Kudosnäytteiden hankinta soluviljelmiä ja -analyysejä varten

Tausta: Nyt on ilmeistä, että käytännöllisesti katsoen jokainen synnytyksen jälkeinen ihmisen kudos sisältää jonkin tyyppistä kanta-/esisolupopulaatiota, joka on vastuussa kudosten vaihdosta ja korjaamisesta. Aiemmat tutkimuksemme ovat tunnistaneet ihmisen luuytimen stroomasolujen (BMSC) alajoukon, joka on monitehoinen ja kykenevä regeneroimaan luuta, rustoa, myelotukisoluja ja rasvasoluja, kun taas stroomasolut ovat peräisin vain ihmisen pernasta (SpSC) ja kateenkorvasta (TSC) muodostavat myeloa tukevaa stroomaa. Viimeaikaiset tutkimukset viittaavat siihen, että ihmisen rasvakudoksesta peräisin olevat stroomasolut (ASC) voivat olla samanlaisia ​​kuin BMSC:t, kun taas ihmisen dermisistä (DSC) johdetuilla stroomasoluilla ei ole mitään näistä ominaisuuksista (ja toimivat negatiivisena kontrollina useimmissa kokeissa in vitro ja in vivo). . Sitä, kuinka samanlaisia ​​tai erilaisia ​​nämä erilaiset stroomasolupopulaatiot ovat, ei ole vielä määritetty. Molekyyliprofilointia tarvitaan näiden erilaisten populaatioiden vertaamiseksi ja sellaisten tekijöiden selvittämiseksi, jotka säätelevät stroomasolujen erilaistumista yhdeksi tai toiseksi solutyypiksi.

Tavoitteet: Eri-ikäisistä miehistä ja naaraista, joille tehdään kliinisesti indikoituja kirurgisia toimenpiteitä, saatua kirurgista jätettä (luu punaydinineen, dermis, perna, kateenkorva ja rasvakudokset) käytetään stroomasoluviljelmien muodostamiseen strooman molekyyliprofiilin ja erilaistumiskyvyn tutkimiseksi. solupopulaatioita eri kudoksista ja edelleen karakterisoida geenin ilmentymisen ja proteiinisynteesin säätelyä näissä kanta-/progenitorisoluissa.

Kelpoisuus: Jokainen potilas, jolle tehdään kliinisesti indikoitu leikkaus, joka sisältää luun poiston punaytimen, verinahan, pernan, kateenkorvan ja rasvakudoksen kanssa ja jolla ei ole: 1) aiempaa metabolista luusairautta, 2) minkäänlaista syöpää tai on hoidettu syövän kemoterapialla tai säteilytyksellä ja 3) eivät ole saaneet aineita, joiden tiedetään vaikuttavan luun aineenvaihduntaan.

Suunnittelu: Esikaupunkisairaalassa miehille ja naisille suoritetuista toimenpiteistä syntyneet normaalit kirurgiset jätteet (luun punaydin, dermis, perna, kateenkorva ja rasva) sijoitetaan ravintoalustaan ​​(NIDCR:n toimittama) ja lähetetään NIDCR:lle laitosta varten. soluviljelmäkannoista. Vain ikä, sukupuoli ja paikka, josta kudos on poistettu, kirjataan. Eri kudosten soluviljelmiä käytetään niiden fenotyyppisen luonteen ja erilaistumisominaisuuksien määrittämiseen molekyyliprofiloinnilla sekä tutkimuksissa geeniekspression ja proteiinisynteesin säätelyn selvittämiseksi. Samoin osa esikaupunkisairaalassa saaduista näytteistä käytetään normaalien kudosten histologisten leikkeiden tuottamiseen, joita käytetään uusien vasta-aineiden ja molekyylikoettimien seulomiseen. Joissakin tapauksissa RNA uutetaan kudoksista RT-PCR-analyysiä varten. Nämä näytteet (solut, leikkeet, mRNA) toimivat myös normaaleina verrokkeina tutkimuksissa, jotka suoritetaan näytteillä, jotka on otettu potilailta, joilla on erilaisia ​​sairauksia ja jotka on värvätty NIH:hen nykyisten NIH-käytäntöjen mukaisesti (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D-). 0184).