先天性弓形虫病的新诊断方法 (TOXODIAG)
TOXODIAG：先天性弓形虫病的新诊断方法
弓形虫病由弓形虫引起，除免疫功能低下的个体和在子宫内感染的婴儿外，弓形虫病大多无症状。 先天性弓形虫病 (CT) 是由寄生虫经胎盘传播引起的，30% 的妊娠期原发感染病例都会发生这种情况。 新生儿弓形虫病的生物学诊断在以下情况下是必不可少的：(i) 新生儿有提示性临床症状，但没有关于母亲血清学状态的信息，(ii) 在怀孕期间诊断出血清转化，(iii) 未怀孕或未怀孕，以及 ( iiii) 尽快提高新生儿治疗的有效性。 鉴于目前诊断测试的局限性，新生儿合成的特异性免疫球蛋白（Ig）G的表征将对CT的早期诊断有很大帮助。
TOXODIAG 项目的主要目标是验证和评估用于检测新生儿 B 淋巴细胞 (LyB) 的 ELISPOT（酶联免疫吸附点测定）方法，该方法在子宫内被致敏以产生弓形虫特异性免疫球蛋白（Ig）母亲在怀孕期间的原发性感染。 更准确地说，使用 ELISPOT 方法检测和定量 LyB 分泌 IgG 和 IgM 特异性针对刚地弓形虫的方法将适用于 i) 怀孕期间弓形虫感染后血清转化中女性的单核细胞和 ii) 脐带血单核细胞新生儿疑似 CT，与阳性和阴性感染对照相比。
为实现这一目标，TOXODIAG 是一项诊断性、多中心、前瞻性、非随机、比较和对照研究。 它将在 AP-HP 的 3 家医院（Louis MOURIER、Bichat-Claude Bernard 和 Cochin）的产科病房分 3 个平行的孕妇组进行产前随访和分娩，以确保母婴随访和生物采样，具有丰富的妇产科专业知识。 根据孕期弓形虫血清学转换(n=30)、阳性(n=15)或阴性(n=15)弓形虫血清学，选择60名妇女分为3组。 必要的生物材料将包括额外的血液试管，这些试管将与通常的妊娠后续检查同时采集，并对应于纳入、血清转化和分娩时的母体外周血以及脐带血。
研究概览
详细说明
弓形虫病是一种世界性寄生虫病，影响世界三分之一的人口。 这种由弓形虫引起的感染，除了免疫功能低下的个体和在子宫内感染的婴儿外，大多没有症状。 先天性弓形虫病 (CT) 是由寄生虫经胎盘传播引起的，30% 的妊娠期原发感染病例都会发生这种情况。 当胎儿污染较早时（子宫内死亡、早产或足月分娩伴有内脏周围受累），临床后果会更加严重，并且在后期污染的情况下主要导致神经眼病发作。 因此，孕妇或育龄妇女构成一个高危群体，并根据其地理位置和食物消费情况而受到不同的影响。 新生儿弓形虫病的生物学诊断在以下情况下是必不可少的：(i) 新生儿有提示性临床症状，但没有关于母亲血清学状态的信息，(ii) 在怀孕期间诊断出血清转化，(iii) 未怀孕或未怀孕，以及 ( iiii) 尽快提高新生儿治疗的有效性。 该诊断主要基于通过 PCR 和/或小鼠接种对新生儿羊水或胎盘进行的寄生虫研究，以及血清学测试。 免疫球蛋白 (Ig) A 和 IgM 不穿过胎盘屏障，是新生儿先天性感染的良好标志物。 然而，它们不是急性感染所特有的，如果母亲在妊娠第三个三个月前感染，则在出生时不再检测到。 婴儿合成的 IgG 的检测只有在 6 个月后才有诊断价值，一旦母体传播的 IgG 被消除，比较母亲和孩子的 IgG 反应谱对多种弓形虫抗原的技术仍然存在难以解释（western blot，ELIFA）。 然而，正是这些不同测试的组合构成了 CT 新生儿生物学诊断的决策树。 新生儿新合成特异性IgG的表征将对早期诊断弓形虫先天性感染有很大帮助。 本项目包括确定新生儿中 B 淋巴细胞 (LyB) 的存在，这些 B 淋巴细胞在子宫内被致敏以在 CT 的情况下产生特异性 IgG。 可以设想这种方法，因为胎儿 LyB 从妊娠的头三个月末获得成熟，在母体感染或新生儿免疫接种的情况下，它们能够产生高亲和力 Ig，证明了这一点。
这项研究是诊断性的、多中心的、前瞻性的、非随机的、比较的和受控的。 它将在 AP-HP 的 3 家医院的产科病房中分 3 个平行的孕妇组进行产前随访和分娩，以确保母婴随访和生物采样，具有强大的妇产科专业知识。 将根据以下分布选择并包括 60 名患者：
- 阳性对照组（弓形虫血清学阳性的女性）：15名患者；
- 阴性对照组（弓形虫血清学阴性的女性）：15名患者；
- 怀孕期间被诊断患有弓形虫血清转化的妇女组：30 名患者。
非招聘中心将是 HUPC 和 HUPNVS 生物实验室，用于实现血清学测试和生物诊断专业知识，以及 IRD UMR 216 用于协调、实验室实验和免疫学专业知识。
研究类型
注册 (预期的)
阶段
- 不适用
联系人和位置
学习联系方式
- 姓名：Florence Migot Nabias, PhD
- 电话号码：01 70 64 94 34
- 邮箱：florence.migot-nabias@ird.fr
研究联系人备份
- 姓名：Magalie Dambrun
- 电话号码：01 70 64 94 34
- 邮箱：magalie.op@live.fr
学习地点
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Colombes、法国、92700
- 招聘中
- Hôpital Louis Mourier
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接触：
- LAURENT MANDELBROT
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Paris、法国
- 招聘中
- Hôpital Cochin
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接触：
- OLIVIA ANSELEM
-
Paris、法国
- 招聘中
- Hopital Bichat
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接触：
