Nový diagnostický přístup pro kongenitální toxoplazmózu (TOXODIAG)
TOXODIAG: Nový diagnostický přístup pro kongenitální toxoplazmózu
Toxoplazmóza způsobená Toxoplasma gondii je většinou asymptomatická s výjimkou imunokompromitovaných jedinců a kojenců infikovaných in utero. Vrozená toxoplazmóza (CT) je důsledkem transplacentárního průchodu parazita, ke kterému dochází ve 30 % případů primární infekce během těhotenství. Novorozenecká biologická diagnostika toxoplazmózy je zásadní v případě (i) sugestivních klinických příznaků u novorozence bez informací o sérologickém stavu matky, (ii) sérokonverze diagnostikované během těhotenství, (iii) neproběhlého nebo nedostatečně sledovaného těhotenství a ( iiii) pro zvýšenou účinnost léčby podávané novorozenci co nejdříve. Vzhledem k omezením současných diagnostických testů by charakterizace specifického imunoglobulinu (Ig)G neosyntetizovaného novorozencem velmi pomohla pro časnou diagnostiku CT.
Hlavním cílem projektu TOXODIAG je ověřit a vyhodnotit metodu ELISPOT (Enzyme-Linked Immunosorbent SPOT assay) pro detekci B lymfocytů (LyB) u novorozenců senzibilizovaných in utero k produkci specifických imunoglobulinů (Ig) T. gondii po a. primární infekce matky během těhotenství. Přesněji řečeno, detekce a kvantifikace LyB secernujících IgG a IgM specifických pro T. gondii metodou ELISPOT bude aplikována i) na mononukleární buňky žen v sérokonverzi po toxoplazmatické primoinfekci během těhotenství a ii) na mononukleární buňky z pupečníkové krve novorozenců s podezřením na CT ve srovnání s pozitivními a negativními kontrolami infekce.
K dosažení tohoto cíle je TOXODIAG diagnostická, multicentrická, prospektivní, nerandomizovaná, srovnávací a kontrolovaná studie. Bude prováděna ve 3 paralelních skupinách těhotných žen, které provádějí prenatální sledování a rodí v porodnicích 3 nemocnic AP-HP (Louis MOURIER, Bichat-Claude Bernard a Cochin), které zajišťují sledování matky/dítěte. a biologických odběrů, s velkou odborností v oblasti gynekologie a porodnictví. Šedesát žen bude vybráno a zahrnuto do 3 skupin podle toxoplazmatické sérokonverze během těhotenství (n=30), pozitivní (n=15) nebo negativní (n=15) sérologie toxoplasmy. Potřebný biologický materiál se bude skládat z dalších zkumavek s krví, které budou odebírány současně s těmi, které se provádějí pro obvyklá těhotenská kontrolní vyšetření a budou odpovídat periferní krvi matky při zařazení, sérokonverzi a porodu i pupečníkové krvi.
Přehled studie
Detailní popis
Toxoplazmóza je kosmopolitní parazitóza, která postihuje jednu třetinu světové populace. Tato infekce, způsobená Toxoplasma gondii, je většinou asymptomatická s výjimkou imunokompromitovaných jedinců a kojenců infikovaných in utero. Vrozená toxoplazmóza (CT) je důsledkem transplacentárního průchodu parazita, ke kterému dochází ve 30 % případů primární infekce během těhotenství. Klinické důsledky jsou o to závažnější, když je fetální kontaminace časná (úmrtí v děloze, předčasný porod nebo termín porodu s periviscerálním postižením) a při pozdější kontaminaci vedou především k neurookulárním záchvatům. Těhotné ženy nebo ženy v plodném věku proto představují rizikovou skupinu a jsou exponovány odlišně podle své geografické polohy a spotřeby potravin. Novorozenecká biologická diagnostika toxoplazmózy je zásadní v případě (i) sugestivních klinických příznaků u novorozence bez informací o sérologickém stavu matky, (ii) sérokonverze diagnostikované během těhotenství, (iii) neproběhlého nebo nedostatečně sledovaného těhotenství a ( iiii) pro zvýšenou účinnost léčby podávané novorozenci co nejdříve. Tato diagnóza je založena především na výzkumu parazitů v novorozenecké plodové vodě nebo placentě pomocí PCR a/nebo inokulaci u myší, jakož i na sérologických testech. Imunoglobuliny (Ig) A a IgM neprocházejí placentární bariérou a představují dobré markery vrozené infekce u novorozence. Nicméně nejsou specifické pro akutní infekci a nejsou již zjistitelné při porodu v případech infekcí, které matka dostala před 3. trimestrem těhotenství. Detekce IgG syntetizovaného dítětem má diagnostickou hodnotu až po 6 měsících života, po eliminaci IgG přenášených matkou a zůstávají zachovány techniky srovnávající profily IgG odpovědi matky a dítěte s řadou toxoplazmatických antigenů. obtížné interpretovat (western blot, ELIFA). Nicméně je to kombinace těchto různých testů, která tvoří rozhodovací strom pro novorozeneckou biologickou diagnózu CT. Charakterizace specifického IgG neosyntetizovaného novorozencem by byla velkou pomocí pro včasnou diagnostiku vrozené infekce T. gondii. Tento projekt spočívá ve stanovení přítomnosti B lymfocytů (LyB) senzibilizovaných in utero k produkci specifického IgG u novorozence v případě CT. Tento přístup lze předpokládat z důvodu zralosti získané fetálními LyB od konce prvního trimestru těhotenství, prokázané jejich schopností produkovat vysoce afinitní Ig v případě infekce matky nebo novorozenecké imunizace.
