Construção de Microarranjos de Tecidos (TMAs) em Amostras de Câncer de Pulmão (LUNGTMA)

Hipótese de pesquisa A hipótese de pesquisa para este estudo é que a expressão/status de vários biomarcadores moleculares (incluindo principalmente EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 e MSI) pode conferir prognóstico adicional (em termos de resultado da doença, ou seja, PFS e OS) e/ou informações preditivas (em termos de resposta ao tratamento) para pacientes com câncer de pulmão.

A hipótese de pesquisa se reflete no objetivo principal deste estudo, que é avaliar ainda mais o significado prognóstico e preditivo dos marcadores moleculares atualmente existentes (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 e MSI), bem como de biomarcadores futuros que podem evoluir. Os objetivos secundários incluem a avaliação da expressão/status diferencial dos biomarcadores examinados (EGFR, KRAS, ALK, PD-L1 e MSI) e parâmetros clínico-patológicos padrão, incluindo: PFS, OS e resposta ao tratamento, bem como idade, sexo, histórico de tabagismo/ status, performance status (PS), níveis séricos de lactato desidrogenase (LDH) e albumina, estágio da doença, tamanho do tumor, histologia e grau, presença ou ausência de metástases cerebrais, presença ou ausência de metástases hepáticas e número de locais metastáticos (todos no momento do diagnóstico ) e dados do tratamento (tipo de tratamento(s) recebido(s) e resposta ao tratamento. Potenciais correlações/interações entre os biomarcadores examinados também serão exploradas.

Justificativa para conduzir este estudo Justificativa para a seleção de biomarcadores O objetivo principal deste estudo é esclarecer ainda mais a expressão/status diferencial e frequência de mutações EGFR e KRAS, rearranjos ALK, proteína PD-L1 e MSI, bem como sua associação com vários parâmetros, incluindo resposta ao tratamento, sobrevida livre de progressão (PFS) e sobrevida global (OS), em uma coorte grande e heterogênea de pacientes com câncer de pulmão (incluindo NSCLC e SCLC).

EGFR, KRAS e ALK estão entre os biomarcadores clinicamente mais importantes da resposta ao tratamento em NSCLC; EGFR e ALK representam os principais alvos terapêuticos no NSCLC. No entanto, relativamente pouco se sabe sobre sua expressão e potencial significado clínico no SCLC.

A proteína PD-L1 representa um candidato a biomarcador de prognóstico, bem como alvo terapêutico. Dados anteriores de pesquisas experimentais e clínicas sugeriram fortemente que os inibidores do ponto de controle imunológico, incluindo agentes anti-PD-1 e anti-PD-L1, podem aumentar a vulnerabilidade das células tumorais à destruição imunológica e potencialmente melhorar a sobrevida de pacientes com câncer de pulmão. O fenótipo MSI também pode afetar o prognóstico de pacientes com NSCLC e a resposta ao tratamento, incluindo o bloqueio do checkpoint imunológico com inibidores de PD-1.

Justificativa para o uso de TMAs A imuno-histoquímica baseada em TMA representa uma abordagem diagnóstica inovadora com várias vantagens importantes em comparação aos métodos imuno-histoquímicos convencionais. Como amplamente reconhecido, a principal e mais importante vantagem dessa tecnologia é seu impressionante potencial para maximizar e preservar os recursos teciduais. Além disso, fornece uma alternativa eficiente e econômica ao processamento histopatológico convencional para a realização de análises em larga escala com considerável economia de tempo, mão de obra, reagentes e outros consumíveis de laboratório [31]. Mais importante, e além da redução de custos, outra vantagem da técnica TMA é o tratamento idêntico de todas as amostras estudadas. Como os TMAs contêm várias amostras de tecido em uma única lâmina, todas essas amostras são submetidas simultaneamente às mesmas condições ambientais e experimentais (ou seja, temperatura, concentração de reagentes, tempo de incubação, procedimento de recuperação de antígeno). Isso contrasta fortemente com a variabilidade substancial de lâmina a lâmina associada ao processamento individual de seções de tecido inteiro, subjacente à padronização superior da tecnologia TMA [30].

Resumidamente, a construção de TMAs permitirá a análise simultânea de um grande número de biomarcadores, seja na proteína ou no nível do RNA.

Benefício/risco e avaliação ética Riscos e benefícios potenciais Como este é um estudo não intervencional, não há riscos físicos potenciais para os participantes, exceto a possível quebra de confidencialidade; pelo mesmo motivo, não há benefícios potenciais para os participantes.