Konstrukce tkáňových mikročipů (TMA) ve vzorcích rakoviny plic (LUNGTMA)

Výzkumná hypotéza Výzkumná hypotéza pro tuto studii je, že exprese/stav různých molekulárních biomarkerů (hlavně včetně EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 a MSI) může poskytnout další prognostické (ve smyslu výsledku onemocnění, tj. PFS a OS) a/nebo prediktivní (ve smyslu léčebné odpovědi) informace pro pacienty s rakovinou plic.

Výzkumná hypotéza se promítá do primárního cíle této studie, kterým je další zhodnocení prognostického a prediktivního významu aktuálně existujících molekulárních markerů (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 a MSI), jakož i budoucích biomarkerů, které mohou rozvíjet se. Sekundární cíle zahrnují hodnocení diferenciální exprese/stavu vyšetřovaných biomarkerů (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 a MSI) a standardních klinicko-patologických parametrů včetně: PFS, OS a léčebné odpovědi, stejně jako věku, pohlaví, kouření/ stav, výkonnostní stav (PS), hladiny laktátdehydrogenázy (LDH) a albuminu v séru, stádium onemocnění, velikost nádoru, histologie a stupeň, přítomnost nebo nepřítomnost mozkových metastáz, přítomnost nebo nepřítomnost metastáz v játrech a počet metastatických míst (vše při diagnóze ) a údaje o léčbě (typ přijaté léčby a odpověď na léčbu). Budou také zkoumány potenciální korelace/interakce mezi zkoumanými biomarkery.

Odůvodnění pro provedení této studie Odůvodnění pro výběr biomarkerů Primárním cílem této studie je dále objasnit rozdílnou expresi/stav a frekvenci mutací EGFR a KRAS, přeuspořádání ALK, proteinu PD-L1 a MSI, jakož i jejich souvislost s různými klinickopatologickými parametry, včetně léčebné odpovědi, přežití bez progrese (PFS) a celkového přežití (OS), u velké a heterogenní kohorty pacientů s karcinomem plic (včetně NSCLC i SCLC).

EGFR, KRAS a ALK patří mezi klinicky nejvýznamnější biomarkery léčebné odpovědi u NSCLC; EGFR a ALK představují hlavní terapeutické cíle u NSCLC. Je však známo relativně málo, pokud jde o jejich expresi a potenciální klinický význam u SCLC.

Protein PD-L1 představuje kandidátní biomarker prognózy i terapeutický cíl. Předchozí experimentální a klinické výzkumné údaje silně naznačovaly, že inhibitory imunitního kontrolního bodu, včetně látek anti-PD-1 a anti-PD-L1, mohou zvýšit zranitelnost nádorových buněk vůči imunitní destrukci a potenciálně zlepšit přežití pacientů s rakovinou plic. Fenotyp MSI může také ovlivnit prognózu pacientů s NSCLC a odpověď na léčbu, včetně blokády imunitního kontrolního bodu pomocí inhibitorů PD-1.

Odůvodnění použití TMA Imunohistochemie založená na TMA představuje inovativní diagnostický přístup s několika důležitými výhodami ve srovnání s konvenčními imunohistochemickými metodami. Jak je široce uznáváno, hlavní a hlavní výhodou této technologie je její působivý potenciál maximalizovat a zachovat tkáňové zdroje. Navíc poskytuje účinnou a nákladově efektivní alternativu ke konvenčnímu histopatologickému zpracování pro provádění analýz ve velkém měřítku se značnou úsporou času, práce, činidel a dalšího laboratorního spotřebního materiálu [31]. A co je nejdůležitější, a kromě samotného snížení nákladů, další výhodou techniky TMA je identické ošetření všech studovaných vzorků. Protože TMA obsahují více vzorků tkáně na jednom sklíčku, jsou všechny tyto vzorky současně vystaveny přesně stejným podmínkám prostředí a experimentům (tj. teplota, koncentrace činidel, inkubační doba, postup získávání antigenu). To je v ostrém kontrastu se značnou variabilitou mezi jednotlivými sklíčky spojenou s individuálním zpracováním celých tkáňových řezů, což je základem vynikající standardizace technologie TMA [30].

Stručně řečeno, konstrukce TMA umožní současnou analýzu velkého počtu biomarkerů, buď na úrovni proteinu, nebo na úrovni RNA.

Posouzení přínosů/rizik a etické hodnocení Potenciální rizika a přínosy Jelikož se jedná o neintervenční studii, neexistují pro účastníky žádná fyzická potenciální rizika kromě potenciálního porušení důvěrnosti; ze stejného důvodu neexistují žádné potenciální výhody pro účastníky.