Tento výzkum je diagnostický, multicentrický, prospektivní, nerandomizovaný, srovnávací a kontrolovaný. Bude probíhat ve 3 paralelních skupinách těhotných žen, které provádějí prenatální sledování a rodí na porodních sálech 3 nemocnic AP-HP, které zajišťují sledování matky/dítěte a biologické odběry, s vysokou odborností v oblasti gynekologie a porodnictví. Šedesát pacientů bude vybráno a zahrnuto podle následujícího rozdělení:
- Pozitivní kontrolní skupina (ženy s pozitivní sérologií toxoplazmy): 15 pacientek;
- Negativní kontrolní skupina (ženy s negativní sérologií toxoplazmy): 15 pacientek;
- Skupina žen s diagnostikovanou toxoplazmatickou sérokonverzí během těhotenství: 30 pacientek.
Nenáborovými centry budou biologické laboratoře HUPC a HUPNVS pro realizaci sérologických testů a expertiz v biologické diagnostice a IRD UMR 216 pro koordinaci, laboratorní experimenty a expertizy v imunologii.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Fáze
- Nelze použít
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Colombes, Francie, 92700
- Hôpital Louis Mourier
-
Paris, Francie
- Hôpital Bichat
-
Paris, Francie
- Hôpital Cochin
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Popis
Kritéria pro zařazení:
Ve všech případech se jedná o těhotné ženy ve věku ≥ 18 let.
- Skupina sérokonverze: diagnóza toxoplazmatické sérokonverze bude dokumentována negativní sérologií v časném těhotenství, která se během těhotenství stane pozitivní, se syntézou specifického IgG;
- Pozitivní kontrolní skupina: známá a zdokumentovaná pozitivní sérologie toxoplazmózy;
- Negativní kontrolní skupina: známá a zdokumentovaná negativní sérologie na toxoplazmózu v 7. měsíci těhotenství.
Kritéria vyloučení:
Kritéria nezařazení společná pro všechny tři skupiny
- očekávaný porod v jiné porodnici, která se studie neúčastní;
- Pozitivní sérologie pro HIV;
- Kontraindikace dalších zkumavek při odběru krve odpovídající obvyklému sledování těhotenství (anémie, všechny ostatní případy dle hodnocení lékaře odpovědného za sledování);
- Absence sociálního pojištění nebo CMU nebo AME;
- Zranitelná těhotná žena (pod opatrovnictvím nebo opatrovnictvím);
- Bez podpisu souhlasu s účastí ve výzkumu.
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Diagnostický
- Přidělení: Nerandomizované
- Intervenční model: Paralelní přiřazení
- Maskování: Žádné (otevřený štítek)
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Jiný: negativní kontrolní skupina
další vzorky krve na negativní kontrolní skupině
|
další vzorky krve matky a pupeční šňůry při porodu
|
|
Jiný: pozitivní kontrolní skupina
další vzorky krve na pozitivní kontrolní skupině
|
další vzorky krve matky a pupeční šňůry při porodu
|
|
Jiný: skupina sérokonverze
další vzorky krve na sérokonverzní skupině
|
další vzorky krve matky a pupeční šňůry při porodu
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Detekce/kvantifikace T. gondii IgG a IgM sekretujících LyB pomocí ELISPOT na mononukleárních buňkách pupečníkové krve (MNC) novorozenců s podezřením na kongenitální toxoplazmózu.
