Analýza 86 dakryolitů ve Fakultní nemocnici Ostrava

ÚVOD Není neobvyklé najít kámen v slzném vaku při dakryocystorinostomii (DCR). Přestože pacienti s dakryolitiázou mají často v anamnéze dlouhodobou intermitentní epiforu, distenzi slzného vaku a/nebo částečnou obstrukci nasolacrimal duct (NLD), dakryolity jsou často detekovány pouze během DCR. Incidence dakryolitů v slzném vaku pacientů, kteří podstoupili DCR, se pohybuje v rozmezí 6,0–18,0 %; výskyt dakryolitů však nebyl v běžné populaci hodnocen. Bohužel většina publikovaných studií o dakryolitech zahrnovala poměrně malý počet vzorků.

Kanalikulární konkrementy byly dlouho spojovány s kanalikulitidou způsobenou aktinomykotickou infekcí. Navzdory nedávnému významnému pokroku však stále chybí pochopení patofyziologie dakryolitů slzného vaku. Bylo navrženo, že k mechanismu, který vede k tvorbě dakryolitu, přispívá několik predisponujících faktorů. Mezi tyto faktory patří věk (do 50 let), pohlaví (zvýšená frekvence u žen), kouření cigaret a předchozí výskyt chronické dakryocystitidy a primární získaná obstrukce nasolacrimal duct (PANDO). Nedávné analýzy ukázaly, že vývoj dakryolitu může souviset s epitelem slzného vaku a produkcí NLD širokého spektra mucinů a expresí dvou peptidových členů rodiny trojlístkových faktorů (TFF), TFF1 a TFF3. Protože se dakryolity vyskytují s nízkou frekvencí, jen málo studií se zaměřilo na jejich složení.

V této studii si autoři kladli za cíl prezentovat poznatky z morfologické, chemické a mineralogické analýzy 86 dakryolitů.

MATERIÁLY A METODY Na Klinice otorinolaryngologie Fakultní nemocnice Ostrava a na Klinice otorinolaryngologie Městské nemocnice ve Frýdku-Místku bylo v letech 1994 až duben 2012 provedeno celkem 967 primářů EDCR. Do studie byly zahrnuty pouze EDCR provedené pro postsakální stenózu/obstrukci (832 výkonů). Kritéria pro vyloučení byla léčba presakální obstrukce, revize EDCR a neúplné sledování.

Studie byla provedena v souladu s Helsinskou deklarací, správnou klinickou praxí a platnými regulačními požadavky. Před zahájením operace a analýzy dakryolitu byl od všech pacientů získán písemný souhlas.

Ze skupiny 832 EDCR bylo nalezeno 86 kamenů slzného vaku (dakryolitů), z toho 61/86 (70,9 %) u žen a 25/86 (29,1 %) u mužů. Klinické informace byly získány z lékařských záznamů pacienta, včetně postižené strany, etiologie obstrukce nasolacrimal duct (NLD), výsledku EDCR jeden rok po operaci, velikosti dakryolitu a dat z analýzy dakryolitu. Vyšetřovatelé také provedli infračervenou spektrometrii, analýzu aminokyselin a zobrazovací a morfologické analýzy pomocí skenovacího elektronického mikroskopu. Souvislost s kouřením cigaret nebyla zkoumána.

Infračervená spektroskopie Autoři zkoumali dakryolity infračervenou spektrometrií s Fourierovou transformací (FTIR; IMPACT 410, fy Nicolet) a tabletovací metodou s bromidem draselným (KBr). Vyhodnocení byla provedena pomocí softwaru OMNIC a získaná spektra byla porovnána s knihovnou spekter z ledvinových kamenů.

Analýza aminokyselin Proteiny ve vzorcích (≤ 20 mg) byly hydrolyzovány kyselinou chlorovodíkovou [1,2]. Poté byl přidán 1 ml destilované vody, roztok byl zfiltrován, poté odpařen při 90 °C pod dusíkem a zbytek byl rozpuštěn ve 2 ml 1% vodného NaOH. Alikvot (~0,5 mg výchozího vzorku) byl přenesen do jiné zkumavky, objem byl upraven na ± 100 ul pomocí 1% NaOH a byla provedena derivatizace s ethylchlorformiátem (4). Dále byla provedena plynová chromatografie v tandemu s hmotnostní spektrometrií s 7890A a MSD5975C (Agilent) vybavenou 30m, VF-17ms kapilární kolonou (0,25 mm × 0,15 μm; CP8981 od HPST, Praha). Vzorky byly zpracovány při teplotách od 60 do 300 °C rychlostí 6 °C/min; byla použita dělená injekce (10:1). Detekce hmotnostní spektrometrií s dopadem elektronů (EI) při 70 eV byla provedena při teplotách 230 ºC pro iontový zdroj, 250 ºC pro přenosovou linku a 150 ºC pro quad. Provedli jsme full-scan analýzy s proudem nosného plynu helia 1,2 ml/min.

Zobrazování a morfologická analýza Morfologické analýzy byly prováděny rastrovacím elektronovým mikroskopem (QUANTA FEG 450, FEI Company, WA, USA). Pro elementární analýzu organické matrice kamene a pro analýzu jemných anorganických částic v kameni byla použita elektronová mikrosonda s energeticky disperzním detektorem (EDS).

Statistická analýza Pro statistickou analýzu byly vypočteny binomické intervaly spolehlivosti (CI) pro míru úspěšnosti při 95% CI. K hodnocení rozdílů ve věku, pohlaví a chirurgické úspěšnosti mezi skupinami I a II byly použity dvouvýběrový t-test a X2 test; p<0,05 bylo považováno za statisticky významné.