Impatto di un dentifricio contenente triclosan durante la progressione della mucosite perimplantare sperimentale

Disegno dello studio Questa indagine è stata progettata come studio incrociato, randomizzato, in doppio cieco per valutare l'influenza di un dentifricio contenente triclosan nel profilo dei mediatori osteo-immunoinfiammatori nel PICF e nei parametri clinici durante la progressione della mucosite perimplantare sperimentale . Questo studio è stato approvato dal comitato etico dell'Università Paulista (protocollo 97.117).

Screening della popolazione Il reclutamento dei pazienti è iniziato a giugno 2013 ed è stato completato entro la fine di maggio 2014. Le procedure cliniche e le valutazioni sono state effettuate tra agosto 2013 e giugno 2014. Il data entry e le analisi statistiche sono state effettuate nel gennaio 2015. Tutti i pazienti nello studio sono stati reclutati dai pazienti riferiti all'Università Paulista.

Tutti gli individui idonei sono stati accuratamente informati della natura, dei potenziali rischi e dei benefici della loro partecipazione allo studio e hanno firmato un documento di consenso informato.

Gruppi sperimentali Durante un periodo sperimentale di 3 settimane di accumulo di placca indisturbato negli impianti, i pazienti sono stati assegnati in modo casuale a due gruppi, in base al controllo chimico della placca (tre volte al giorno): Triclosan (n=11): triclosan/copolimero/dentifricio al fluoro o Placebo (n=11): dentifricio al fluoro. L'accumulo indisturbato di placca è stato ottenuto solo in prossimità degli impianti dentali utilizzando un vassoio in silicone individuale che coinvolgeva l'impianto ei denti adiacenti coprendo 2-3 mm di mucosa perimplantare. Lo stesso vassoio di silicone è stato riempito dal rispettivo dentifricio, secondo il gruppo sperimentale, durante questo periodo. Dopo 3 settimane è stata eseguita una profilassi professionale ed è stato stabilito un periodo di wash-out di 30 giorni. Quindi, è stato stabilito un secondo periodo sperimentale di 3 settimane di accumulo di placca indisturbato negli impianti e i gruppi sperimentali sono stati scambiati. Successivamente è stata eseguita una nuova profilassi professionale. Tutte le valutazioni (saggi clinici e immunoenzimatici) sono state eseguite al basale, 3, 7, 14 e 21 giorni di ciascun periodo di induzione sperimentale della mucosite.

Il numero di pazienti inclusi nel presente studio si è basato su precedenti indagini incrociate che hanno rilevato differenze nei parametri clinici e nei livelli di liquido crevicolare dei marcatori osteo-immunoinfiammatori in diversi stati clinici.

Esame clinico Lo stesso esaminatore, che era cieco rispetto ai gruppi, ha eseguito tutte le misurazioni della valutazione clinica. Per eseguire la calibrazione intra-esaminatore, sono stati selezionati 15 soggetti non partecipanti allo studio che presentavano impianti dentali. L'esaminatore ha misurato la PD di tutti i pazienti due volte entro 24 ore. L'esaminatore è stato giudicato riproducibile dopo aver soddisfatto i criteri di successo predeterminati (la percentuale di concordanza entro ± 1 mm tra misurazioni ripetute doveva essere almeno del 90%). La correlazione intra-classe è stata calcolata come riproducibilità del 92%.

È stato preparato uno stent individuale per standardizzare la posizione della sonda parodontale (North Carolina - Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) per valutare i seguenti parametri in quattro siti degli impianti dentali sperimentali al basale, 3, 7, 14, 21 giorni follow-up: 1) indice di placca (PI/%): valutato utilizzando un indice dicotomico di placca lungo il margine della mucosa attorno agli impianti, 2) indice di sanguinamento (BI/%): valutato utilizzando l'indice dicotomico del sanguinamento marginale della mucosa intorno agli impianti, 3) Posizione del margine perimplantare (PPM/mm), ovvero la distanza dallo stent al margine perimplantare; 4) Livello di attacco clinico relativo (RCAL/mm), ovvero la distanza dallo stent al fondo della tasca perimplantare; e 5) Profondità di sondaggio perimplantare (PD/mm), calcolata sottraendo PPM da RCAL. I punteggi della placca a bocca piena (FMPS) e i punteggi del sanguinamento (FMBS) sono stati calcolati prima dell'inizio di ciascun periodo di induzione sperimentale della mucosite.

