Acquisition d'échantillons de tissus pour cultures cellulaires et analyses

Contexte : Il est maintenant évident que pratiquement tous les tissus postnatals humains contiennent un certain type de population de cellules souches/progénitrices qui est responsable du renouvellement et de la réparation des tissus. Nos études précédentes ont identifié un sous-ensemble de cellules stromales de la moelle osseuse humaine (BMSC) qui sont multipotentes et capables de régénérer l'os, le cartilage, le stroma myélosupportif et les adipocytes, alors que les cellules stromales dérivées de la rate humaine (SpSC) et du thymus (TSC) uniquement forment un stroma myélosupportif. Des études récentes suggèrent que les cellules stromales dérivées du tissu adipeux humain (ASC) peuvent être similaires aux BMSC, alors que les cellules stromales dérivées du derme humain (DSC) n'ont aucune de ces propriétés (et servent de contrôle négatif pour la plupart des expériences in vitro et in vivo) . La similarité ou la dissemblance de ces différentes populations de cellules stromales reste à déterminer. Un profilage moléculaire est nécessaire pour comparer ces différentes populations et afin d'élucider les facteurs qui contrôlent la différenciation des cellules stromales en un type cellulaire ou un autre.

Objectifs : Les déchets chirurgicaux (os avec moelle rouge, derme, rate, thymus et tissus adipeux) d'hommes et de femmes d'âges variés subissant des interventions chirurgicales cliniquement indiquées seront utilisés pour établir des cultures de cellules stromales afin d'étudier le profil moléculaire et la capacité de différenciation du stroma. populations cellulaires de différents tissus et de caractériser davantage la régulation de l'expression des gènes et la synthèse des protéines dans ces cellules souches/progénitrices.

Admissibilité : Tout patient qui subit une intervention chirurgicale cliniquement indiquée qui implique l'ablation d'os avec de la moelle rouge, du derme, de la rate, du thymus et du tissu adipeux, et qui n'a pas : 1) d'antécédents de maladie osseuse métabolique, 2) toute forme de cancer ou ont été traités par chimiothérapie ou irradiation pour un cancer, et 3) n'ont pas reçu d'agents connus pour affecter le métabolisme osseux.

Conception : Les déchets chirurgicaux normaux (os avec moelle rouge, derme, rate, thymus et adipeux) provenant d'interventions effectuées sur des hommes et des femmes à l'hôpital de banlieue seront placés dans un milieu nutritif (fourni par le NIDCR) et envoyés au NIDCR pour l'établissement de souches de culture cellulaire. Seuls l'âge, le sexe et le site d'où le tissu a été prélevé seront enregistrés. Les cultures cellulaires des différents tissus seront utilisées pour déterminer leur caractère phénotypique et leurs propriétés de différenciation par profilage moléculaire, et pour des études visant à élucider la régulation de l'expression des gènes et la synthèse des protéines. De même, une partie des échantillons obtenus au Suburban Hospital sera utilisée pour générer des coupes histologiques des tissus normaux qui seront utilisées pour cribler les anticorps et les sondes moléculaires nouvellement développés. Dans certains cas, l'ARN sera extrait des tissus pour analyse RT-PCR. Ces échantillons (cellules, coupes, ARNm) serviront également de témoins normaux pour les études réalisées sur des échantillons provenant de patients atteints de diverses maladies recrutés au NIH selon les protocoles actuels du NIH (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).