Aankoop van weefselmonsters voor celculturen en analyses

Achtergrond: Het is nu duidelijk dat vrijwel elk menselijk postnataal weefsel een soort stam-/voorlopercelpopulatie bevat die verantwoordelijk is voor weefselvernieuwing en -herstel. Onze eerdere studies hebben een subset van menselijke stromale cellen van het beenmerg (BMSC's) geïdentificeerd die multi-potent zijn en in staat zijn om bot, kraakbeen, myeloondersteunend stroma en adipocyten te regenereren, terwijl stromacellen alleen zijn afgeleid van menselijke milt (SpSC's) en thymus (TSC's). vormen myeloondersteunend stroma. Recente studies suggereren dat van menselijke vetweefsel afgeleide stromacellen (ASC's) vergelijkbaar kunnen zijn met BMSC's, terwijl stromacellen die zijn afgeleid van menselijke dermis (DSC's) geen van deze eigenschappen hebben (en dienen als een negatieve controle voor de meeste experimenten in vitro en in vivo) . Hoe vergelijkbaar of ongelijk deze verschillende stromale celpopulaties zijn, moet nog worden bepaald. Moleculaire profilering is nodig om deze verschillende populaties te vergelijken en om de factoren op te helderen die de differentiatie van stromale cellen in het ene of het andere celtype regelen.

Doelstellingen: Chirurgisch afval (bot met rood merg, dermis, milt, thymus en vetweefsel) van mannen en vrouwen van verschillende leeftijden die klinisch geïndiceerde chirurgische ingrepen ondergaan, zal worden gebruikt om stromale celculturen op te zetten om het moleculaire profiel en differentiatievermogen van de stromale cel te bestuderen. celpopulaties uit verschillende weefsels en om de regulatie van genexpressie en eiwitsynthese in deze stam-/progenitorcellen verder te karakteriseren.

Geschiktheid: elke patiënt die een klinisch geïndiceerde operatie ondergaat waarbij bot met rode merg, dermis, milt, thymus en vetweefsel wordt verwijderd, en die niet: 1) een voorgeschiedenis heeft van metabole botziekte, 2) enige vorm van kanker of zijn behandeld met chemotherapie of bestraling voor kanker, en 3) geen middelen hebben gekregen waarvan bekend is dat ze het botmetabolisme beïnvloeden.

Ontwerp: Normaal chirurgisch afval (bot met rood beenmerg, dermis, milt, thymus en vetweefsel) van procedures die worden uitgevoerd bij mannen en vrouwen in het Suburban Hospital wordt in een voedingsbodem geplaatst (geleverd door NIDCR) en naar het NIDCR gestuurd voor de inrichting van celcultuurstammen. Alleen de leeftijd, het geslacht en de plaats waar het weefsel is verwijderd, worden geregistreerd. De celculturen van de verschillende weefsels zullen worden gebruikt om hun fenotypische karakter en differentiatie-eigenschappen te bepalen door middel van moleculaire profilering, en voor studies om de regulatie van genexpressie en eiwitsynthese op te helderen. Evenzo zal een deel van de monsters die in het Suburban Hospital zijn verkregen, worden gebruikt om histologische secties van de normale weefsels te genereren die zullen worden gebruikt om nieuw ontwikkelde antilichamen en moleculaire sondes te screenen. In sommige gevallen wordt RNA uit de weefsels gehaald voor RT-PCR-analyse. Deze monsters (cellen, secties, mRNA) zullen ook dienen als normale controles voor onderzoeken die worden uitgevoerd op monsters die zijn verkregen van patiënten met verschillende ziekten die bij NIH zijn gerekruteerd onder de huidige NIH-protocollen (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).