Budowa mikromacierzy tkankowych (TMA) w próbkach raka płuca (LUNGTMA)

Hipoteza badawcza Hipotezą badawczą tego badania jest to, że ekspresja/status różnych biomarkerów molekularnych (głównie w tym EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 i MSI) może nadawać dodatkowe właściwości prognostyczne (w zakresie wyniku choroby, tj. PFS i OS) i/lub predykcyjne (pod względem odpowiedzi na leczenie) informacje dla pacjentów z rakiem płuca.

Hipoteza badawcza znajduje odzwierciedlenie w głównym celu niniejszego badania, jakim jest dalsza ocena prognostycznego i predykcyjnego znaczenia obecnie istniejących markerów molekularnych (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 i MSI), a także przyszłych biomarkerów, które mogą ewoluować. Do celów drugorzędowych należy ocena zróżnicowanej ekspresji/statusu badanych biomarkerów (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 i MSI) oraz standardowych parametrów kliniczno-patologicznych obejmujących: PFS, OS i odpowiedź na leczenie, a także wiek, płeć, historię palenia/ stan ogólny, stan sprawności (PS), poziom dehydrogenazy mleczanowej (LDH) i albumin w surowicy, stopień zaawansowania choroby, wielkość guza, histologię i stopień złośliwości, obecność lub brak przerzutów do mózgu, obecność lub brak przerzutów do wątroby i liczbę miejsc przerzutów (wszystko w chwili rozpoznania ) oraz dane dotyczące leczenia (rodzaj otrzymanego leczenia i odpowiedź na leczenie. Zbadane zostaną również potencjalne korelacje/interakcje pomiędzy badanymi biomarkerami.

Uzasadnienie przeprowadzenia tego badania Uzasadnienie wyboru biomarkerów Głównym celem tego badania jest dalsze wyjaśnienie zróżnicowanej ekspresji/stanu i częstości mutacji EGFR i KRAS, rearanżacji ALK, białka PD-L1 i MSI, a także ich związku z różnymi kliniczno-patologicznymi parametry, w tym odpowiedź na leczenie, przeżycie wolne od progresji choroby (PFS) i przeżycie całkowite (OS) w dużej i heterogennej kohorcie pacjentów z rakiem płuca (w tym zarówno NSCLC, jak i SCLC).

EGFR, KRAS i ALK należą do najważniejszych klinicznie biomarkerów odpowiedzi na leczenie w NSCLC; EGFR i ALK stanowią główne cele terapeutyczne w NSCLC. Jednak stosunkowo niewiele wiadomo na temat ich ekspresji i potencjalnego znaczenia klinicznego w SCLC.

Białko PD-L1 jest potencjalnym biomarkerem rokowania, jak również celem terapeutycznym. Dane z wcześniejszych badań eksperymentalnych i klinicznych silnie sugerowały, że inhibitory immunologicznego punktu kontrolnego, w tym środki anty-PD-1 i anty-PD-L1, mogą zwiększać podatność komórek nowotworowych na zniszczenie immunologiczne i potencjalnie poprawiać przeżywalność pacjentów z rakiem płuc. Fenotyp MSI może również wpływać na rokowanie chorych na NSCLC i odpowiedź na leczenie, w tym blokadę immunologicznego punktu kontrolnego za pomocą inhibitorów PD-1.

Uzasadnienie zastosowania TMA Immunohistochemia oparta na TMA stanowi innowacyjne podejście diagnostyczne z kilkoma ważnymi zaletami w porównaniu z konwencjonalnymi metodami immunohistochemicznymi. Jak powszechnie wiadomo, główną i najważniejszą zaletą tej technologii jest jej imponujący potencjał maksymalizacji i ochrony zasobów tkankowych. Ponadto zapewnia wydajną i opłacalną alternatywę dla konwencjonalnego przetwarzania histopatologicznego do wykonywania analiz na dużą skalę, przy znacznych oszczędnościach czasu, pracy, odczynników i innych materiałów zużywalnych w laboratorium [31]. Co najważniejsze, poza samą redukcją kosztów, kolejną zaletą techniki TMA jest identyczne traktowanie wszystkich badanych próbek. Ponieważ TMA zawierają wiele próbek tkanek na jednym szkiełku, wszystkie te próbki są jednocześnie poddawane dokładnie takim samym warunkom środowiskowym i doświadczalnym (tj. temperatura, stężenie odczynników, czas inkubacji, procedura odzyskiwania antygenu). Stoi to w ostrym kontraście do znacznej zmienności między szkiełkami, związanej z indywidualnym przetwarzaniem całych skrawków tkanek, co leży u podstaw najwyższej standaryzacji technologii TMA [30].

Krótko mówiąc, konstrukcja TMA pozwoli na jednoczesną analizę dużej liczby biomarkerów, zarówno na poziomie białka, jak i RNA.

Ocena stosunku korzyści do ryzyka i etyki Potencjalne ryzyko i korzyści Ponieważ jest to badanie nieinterwencyjne, nie ma fizycznego potencjalnego ryzyka dla uczestników, poza potencjalnym naruszeniem poufności; z tego samego powodu nie ma potencjalnych korzyści dla uczestników.