test Cortisol II generuje hodnoty kortizolu, které jsou přibližně o 20–30 % nižší než starší imunoanalýza Cortisol I s navrhovanou novou mezní hodnotou kortizolu pro diagnózu adrenální insuficience mezi 350–375 nmol/l (12,7–13,6 ug/dl).

Toto je prospektivní studie na zdravých subjektech. Vyšetřovatelé provedou u účastníků dva testy stimulace kosyntropinem při dvou samostatných návštěvách, jeden s použitím intravenózního a druhý s použitím intramuskulárního kosyntropinu (250 µg). Zkoušející ponechají mezi dvěma testy minimálně jeden týden a maximálně 2 měsíce.

Vzorky krve pro každý ze dvou testů budou odebrány na začátku, před podáním kosyntropinu, poté 30 minut a 60 minut po podání kosyntropinu ze zavedeného katetru. V každém časovém bodě bude odebráno maximálně 5 ml krve. Sérum bude separováno a vzorky budou po odběru skladovány při -80o C až do analýzy.

Všechny vzorky krve budou testovány k měření hladin kortizolu pomocí nového testu Roche Cortisol II. Soupravy pro stanovení kortizolu poskytne Roche Diagnostics.

Celková délka studia bude 18 měsíců. Budou dvě studijní návštěvy. Mezi dvěma návštěvami vyšetřovatelé ponechají minimálně jeden týden a maximálně 2 měsíce.

Studie bude zahrnovat 40 zdravých subjektů ve věku od 18 do 65 let. Vyšetřovatelé vyloučí subjekty se známou osou hypotalamus-hypofýza nadledvinky nebo jiným endokrinním onemocněním, užíváním glukokortikoidů (chronicky, aktuálně nebo do 3 měsíců), těhotenstvím nebo perorálním užíváním estrogenů. Ženy budou studovány během stejné fáze menstruačního cyklu pro každý ze 2 testů. Účastníci budou náborováni ústně a přídavky umístěny v areálu lékařské fakulty. Účastníci poskytnou písemný informovaný souhlas.

Statistika studie

1. Primární výsledná proměnná.

   1. Srovnání mezi maximálními hladinami kortizolu stimulovaného kosyntropinem naměřenými pomocí IV a IM podání kosyntropinu u stejných subjektů
   2. Stanovení nového referenčního rozmezí pro očekávané maximální hladiny kortizolu stimulovaného kosyntropinem pomocí nového testu Cortisol II pro oba způsoby podávání kosyntropinu.
2. Sekundární výsledné proměnné.
3. Statistický plán včetně zdůvodnění velikosti vzorku a průběžné analýzy dat.

Pro testování hypotézy, že hladiny kortizolu po IM podání kosyntropinu jsou mírně nižší než iv podání, výzkumník předpokládá, že 1) proporcionální analytická variabilita (konstantní CV) pro obě metody; 2) rozdíl > 50 % analytické variability je klinicky významný (tj. velikost účinku 0,5). Velikost vzorku 30 subjektů poskytne 85% sílu na hladině významnosti 5% pomocí jednostranného párového t-testu. Když jsou data dvou časových bodů analyzována společně, výkon bude vyšší.

Pro odhad korelace vytváří velikost vzorku 30 oboustranný 95% interval spolehlivosti se šířkou < 0,153, za předpokladu, že korelace vzorku je > 0,900.

S navrhovanými 40 zdravými subjekty bude vzdálenost referenčního rozmezí (definovaného jako 95 percentil referenční populace) od horní hranice odhadovaného 95% intervalu spolehlivosti < 22 %.