Časové okno: 6 měsíců
|
Při porodu bude odebrána pupečníková krev.
Je zaveden okruh, který zajistí přesun do výzkumné laboratoře za účelem posouzení izolace MNC do 24 hodin po odběru krve.
Izolované MNC se poté zmrazí na -80 °C až do provedení testu ELISPOT s použitím adaptace testu, jak je validováno v rámci sekundárních výstupních opatření 1, 4 a 5 (doba trvání testu; detekce více Ig; vliv typu T. gondii záchytný antigen).
|
6 měsíců
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Detekce/kvantifikace T. gondii IgG a IgM secernujících LyB metodou ELISPOT na mononukleárních buňkách (MNC) těhotných žen s primární infekcí toxoplasmou.
Časové okno: 6 měsíců
|
Periferní krev bude odebírána v porodnicích studie.
Izolované MNC budou zmraženy při -80 °C až do realizace testu ELISPOT se zaměřením na dvě hlavní úpravy: snížení počtu dnů trvání testu ze 7 na 2; simultánní detekce IgM a IgG.
|
6 měsíců
|
|
Srovnání počtu T. gondii IgG a IgM sekretujících LyB odhalených pomocí ELISPOT mezi třemi skupinami matek při porodu: pozitivní kontrolní skupinou, negativní kontrolní skupinou a sérokonverzní skupinou.
Časové okno: 6 měsíců
|
Periferní krev bude odebírána v porodnicích studie.
Izolované MNC budou zmraženy při -80 °C až do provedení testu ELISPOT s očekávanými výsledky podle sérologického stavu T. gondii při dodání.
|
6 měsíců
|
|
Porovnání počtu T. gondii secernujících LyB a IgM zjištěných pomocí ELISPOT u matek v době biologické diagnózy sérokonverze a při porodu.
Časové okno: 6 měsíců
|
Periferní krev bude odebírána v porodnicích studie.
Izolované MNC budou zmraženy při -80 °C až do provedení testu ELISPOT s vyhodnocením kinetiky anti-T.
gondii buňky vylučující IgM a IgG.
|
6 měsíců
|
|
Srovnání počtu specifických IgG a IgM secernujících LyB odhalených pomocí ELISPOT u matek primárně infikovaných T. gondii při porodu a u jejich novorozenců.
Časové okno: 6 měsíců
|
Mateřská periferní krev i pupečníková krev budou odebrány v porodnicích studie.
Izolované MNC budou zmraženy při -80 °C až do provedení testu ELISPOT s vyhodnocením zralosti imunitního systému dítěte.
To bude provedeno porovnáním vzorů skvrn LyB buněk matky a jejího dítěte s uvedením jak afinity, tak avidity.
|
6 měsíců
|
|
Srovnání počtu T. gondii IgG a IgM secernujících LyB odhalené pomocí ELISPOT provedené s použitím buď T. gondii typu I nebo typu II jako záchytného antigenu.
Časové okno: 6 měsíců
|
Demonstrace všudypřítomnosti testu ELISPOT aplikovaného na detekci IgM a IgG T. gondii: všudypřítomnost bude prokázána, pokud se počet secernujících B buněk nebude lišit.
|
6 měsíců
|
|
Porovnání rozmanitosti populací LyB buněk mezi skupinami žen (infikovaných nebo neinfikovaných toxoplazmou během těhotenství) a kojenců (s podezřením na vrozenou infekci toxoplazmou nebo ne).
Časové okno: 6 měsíců
|
Molekulární studie využívající techniku Ig spektratypizace za účelem prozkoumání Ig variabilní oblasti specializované na rozpoznávání antigenu: umožní zvýraznit LyB populace, které byly senzibilizovány T. gondii.
|
6 měsíců
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: Florence Migot Nabias, PhD, university Paris Descarte
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
- Onemocnění centrálního nervového systému
- Nemoci nervového systému
- Infekce
- Kojenec, novorozenec, nemoci
- Protozoální infekce
- Parazitární onemocnění
- Infekce centrálního nervového systému
- Kokcidióza
- Parazitární infekce centrálního nervového systému
- Protozoální infekce centrálního nervového systému
- Vrozené, dědičné a neonatální nemoci a abnormality
- Toxoplazmóza
- Toxoplazmóza, vrozená
Další identifikační čísla studie
- 2017-A02208-45
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .