Анализ 86 дакриолитов в Университетской больнице Остравы

ВВЕДЕНИЕ Нередки случаи обнаружения камня в слезном мешке во время дакриоцисториностомии (ДЦР). Хотя пациенты с дакриолитиазом часто имеют в анамнезе длительную перемежающуюся эпифору, вздутие слезного мешка и/или частичную обструкцию носослезного протока (НОП), дакриолиты часто обнаруживаются только во время ДЦР. Частота дакриолитов слезного мешка у больных, перенесших ДЦР, колеблется в пределах 6,0-18,0%; однако частота возникновения дакриолитов в общей популяции не оценивалась. К сожалению, большинство опубликованных работ по дакриолитам включало весьма небольшое количество образцов.

Канальцевые конкременты долгое время ассоциировались с каналикулитом, вызванным актиномикотической инфекцией. Однако, несмотря на недавний значительный прогресс, понимание патофизиологии дакриолитов слезного мешка до сих пор отсутствует. Было высказано предположение, что несколько предрасполагающих факторов вносят вклад в механизм, вызывающий образование дакриолитов. К этим факторам относятся возраст (до 50 лет), пол (чаще у женщин), курение сигарет, наличие в анамнезе хронического дакриоцистита и первичной приобретенной обструкции носослезного канала (ПАНДО). Недавние анализы показали, что развитие дакриолитов может быть связано с продукцией эпителием слезного мешка и NLD широкого спектра муцинов и экспрессией двух пептидов из семейства факторов трилистника (TFF), TFF1 и TFF3. Поскольку дакриолиты встречаются редко, мало исследований было посвящено их составу.

В этом исследовании авторы стремились представить результаты морфологического, химического и минералогического анализа 86 дакриолитов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ В период с 1994 г. по апрель 2012 г. в отделении оториноларингологии университетской больницы г. Острава и отделении оториноларингологии городской больницы Фридек-Мистек было выполнено 967 первичных EDCR. В исследование были включены только EDCR, выполненные по поводу постакального стеноза/обструкции (832 процедуры). Критериями исключения были пресаккальная обструкция, повторные EDCR и неполное наблюдение.

Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией о надлежащей клинической практике и применимыми нормативными требованиями. Письменное согласие было получено от всех пациентов до начала операции и анализа дакриолита.

Среди группы из 832 EDCR было обнаружено 86 камней слезного мешка (дакриолитов), в том числе 61/86 (70,9%) у женщин и 25/86 (29,1%) у мужчин. Клиническая информация была получена из медицинских карт пациентов, включая пораженную сторону, этиологию обструкции носослезного протока (НОС), исход ЭДКР через год после операции, размер дакриолита и данные анализа дакриолита. Исследователи также выполнили инфракрасную спектрометрию, анализ аминокислот, визуализацию и морфологический анализ с помощью сканирующего электронного микроскопа. Связь с курением сигарет не изучалась.

Инфракрасная спектроскопия. Авторы исследовали дакриолиты с помощью инфракрасной спектрометрии с преобразованием Фурье (FTIR; IMPACT 410, fy Nicolet) и методом таблетирования с бромидом калия (KBr). Оценки проводились с помощью программного обеспечения OMNIC, а полученные спектры сравнивались с библиотекой спектров камней в почках.

Аминокислотный анализ Белки в образцах (≤ 20 мг) гидролизовали соляной кислотой [1,2]. Затем добавляли 1 мл дистиллированной воды, раствор фильтровали, затем упаривали при 90 ºC в атмосфере азота и остаток растворяли в 2 мл 1%-ного водного раствора NaOH. Аликвоту (~0,5 мг исходного образца) переносили в другую пробирку, доводили объем до ± 100 мкл с помощью 1% NaOH и проводили дериватизацию с помощью этилхлорформиата (4). Затем проводили газовую хроматографию в тандеме с масс-спектрометрией на 7890A и MSD5975C (Agilent), оснащенную 30-метровой капиллярной колонкой VF-17ms (0,25 мм × 0,15 мкм; CP8981 от HPST, Praque). Образцы испытывали при температуре от 60 до 300 ºC со скоростью 6 ºC/мин; применялся раздельный впрыск (10:1). Масс-спектрометрическое детектирование электронным ударом (ЭУ) при 70 эВ проводили при температурах 230 ºC для источника ионов, 250 ºC для линии передачи и 150 ºC для квадроцикла. Мы выполнили анализ полного сканирования с потоком газа-носителя гелия 1,2 мл/мин.

Визуализация и морфологический анализ Морфологический анализ проводили с помощью сканирующего электронного микроскопа (QUANTA FEG 450, компания FEI, Вашингтон, США). Электронный микрозонд с энергодисперсионным детектором (ЭДС) использовали для элементного анализа органической матрицы камня и для анализа мелких неорганических частиц в камне.

Статистический анализ Для статистического анализа были рассчитаны биномиальные доверительные интервалы (ДИ) для показателей успешности при 95% ДИ. Двухвыборочный t-критерий и критерий X2 использовались для оценки различий по возрасту, полу и успешности хирургического вмешательства между группами I и II; р<0,05 считали статистически значимым.