Comparación de la prueba de estimulación con ACTH intramuscular e intravenosa en voluntarios normales

Los investigadores realizarán un estudio en sujetos sanos para establecer el rango esperado de niveles máximos de cortisol estimulados por cosintropina en sujetos sanos normales con dos modalidades diferentes de administración de cosintropina. El objetivo de este estudio es comparar la administración intravenosa (IV) e intramuscular (IM), y generar un rango normal de medición de cortisol sérico posterior a la cosintropina con el nuevo ensayo.

Los dos objetivos del estudio son: (1) Comparar los valores de cortisol al inicio del estudio, 30 minutos y 60 minutos después de la prueba de estimulación con cosintropina IV e IM en los mismos sujetos. (2) Estudiar los valores obtenidos con el nuevo ensayo Roche Cortisol II y establecer un nuevo rango de referencia para los niveles de cortisol estimulados por cosintropina en sujetos sanos para ambas modalidades de administración de cosintropina.

El antiguo inmunoensayo Elecsys® Cortisol de Roche Diagnostics (Cortisol I), ampliamente utilizado, ahora está siendo reemplazado en todo el mundo por un nuevo ensayo Elecsys® Cortisol de Roche Diagnostics (Cortisol II). El nuevo ensayo Cortisol II también es un inmunoensayo competitivo, pero emplea un anticuerpo de captura monoclonal en lugar de policlonal, que se usaba en el antiguo ensayo Cortisol I. Esto da como resultado una mayor especificidad para el cortisol con menos interferencia de otros glucocorticoides endógenos o exógenos. Se demostró que el nuevo ensayo Cortisol II tiene una fuerte correlación con los niveles de cortisol medidos por cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS), que se considera el estándar de oro para la medición de cortisol. Se ha demostrado en estudios anteriores que el ensayo Cortisol II genera valores de cortisol que son aproximadamente un 20-30 % más bajos que el antiguo inmunoensayo Cortisol I con un nuevo límite de cortisol propuesto para el diagnóstico de insuficiencia suprarrenal entre 350-375 nmol/L (12,7-13,6 µg/dL).

Este es un estudio prospectivo en sujetos sanos. Los investigadores realizarán dos pruebas de estimulación con cosintropina en los participantes en dos visitas separadas, una con cosintropina intravenosa y otra con cosintropina intramuscular (250 µg). Los investigadores permitirán un mínimo de una semana y un máximo de 2 meses entre las dos pruebas.

Las muestras de sangre para cada una de las dos pruebas se extraerán al inicio del estudio, antes de la administración de cosintropina, luego a los 30 minutos y 60 minutos después de la administración de cosintropina desde un catéter permanente. Se extraerá un máximo de 5 ml de sangre en cada punto de tiempo. El suero se separará y las muestras se almacenarán a -80o C después de la recolección hasta que se analicen.

Todas las muestras de sangre se analizarán para medir los niveles de cortisol utilizando el nuevo ensayo Roche Cortisol II. Los kits de análisis de cortisol serán proporcionados por Roche Diagnostics.

La duración total del estudio será de 18 meses. Habrá dos visitas de estudio. Los investigadores permitirán un mínimo de una semana y un máximo de 2 meses entre las dos visitas.

El estudio incluirá a 40 sujetos sanos de entre 18 y 65 años. Los investigadores excluirán sujetos con eje suprarrenal hipotálamo-pituitario conocido u otra enfermedad endocrina, uso de glucocorticoides (crónico, actual o dentro de los 3 meses), embarazo o uso de estrógenos orales. Las mujeres serán estudiadas durante la misma fase del ciclo menstrual para cada una de las 2 pruebas. Los participantes serán reclutados de boca en boca y los anuncios se colocarán dentro del campus de la escuela de medicina. Los participantes proporcionarán su consentimiento informado por escrito.

Estadísticas de estudio

1. Variable de resultado primaria.

   1. Comparación entre los niveles máximos de cortisol estimulados por cosintropina medidos mediante la administración de cosintropina IV e IM en los mismos sujetos
   2. Establecimiento de un nuevo rango de referencia para los niveles máximos esperados de cortisol estimulado por cosintropina utilizando el nuevo ensayo Cortisol II para ambas modalidades de administración de cosintropina.
2. Variables de resultado secundarias.
3. Plan estadístico que incluye la justificación del tamaño de la muestra y el análisis de datos intermedios.

Para probar la hipótesis de que los niveles de cortisol después de la administración IM de cosintropina son ligeramente más bajos que la administración IV, el investigador supone que 1) la variabilidad analítica proporcional (CV constante) para ambos métodos; 2) una diferencia > 50 % de la variabilidad analítica es clínicamente significativa (es decir, un tamaño del efecto de 0,5). Un tamaño de muestra de 30 sujetos proporcionará una potencia del 85 % a un nivel de significación del 5 % utilizando la prueba t pareada unilateral. Cuando los dos datos de puntos de tiempo se analizan juntos, la potencia será mayor.

Para la estimación de la correlación, el tamaño de la muestra de 30 produce un intervalo de confianza del 95 % bilateral con un ancho < 0,153, suponiendo que la correlación de la muestra es > 0,900.

Con los 40 sujetos sanos propuestos, la distancia del rango de referencia (definido como el percentil 95 de la población de referencia) desde el límite superior del intervalo de confianza estimado del 95 % será < 22 %.