Costruzione di microarray tissutali (TMA) in campioni di cancro ai polmoni (LUNGTMA)

Ipotesi di ricerca L'ipotesi di ricerca per questo studio è che l'espressione/lo stato di vari biomarcatori molecolari (inclusi principalmente EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 e MSI) possa conferire una prognosi aggiuntiva (in termini di esito della malattia, ad es. PFS e OS) e/o informazioni predittive (in termini di risposta al trattamento) per i pazienti affetti da cancro del polmone.

L'ipotesi di ricerca si riflette nell'obiettivo primario di questo studio, che è quello di valutare ulteriormente il significato prognostico e predittivo dei marcatori molecolari attualmente esistenti (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 e MSI), nonché dei futuri biomarcatori che potrebbero evolvere. Gli obiettivi secondari includono la valutazione dell'espressione/stato differenziale dei biomarcatori esaminati (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 e MSI) e parametri clinicopatologici standard tra cui: PFS, OS e risposta al trattamento, nonché età, sesso, storia del fumo/ stato, performance status (PS), livelli sierici di lattato deidrogenasi (LDH) e albumina, stadio della malattia, dimensione del tumore, istologia e grado, presenza o assenza di metastasi cerebrali, presenza o assenza di metastasi epatiche e numero di siti metastatici (tutti alla diagnosi ) e dati sul trattamento (tipo di trattamento/i ricevuto/i e risposta al trattamento. Verranno inoltre esplorate le potenziali correlazioni/interazioni tra i biomarcatori esaminati.

Razionale per la conduzione di questo studio Razionale per la selezione dei biomarcatori Lo scopo principale di questo studio è chiarire ulteriormente l'espressione/lo stato differenziale e la frequenza delle mutazioni di EGFR e KRAS, i riarrangiamenti di ALK, la proteina PD-L1 e MSI, nonché la loro associazione con vari fattori clinicopatologici parametri, tra cui la risposta al trattamento, la sopravvivenza libera da progressione (PFS) e la sopravvivenza globale (OS), in un'ampia ed eterogenea coorte di pazienti con carcinoma polmonare (inclusi sia NSCLC che SCLC).

EGFR, KRAS e ALK sono tra i biomarcatori clinicamente più importanti della risposta al trattamento nel NSCLC; EGFR e ALK rappresentano i principali bersagli terapeutici nel NSCLC. Tuttavia, si sa relativamente poco per quanto riguarda la loro espressione e il potenziale significato clinico nel SCLC.

La proteina PD-L1 rappresenta un candidato biomarcatore di prognosi e bersaglio terapeutico. Precedenti dati sperimentali e di ricerca clinica hanno fortemente suggerito che gli inibitori del check point immunitario, inclusi gli agenti anti-PD-1 e anti-PD-L1, possono aumentare la vulnerabilità delle cellule tumorali alla distruzione immunitaria e potenzialmente migliorare la sopravvivenza dei pazienti con carcinoma polmonare. Il fenotipo MSI può anche influenzare la prognosi dei pazienti con NSCLC e la risposta al trattamento, compreso il blocco del checkpoint immunitario con inibitori PD-1.

Razionale per l'uso di TMA L'immunoistochimica basata su TMA rappresenta un approccio diagnostico innovativo con diversi importanti vantaggi rispetto ai metodi immunoistochimici convenzionali. Come ampiamente riconosciuto, il vantaggio principale e più importante di questa tecnologia è il suo impressionante potenziale per massimizzare e preservare le risorse tissutali. Inoltre, fornisce un'alternativa efficiente ed economica all'elaborazione istopatologica convenzionale per l'esecuzione di analisi su larga scala con notevoli risparmi di tempo, manodopera, reagenti e altri materiali di consumo di laboratorio [31]. Ancora più importante, ea parte la sola riduzione dei costi, un altro vantaggio della tecnica TMA è il trattamento identico di tutti i campioni studiati. Poiché i TMA contengono più campioni di tessuto su un singolo vetrino, tutti questi campioni vengono sottoposti contemporaneamente alle stesse identiche condizioni ambientali e sperimentali (ad es. temperatura, concentrazione dei reagenti, tempo di incubazione, procedura di recupero dell'antigene). Ciò è in netto contrasto con la sostanziale variabilità da vetrino a vetrino associata alla lavorazione individuale di intere sezioni di tessuto, alla base della superiore standardizzazione della tecnologia TMA [30].

In breve, la costruzione di TMA consentirà l'analisi simultanea di un gran numero di biomarcatori, sia a livello proteico che a livello di RNA.

Beneficio/rischio e valutazione etica Potenziali rischi e benefici Poiché si tratta di uno studio non interventistico, non vi sono potenziali rischi fisici per i partecipanti, a parte la potenziale violazione della riservatezza; per lo stesso motivo non ci sono potenziali benefici per i partecipanti.