Vliv zubní pasty obsahující triclosan během progrese experimentální periimplantační mukositidy

Design studie Toto šetření bylo navrženo jako dvojitě zaslepená, randomizovaná, zkřížená studie k vyhodnocení vlivu zubní pasty obsahující triclosan na profil osteo-imunozánětlivých mediátorů v PICF a na klinické parametry během progrese experimentální periimplantátové mukositidy . Tato studie byla schválena etickou komisí Paulista University (protokol 97.117).

Populační screening Nábor pacientů začal v červnu 2013 a byl dokončen do konce května 2014. Klinické postupy a hodnocení byly provedeny v období od srpna 2013 do června 2014. Vstup dat a statistické analýzy byly provedeny v lednu 2015. Všichni pacienti ve studii pocházeli z pacientů doporučených na Paulista University.

Všichni způsobilí jedinci byli důkladně informováni o povaze, potenciálních rizicích a přínosech jejich účasti ve studii a každý podepsal dokument informovaného souhlasu.

Experimentální skupiny Během experimentálního 3týdenního období nerušeného hromadění plaku v implantátech byli pacienti náhodně rozděleni do dvou skupin podle chemické kontroly plaku (třikrát denně): Triclosan (n=11): triclosan/kopolymer/fluoridová zubní pasta nebo Placebo (n=11): fluoridová zubní pasta. Nerušené akumulace plaku bylo dosaženo pouze v blízkosti dentálních implantátů použitím individuální silikonové vaničky zahrnující implantát a přilehlé zuby pokrývající 2-3 mm periimplantátové sliznice. Stejná silikonová miska byla v tomto období naplněna příslušnou zubní pastou podle experimentální skupiny. Po 3 týdnech byla provedena odborná profylaxe a byla stanovena vymývací lhůta 30 dnů. Poté bylo stanoveno druhé experimentální 3týdenní období nerušené akumulace plaku v implantátech a experimentální skupiny byly vyměněny. Poté byla provedena nová odborná profylaxe. Všechna hodnocení (klinické a imunoenzimatické testy) byla provedena na začátku, 3, 7, 14 a 21 dnů každého období indukce experimentální mukositidy.

Počet pacientů zahrnutých do této studie byl založen na předchozích křížových výzkumech, které zjistily rozdíly v klinických parametrech a hladinách osteoimunozánětlivých markerů v crevikulární tekutině v různém klinickém stavu.

Klinické vyšetření Stejný vyšetřující, který byl vůči skupinám zaslepen, provedl všechna měření klinického hodnocení. K provedení kalibrace uvnitř vyšetřujícího bylo vybráno 15 nestudovaných jedinců s dentálními implantáty. Vyšetřující změřil PD u všech pacientů dvakrát během 24 hodin. Zkoušející byl posouzen jako reprodukovatelný po splnění předem stanovených kritérií úspěšnosti (procento shody v rozmezí ± 1 mm mezi opakovanými měřeními muselo být alespoň 90 %). Vnitrotřídní korelace byla vypočtena jako 92% reprodukovatelnost.

Byl připraven individuální stent pro standardizaci umístění periodontální sondy (Severní Karolína - Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) k vyhodnocení následujících parametrů na čtyřech místech experimentálních zubních implantátů na začátku, 3, 7, 14, 21 dnů sledování: 1) index plaku (PI/%): skórováno pomocí dichotomického indexu plaku podél slizničního okraje kolem implantátů, 2) index krvácení (BI/%): skórováno pomocí dichotomického indexu slizničního okrajového krvácení kolem implantátů, 3) Poloha periimplantačního okraje (PPM/mm), což byla vzdálenost od stentu k periimplantačnímu okraji; 4) relativní klinická úroveň připojení (RCAL/mm), což byla vzdálenost od stentu ke dnu periimplantační kapsy; a 5) Hloubka sondování periimplantátu (PD/mm), vypočtená odečtením PPM od RCAL. Skóre plaku v plných ústech (FMPS) a skóre krvácení (FMBS) byly vypočteny před začátkem každého období indukce experimentální mukositidy.

Hodnocení osteoimunozánětlivého profilu Stejným vyšetřovatelem byla odebrána štěrbinová tekutina periimplantátu z míst zubních implantátů. Oblast byla izolována, vysušena a tekutina byla shromážděna na dvou místech experimentálních zubních implantátů (vestibulární a lingvální) umístěním proužků filtračního papíru (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA) do sulcus, dokud lékař nezaznamenal mírný odpor, a poté ponechání na místě po dobu 15 sekund. Objem tekutiny byl měřen pomocí kalibrovaného zařízení (Periotron 8000, Oraflow, Plainview, NY, USA). Proužky byly umístěny do sterilních zkumavek obsahujících 400 ul fosfátem pufrovaného fyziologického roztoku (PBS) s 0,05 % Tween-20. Vzorky crevikulární tekutiny z periimplantátu byly okamžitě skladovány při -20 °C.

Hladiny interferonu (INF), interleukinu (IL)-4, IL-17, IL-1β, IL-10, IL-6, IL-23, tumor nekrotizujícího faktoru (TNF)-α (Human Th17 HTH17MAG-14K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA), osteoprotegerin (OPG), osteokalcin (OC), osteopontin (OPN) (Human Bone HBNMAG-51K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA), matrix metaloproteináza (MMP)-2, MMP- 9 (Human MMP Panel 2 HMMP2MAG-55K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA), transformující růstový faktor (TGF)-β (Multi-species TGFβ TGFBMAG-64K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) a zesítěný telopeptid of kolagen typu I (ICTP) (Uscn Life Science Inc. Wuhan, Hubei, PRC) v periimplantační tekutině byly stanoveny pomocí komerčně dostupných souprav. Testy byly prováděny podle doporučení výrobce za použití přístroje MAGpix™ (MiraiBio, Alameda, CA, USA). Vzorky byly individuálně analyzovány a koncentrace byly odhadnuty ze standardní křivky pomocí pětiparametrové polynomiální rovnice s použitím softwaru Xponent® (Millipore, Corporation, Billerica, MA, USA). Průměrná koncentrace každého mediátoru byla vypočtena za použití jedince jako statistické jednotky a vyjádřena jako pg/ml.

Analýza dat Všechny analýzy byly provedeny pomocí programu SAS verze 9.1 (Cary, NC, USA). Data byla nejprve zkoumána na normalitu pomocí Kolmogorova-Smirnovova testu a data, která dosáhla normality, byla analyzována pomocí parametrických metod. Procenta experimentálních míst s viditelnou akumulací plaku, BI a průměry PD byly vypočteny pro každý implantát vybraný pro odběr periimplantátové tekutiny. Následně byly klinické parametry a lokální hladiny osteo-imunozánětlivých mediátorů zprůměrovány do skupin s placebem a triklosanem. Rozdíly v FMPS a FMBS – měřené před začátkem každého období indukce experimentální mukositidy.- mezi oběma skupinami byly porovnány pomocí Wilcoxonova testu. Pro ostatní klinické parametry (PI, BI, PPM, RCAL a PD) byl k detekci rozdílů mezi skupinami a obdobími použit ANOVA/Tukey test. Koncentrace osteo-imunozánětlivých markerů mezi skupinami a mezi sledováními byly porovnány pomocí Wilcoxonova a Friedmanova testu, v daném pořadí. Experimentální hladina významnosti byla stanovena na 5 % pro všechny statistické analýzy.