Beschaffung von Gewebeproben für Zellkulturen und Analysen

Hintergrund: Es ist mittlerweile offensichtlich, dass praktisch jedes menschliche postnatale Gewebe irgendeine Art von Stamm-/Vorläuferzellpopulation enthält, die für den Gewebeumsatz und die Gewebereparatur verantwortlich ist. Unsere früheren Studien haben eine Untergruppe menschlicher Knochenmarksstromazellen (BMSCs) identifiziert, die multipotent ist und in der Lage ist, Knochen, Knorpel, myelounterstützendes Stroma und Adipozyten zu regenerieren, wohingegen Stromazellen nur aus menschlicher Milz (SpSCs) und Thymusdrüse (TSCs) stammen bilden ein myelounterstützendes Stroma. Jüngste Studien deuten darauf hin, dass aus menschlichem Fettgewebe stammende Stromazellen (ASCs) BMSCs ähneln könnten, wohingegen aus menschlicher Dermis stammende Stromazellen (DSCs) keine dieser Eigenschaften aufweisen (und als Negativkontrolle für die meisten Experimente in vitro und in vivo dienen). . Wie ähnlich oder unähnlich diese verschiedenen Stromazellpopulationen sind, muss noch bestimmt werden. Um diese verschiedenen Populationen zu vergleichen und um die Faktoren aufzuklären, die die Differenzierung von Stromazellen in den einen oder anderen Zelltyp steuern, ist eine molekulare Profilierung erforderlich.

Ziele: Chirurgische Abfälle (Knochen mit rotem Mark, Dermis, Milz, Thymus und Fettgewebe) von Männern und Frauen unterschiedlichen Alters, die sich klinisch indizierten chirurgischen Eingriffen unterziehen, werden zur Etablierung von Stromazellkulturen verwendet, um das molekulare Profil und die Differenzierungskapazität des Stromas zu untersuchen Zellpopulationen aus verschiedenen Geweben zu untersuchen und die Regulation der Genexpression und Proteinsynthese in diesen Stamm-/Vorläuferzellen weiter zu charakterisieren.

Teilnahmeberechtigung: Jeder Patient, der sich einer klinisch indizierten Operation unterzieht, die die Entfernung von Knochen mit rotem Knochenmark, Dermis, Milz, Thymusdrüse und Fettgewebe beinhaltet, und der nicht an: 1) einer metabolischen Knochenerkrankung in der Vorgeschichte, 2) irgendeiner Form von Krebs oder wegen Krebs mit Chemotherapie oder Bestrahlung behandelt wurden und 3) keine Wirkstoffe erhalten haben, von denen bekannt ist, dass sie den Knochenstoffwechsel beeinflussen.

Design: Normaler chirurgischer Abfall (Knochen mit rotem Mark, Dermis, Milz, Thymus und Fett) aus Eingriffen, die an Männern und Frauen im Suburban Hospital durchgeführt werden, wird in Nährmedium (bereitgestellt vom NIDCR) gegeben und zur Einrichtung an das NIDCR geschickt von Zellkulturstämmen. Es werden lediglich Alter, Geschlecht und Ort der Gewebeentnahme erfasst. Die Zellkulturen aus den verschiedenen Geweben werden zur Bestimmung ihres phänotypischen Charakters und ihrer Differenzierungseigenschaften durch molekulare Profilierung sowie für Studien zur Aufklärung der Regulation der Genexpression und Proteinsynthese verwendet. Ebenso wird ein Teil der im Suburban Hospital gewonnenen Proben zur Erstellung histologischer Schnitte des normalen Gewebes verwendet, die zum Screening neu entwickelter Antikörper und molekularer Sonden verwendet werden. In einigen Fällen wird RNA aus den Geweben für die RT-PCR-Analyse extrahiert. Diese Proben (Zellen, Schnitte, mRNA) dienen auch als normale Kontrollen für Studien, die an Proben von Patienten mit verschiedenen Krankheiten durchgeführt werden, die gemäß den aktuellen NIH-Protokollen (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D-) an das NIH rekrutiert wurden. 0184).