Obstarávání tkáňových vzorků pro buněčné kultury a analýzy

Pozadí: Nyní je zřejmé, že prakticky každá lidská postnatální tkáň obsahuje nějaký typ populace kmenových/progenitorových buněk, která je zodpovědná za přeměnu a opravu tkáně. Naše předchozí studie identifikovaly podskupinu stromálních buněk lidské kostní dřeně (BMSC), které jsou multipotentní a schopné regenerovat kost, chrupavku, myelopodporující stroma a adipocyty, zatímco stromální buňky pocházející pouze z lidské sleziny (SpSC) a brzlíku (TSC) tvoří myelopodporující stroma. Nedávné studie naznačují, že lidské stromální buňky derivované z tukové tkáně (ASC) mohou být podobné BMSC, zatímco stromální buňky derivované z lidské dermis (DSC) nemají žádnou z těchto vlastností (a slouží jako negativní kontrola pro většinu experimentů in vitro a in vivo). . Jak podobné nebo nepodobné jsou tyto různé populace stromálních buněk, je třeba ještě určit. Molekulární profilování je potřebné k porovnání těchto různých populací a k objasnění faktorů, které řídí diferenciaci stromálních buněk na jeden nebo jiný typ buněk.

Cíle: Chirurgický odpad (kost s červenou dření, dermis, slezina, brzlík a tuková tkáň) od mužů a žen různého věku podstupujících klinicky indikované chirurgické zákroky bude použit k vytvoření kultur stromálních buněk ke studiu molekulárního profilu a diferenciační kapacity stromatu. buněčných populací z různých tkání a dále charakterizovat regulaci genové exprese a syntézy proteinů v těchto kmenových/progenitorových buňkách.

Způsobilost: Každý pacient, který podstupuje klinicky indikovaný chirurgický zákrok, který zahrnuje odstranění kosti s červenou dření, dermis, slezinu, brzlík a tukovou tkáň, a který nemá: 1) v anamnéze metabolické onemocnění kostí, 2) jakoukoli formu rakoviny nebo byli léčeni chemoterapií nebo ozařováním na rakovinu a 3) nedostali látky, o kterých je známo, že ovlivňují metabolismus kostí.

Provedení: Normální chirurgický odpad (kost s červenou dření, dermis, slezina, brzlík a tuková hmota) z výkonů, které jsou prováděny u mužů a žen v příměstské nemocnici, bude umístěn do živného média (poskytnutého NIDCR) a odeslán do NIDCR k zařízení kmenů buněčných kultur. Zaznamená se pouze věk, pohlaví a místo, ze kterého byla tkáň odebrána. Buněčné kultury z různých tkání budou použity ke stanovení jejich fenotypového charakteru a diferenciačních vlastností pomocí molekulárního profilování a pro studie k objasnění regulace genové exprese a syntézy proteinů. Podobně bude část vzorků získaných v Suburban Hospital použita k vytvoření histologických řezů normálních tkání, které budou použity ke screeningu nově vyvinutých protilátek a molekulárních sond. V některých případech bude RNA extrahována z tkání pro analýzu RT-PCR. Tyto vzorky (buňky, řezy, mRNA) budou také sloužit jako normální kontroly pro studie provedené na vzorcích získaných od pacientů s různými chorobami přijatými do NIH podle současných protokolů NIH (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).