Upphandling av vävnadsprover för cellkulturer och analyser

Bakgrund: Det är nu uppenbart att praktiskt taget varje mänsklig postnatal vävnad innehåller någon typ av stam-/fadercellspopulation som är ansvarig för vävnadsomsättning och reparation. Våra tidigare studier har identifierat en undergrupp av humana benmärgsstromaceller (BMSCs) som är multipotenta och kan regenerera ben, brosk, myelostödjande stroma och adipocyter, medan stromaceller härrörande från mänsklig mjälte (SpSCs) och tymus (TSCs) endast bildar myelostödjande stroma. Nyligen genomförda studier tyder på att humana fetthärledda stromaceller (ASC) kan likna BMSCs, medan stromaceller härrörande från human dermis (DSC) inte har någon av dessa egenskaper (och fungerar som en negativ kontroll för de flesta experiment in vitro och in vivo) . Hur lika eller olika dessa olika stromacellpopulationer är har ännu inte bestämts. Molekylär profilering behövs för att jämföra dessa olika populationer och för att belysa de faktorer som styr differentiering av stromaceller till en eller annan celltyp.

Syfte: Kirurgiskt avfall (ben med röd märg, dermis, mjälte, tymus och fettvävnader) från män och kvinnor i varierande åldrar som genomgår kliniskt indikerade kirurgiska ingrepp kommer att användas för att etablera stromacellskulturer för att studera stromalens molekylära profil och differentieringskapacitet cellpopulationer från olika vävnader och för att ytterligare karakterisera regleringen av genuttryck och proteinsyntes i dessa stam-/faderceller.

Behörighet: Varje patient som genomgår kliniskt indikerad operation som innebär att ben med röd märg, dermis, mjälte, tymus och fettväv avlägsnas och som inte har: 1) en historia av metabolisk bensjukdom, 2) någon form av cancer eller har behandlats med kemoterapi eller bestrålning för cancer, och 3) inte har fått medel som är kända för att påverka benmetabolismen.

Design: Normalt operationsavfall (ben med röd märg, dermis, mjälte, tymus och fett) från ingrepp som utförs på män och kvinnor på Suburban Hospital kommer att placeras i näringsmedium (tillhandahålls av NIDCR) och skickas till NIDCR för etablering av cellodlingsstammar. Endast ålder, kön och plats från vilken vävnaden togs bort kommer att registreras. Cellkulturerna från de olika vävnaderna kommer att användas för att bestämma deras fenotypiska karaktär och differentieringsegenskaper genom molekylär profilering, och för studier för att belysa regleringen av genuttryck och proteinsyntes. På samma sätt kommer en del av proverna som erhålls vid Suburban Hospital att användas för att generera histologiska sektioner av de normala vävnaderna som kommer att användas för att screena nyutvecklade antikroppar och molekylära prober. I vissa fall kommer RNA att extraheras från vävnaderna för RT-PCR-analys. Dessa prover (celler, sektioner, mRNA) kommer också att fungera som normala kontroller för studier utförda på prover som erhållits från patienter med olika sjukdomar rekryterade till NIH enligt nuvarande NIH-protokoll (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).