Valutazione del profilo osteo-immunoinfiammatorio Il fluido crevicolare perimplantare è stato raccolto dai siti implantari dallo stesso esaminatore. L'area è stata isolata, asciugata e il fluido è stato raccolto in due siti degli impianti dentali sperimentali (vestibolare e linguale) posizionando strisce di carta da filtro (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA) nel solco finché il clinico non ha percepito una leggera resistenza, e poi lasciando in sede per 15 s. Il volume del fluido è stato misurato con un dispositivo calibrato (Periotron 8000, Oraflow, Plainview, NY, USA). Le strisce sono state inserite in provette sterili contenenti 400 μL di soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) con Tween-20 allo 0,05%. I campioni di fluido crevicolare perimplantare sono stati immediatamente conservati a -20 °C.

Livelli di interferone (INF), interleuchina (IL)-4, IL-17, IL-1β, IL-10, IL-6, IL-23, fattore di necrosi tumorale (TNF)-α (Human Th17 HTH17MAG-14K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA), osteoprotegerina (OPG), osteocalcina (OC), osteopontina (OPN) (Human Bone HBNMAG-51K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA), metalloproteinasi di matrice (MMP)-2, MMP- 9 (Human MMP Panel 2 HMMP2MAG-55K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA), fattore di crescita trasformante (TGF)-β (Multi-specie TGFβ TGFBMAG-64K, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) e telopeptide reticolato di il collagene di tipo I (ICTP) (Uscn Life Science Inc. Wuhan, Hubei, RPC) nel fluido perimplantare sono stati determinati utilizzando kit disponibili in commercio. I saggi sono stati eseguiti secondo le raccomandazioni del produttore utilizzando lo strumento MAGpix™ (MiraiBio, Alameda, CA, USA). I campioni sono stati analizzati individualmente e le concentrazioni sono state stimate dalla curva standard utilizzando un'equazione polinomiale a cinque parametri utilizzando il software Xponent® (Millipore, Corporation, Billerica, MA, USA). La concentrazione media di ciascun mediatore è stata calcolata utilizzando l'individuo come unità statistica ed espressa come pg/ml.

Analisi dei dati Tutte le analisi sono state eseguite utilizzando il programma SAS versione 9.1 (Cary, NC, USA). I dati sono stati prima esaminati per la normalità utilizzando il test di Kolmogorov-Smirnov e i dati che hanno raggiunto la normalità sono stati analizzati utilizzando metodi parametrici. Le percentuali di siti sperimentali con accumulo di placca visibile, BI e medie PD sono state calcolate per ciascun impianto selezionato per il campionamento del fluido perimplantare. Successivamente, i parametri clinici ei livelli locali dei mediatori osteo-immunoinfiammatori sono stati mediati nei gruppi Placebo e Triclosan. Le differenze di FMPS e FMBS - misurate prima dell'inizio di ogni periodo di induzione sperimentale della mucosite.- tra i due gruppi sono stati confrontati utilizzando il test di Wilcoxon. Per gli altri parametri clinici (PI, BI, PPM, RCAL e PD), è stato utilizzato il test ANOVA/Tukey per rilevare differenze tra gruppi e periodi. Le concentrazioni di marcatori osteo-immunoinfiammatori tra i gruppi e tra i follow-up sono state confrontate utilizzando rispettivamente il test di Wilcoxon e quello di Friedman. Un livello sperimentale di significatività è stato determinato al 5% per tutte le analisi statistiche.