Confronto tra test di stimolazione con ACTH intramuscolare ed endovenoso in volontari normali

I ricercatori condurranno uno studio su soggetti sani per stabilire l'intervallo previsto di livelli massimi di cortisolo stimolati dalla cosintropina in soggetti sani normali con due diverse modalità di somministrazione della cosintropina. L'obiettivo di questo studio è confrontare la somministrazione endovenosa (IV) e intramuscolare (IM) e generare un intervallo normale di misura del cortisolo sierico post-cosintropina con il nuovo test.

I due obiettivi dello studio sono: (1) Confrontare i valori di cortisolo al basale, 30 minuti e 60 minuti dopo il test di stimolazione della cosintropina IV e IM negli stessi soggetti. (2) Studiare i valori ottenuti utilizzando il nuovo dosaggio Roche Cortisol II e stabilire un nuovo intervallo di riferimento per i livelli di cortisolo stimolati dalla cosintropina in soggetti sani per entrambe le modalità di somministrazione della cosintropina.

Il vecchio test immunologico Elecsys® Cortisol di Roche Diagnostics (Cortisol I), ampiamente utilizzato, viene ora sostituito in tutto il mondo da un nuovo test Elecsys® Cortisol di Roche Diagnostics (Cortisol II). Anche il nuovo test per il cortisolo II è un immunodosaggio competitivo, ma utilizza un anticorpo di cattura monoclonale anziché policlonale, utilizzato nel vecchio test per il cortisolo I. Ciò si traduce in una maggiore specificità per il cortisolo con minore interferenza da parte di altri glucocorticoidi endogeni o esogeni. È stato dimostrato che il nuovo dosaggio del cortisolo II ha una forte correlazione con i livelli di cortisolo misurati mediante cromatografia liquida-spettrometria di massa tandem (LC-MS/MS), che è considerata il gold standard per la misurazione del cortisolo. È stato dimostrato in studi precedenti che il dosaggio del cortisolo II genera valori di cortisolo inferiori di circa il 20-30% rispetto al vecchio dosaggio immunologico del cortisolo I con la proposta di un nuovo limite di cortisolo per la diagnosi di insufficienza surrenalica tra 350-375 nmol/L (12,7-13,6 µg/dL).

Questo è uno studio prospettico su soggetti sani. Gli investigatori eseguiranno due test di stimolazione della cosintropina sui partecipanti in due visite separate, una usando la cosintropina per via endovenosa e un'altra usando la cosintropina intramuscolare (250 µg). Gli investigatori concederanno un minimo di una settimana e un massimo di 2 mesi tra i due test.

I campioni di sangue per ciascuno dei due test verranno prelevati al basale, prima della somministrazione di cosintropina, quindi a 30 minuti e 60 minuti dopo la somministrazione di cosintropina dal catetere a permanenza. Verrà prelevato un massimo di 5 ml di sangue in ogni momento. Il siero sarà separato ei campioni saranno conservati a -80°C dopo la raccolta fino all'analisi.

Tutti i campioni di sangue saranno testati per misurare i livelli di cortisolo utilizzando il nuovo test Roche Cortisol II. I kit per il dosaggio del cortisolo saranno forniti da Roche Diagnostics.

La durata complessiva dello studio sarà di 18 mesi. Le visite di studio saranno due. Gli investigatori consentiranno un minimo di una settimana e un massimo di 2 mesi tra le due visite.

Lo studio includerà 40 soggetti sani di età compresa tra 18 e 65 anni. Gli investigatori escluderanno i soggetti con asse ipotalamo-ipofisario surrenale noto o altra malattia endocrina, uso di glucocorticoidi (cronico, in corso o entro 3 mesi), gravidanza o uso di estrogeni orali. Le donne saranno studiate durante la stessa fase del ciclo mestruale per ciascuno dei 2 test. I partecipanti saranno reclutati con il passaparola e aggiunti all'interno del campus della scuola di medicina. I partecipanti forniranno il consenso informato scritto.

Statistiche di studio

1. Variabile di risultato primaria.

   1. Confronto tra i livelli di picco di cortisolo stimolati dalla cosintropina misurati utilizzando la somministrazione di cosintropina IV e IM negli stessi soggetti
   2. Stabilire un nuovo intervallo di riferimento per i livelli di cortisolo stimolati dalla cosintropina di picco attesi utilizzando il nuovo dosaggio del cortisolo II per entrambe le modalità di somministrazione della cosintropina.
2. Variabili di risultato secondarie.
3. Piano statistico che include la giustificazione della dimensione del campione e l'analisi provvisoria dei dati.

Per verificare l'ipotesi che i livelli di cortisolo dopo la somministrazione IM di cosintropina siano leggermente inferiori alla somministrazione IV, lo sperimentatore presuppone che 1) variabilità analitica proporzionale (CV costante) per entrambi i metodi; 2) una differenza > 50% della variabilità analitica è clinicamente significativa (cioè, una dimensione dell'effetto di 0,5). Una dimensione del campione di 30 soggetti fornirà l'85% di potenza a un livello di significatività del 5% utilizzando il t-test accoppiato unilaterale. Quando i dati dei due punti temporali vengono analizzati insieme, la potenza sarà maggiore.

Per la stima della correlazione, la dimensione del campione di 30 produce un intervallo di confidenza al 95% bilaterale con un'ampiezza < 0,153, assumendo che la correlazione del campione sia >0,900.

Con i 40 soggetti sani proposti, la distanza dell'intervallo di riferimento (definito come 95 percentile della popolazione di riferimento) dal limite superiore dell'intervallo di confidenza stimato al 95% sarà < 22%.