Szövetminták beszerzése sejttenyészetekhez és elemzésekhez

Háttér: Ma már nyilvánvaló, hogy gyakorlatilag minden emberi posztnatális szövet tartalmaz valamilyen őssejt/progenitor sejtpopulációt, amely felelős a szövetek forgalmáért és helyreállításáért. Korábbi vizsgálataink a humán csontvelő-sztrómasejtek (BMSC) egy olyan alcsoportját azonosították, amely multipotens, és képes regenerálni a csontot, a porcot, a mieloszupportív stromát és az adipocitákat, míg a stromasejtek csak az emberi lépből (SpSC) és a csecsemőmirigyből (TSC) származnak. mieloszupportív stromát képeznek. A legújabb tanulmányok azt sugallják, hogy az emberi zsírból származó stromasejtek (ASC-k) hasonlóak lehetnek a BMSC-ekhez, míg a humán dermiszből (DSC-k) származó stromasejtek nem rendelkeznek ezen tulajdonságok egyikével sem (és negatív kontrollként szolgálnak a legtöbb in vitro és in vivo kísérletben). . Azt még meg kell határozni, hogy ezek a különböző stroma sejtpopulációk mennyire hasonlóak vagy eltérőek. Molekuláris profilalkotásra van szükség ezeknek a különböző populációknak az összehasonlításához, és annak tisztázásához, hogy milyen tényezők szabályozzák a stromasejtek egyik vagy másik sejttípusba történő differenciálódását.

Célok: A klinikailag indokolt sebészeti beavatkozásokon átesett, különböző életkorú hímekből és nőstényekből származó sebészeti hulladékot (csont vörös velővel, irha, lép, csecsemőmirigy és zsírszövetek) stroma sejttenyészetek létrehozására használják fel a stroma molekuláris profiljának és differenciálódási képességének tanulmányozására. különböző szövetekből származó sejtpopulációkat, és tovább jellemezni a génexpresszió és a fehérjeszintézis szabályozását ezekben az ős-/progenitor sejtekben.

Jogosultság: Minden olyan beteg, akinél klinikailag indokolt műtéten esnek át, amely során csontot eltávolítanak vörös velővel, irhával, lépvel, csecsemőmirigytel és zsírszövettel, és akinek nincs: 1) a kórelőzményében metabolikus csontbetegség, 2) bármilyen rák vagy kemoterápiával vagy besugárzással kezelték a rák miatt, és 3) nem kaptak olyan szereket, amelyekről ismert volt, hogy befolyásolják a csontanyagcserét.

Tervezés: A külvárosi kórházban férfiakon és nőkön végzett eljárásokból származó normál sebészeti hulladékot (csont vörös velővel, irha, lép, csecsemőmirigy és zsírszövet) táptalajba helyezik (a NIDCR biztosítja), és az NIDCR-hez küldik a létesítménybe. sejtkultúra törzsek. Csak a kor, a nem és a hely, ahonnan a szövetet eltávolították, rögzítésre kerül. A különböző szövetekből származó sejttenyészeteket fenotípusos karakterük és differenciálódási tulajdonságaik molekuláris profilozással történő meghatározására, valamint a génexpresszió és a fehérjeszintézis szabályozásának tisztázására szolgáló vizsgálatokhoz használjuk fel. Hasonlóképpen, az elővárosi kórházban vett minták egy részét a normál szövetek szövettani metszeteinek előállítására fogják használni, amelyeket az újonnan kifejlesztett antitestek és molekuláris próbák szűrésére fognak használni. Egyes esetekben az RNS-t kivonják a szövetekből RT-PCR elemzéshez. Ezek a minták (sejtek, metszetek, mRNS) normál kontrollként is szolgálnak a jelenlegi NIH-protokollok (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D-) szerint az NIH-hoz toborzott, különböző betegségben szenvedő betegektől származó mintákon végzett vizsgálatokhoz. 0184).