Adquisición de muestras de tejido para cultivos y análisis celulares

Antecedentes: ahora es evidente que prácticamente todos los tejidos posnatales humanos contienen algún tipo de población de células madre/progenitoras que es responsable de la renovación y reparación del tejido. Nuestros estudios previos han identificado un subconjunto de células estromales de médula ósea humana (BMSC) que es multipotente y capaz de regenerar hueso, cartílago, estroma mielosuficiente y adipocitos, mientras que las células estromales derivadas del bazo humano (SpSC) y el timo (TSC) solo formar un estroma mielosutentivo. Estudios recientes sugieren que las células estromales derivadas de tejido adiposo humano (ASC) pueden ser similares a las BMSC, mientras que las células estromales derivadas de la dermis humana (DSC) no tienen ninguna de estas propiedades (y sirven como control negativo para la mayoría de los experimentos in vitro e in vivo) . Aún no se ha determinado cuán similares o diferentes son estas diferentes poblaciones de células estromales. Se necesita un perfil molecular para comparar estas diferentes poblaciones y para dilucidar los factores que controlan la diferenciación de las células del estroma en un tipo de célula u otro.

Objetivos: Los desechos quirúrgicos (hueso con médula roja, dermis, bazo, timo y tejido adiposo) de hombres y mujeres de diferentes edades sometidos a procedimientos quirúrgicos clínicamente indicados se utilizarán para establecer cultivos de células estromales para estudiar el perfil molecular y la capacidad de diferenciación de los tejidos estromales. poblaciones celulares de diferentes tejidos y caracterizar aún más la regulación de la expresión génica y la síntesis de proteínas en estas células madre/progenitoras.

Elegibilidad: cualquier paciente que se someta a una cirugía clínicamente indicada que implique la extracción de hueso con médula roja, dermis, bazo, timo y tejido adiposo, y que no tenga: 1) antecedentes de enfermedad ósea metabólica, 2) cualquier forma de cáncer o han sido tratados con quimioterapia o radiación para el cáncer, y 3) no han recibido agentes que se sabe que afectan el metabolismo óseo.

Diseño: Los desechos quirúrgicos normales (hueso con médula roja, dermis, bazo, timo y tejido adiposo) de los procedimientos que se realizan en hombres y mujeres en el Suburban Hospital se colocarán en medio nutritivo (proporcionado por NIDCR) y se enviarán al NIDCR para su establecimiento. de cepas de cultivo celular. Solo se registrará la edad, el sexo y el sitio de donde se extrajo el tejido. Los cultivos celulares de los diferentes tejidos se utilizarán para determinar su carácter fenotípico y sus propiedades de diferenciación mediante perfiles moleculares, y para estudios que eluciden la regulación de la expresión génica y la síntesis de proteínas. De manera similar, una parte de las muestras obtenidas en el Suburban Hospital se usará para generar secciones histológicas de los tejidos normales que se usarán para detectar anticuerpos y sondas moleculares recientemente desarrollados. En algunos casos, el ARN se extraerá de los tejidos para el análisis de RT-PCR. Estas muestras (células, secciones, ARNm) también servirán como controles normales para estudios realizados en muestras obtenidas de pacientes con diversas enfermedades reclutados para NIH según los protocolos actuales de NIH (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).