- Morgane Valentin
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参与标准
资格标准
适合学习的年龄
接受健康志愿者
有资格学习的性别
描述
纳入标准：
在所有情况下，都涉及年龄≥ 18 岁的孕妇。
- 血清转化组：弓形虫血清转化的诊断将通过妊娠早期血清学阴性在妊娠期间变为阳性，并合成特异性 IgG 来记录；
- 阳性对照组：已知和记录在案的弓形虫病血清学阳性；
- 阴性对照组：妊娠 7 个月时弓形虫病的已知和记录阴性血清学。
排除标准：
三组共同的非纳入标准
- 预期在未参与研究的另一位孕妇中分娩；
- HIV 血清学阳性；
- 在与通常的妊娠随访相对应的采血期间禁忌使用额外的试管（贫血，所有其他情况根据负责随访的临床医生的评估）；
- 没有社会保险或 CMU 或 AME；
- 弱势孕妇（受监护或监护）；
- 没有签署参与研究的同意书。
学习计划
研究是如何设计的？
设计细节
- 主要用途：诊断
- 分配：非随机化
- 介入模型：并行分配
- 屏蔽：无（打开标签）
武器和干预
参与者组/臂 |
干预/治疗 |
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其他：阴性对照组
阴性对照组的血液额外样本
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分娩时额外的母亲血液和脐带样本
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其他：阳性对照组
阳性对照组的血液额外样本
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分娩时额外的母亲血液和脐带样本
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其他：血清转化组
血清转化组的额外血液样本
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分娩时额外的母亲血液和脐带样本
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研究衡量的是什么？
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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通过 ELISPOT 对疑似先天性弓形虫病新生儿的脐带血单核细胞 (MNC) 检测/定量弓形虫 IgG 和 IgM 分泌 LyB。
大体时间：6个月
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脐带血将在出生时采集。
建立一个电路以确保转移到研究实验室，以便在抽血后 24 小时内评估 MNC 隔离。
此后将分离的 MNC 冷冻在 -80°C，直到实现 ELISPOT 测定，使用根据次要结果测量 1、4 和 5（测试持续时间；多个 Ig 检测；T 类型的影响）验证的测试适应性。弓形虫捕获抗原）。
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6个月
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
|---|---|---|
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通过 ELISPOT 检测/定量弓形虫原发感染孕妇的单核细胞 (MNC) 中分泌 LyB 的弓形虫 IgG 和 IgM。
大体时间：6个月
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外周血将在研究的产妇中收集。
分离的 MNC 将在 -80°C 下冷冻，直到实现 ELISPOT 测定，重点是两个主要调整：将测试持续时间从 7 天减少到 2 天；同时检测 IgM 和 IgG。
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6个月
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阳性对照组、阴性对照组和血清转化组三组产妇ELISPOT检测弓形虫IgG和分泌LyB的IgM数量比较。
大体时间：6个月
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外周血将在研究的产妇中收集。
分离的 MNC 将在 -80°C 下冷冻，直到实现 ELISPOT 测定，根据交付时的弓形虫血清学状态获得预期结果。
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6个月
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在血清转化生物诊断时和分娩时，ELISPOT 显示母亲体内弓形虫 IgG 和分泌 LyB 的 IgM 数量的比较。
大体时间：6个月
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外周血将在研究的产妇中收集。
分离的 MNC 将在 -80°C 下冷冻，直到实现 ELISPOT 测定，并评估抗 T 的动力学。
弓形虫 IgM 和 IgG 分泌细胞。
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6个月
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比较 ELISPOT 显示的特异性 IgG 和 IgM 分泌 LyB 的数量在弓形虫初次感染的母亲分娩时和新生儿中。
大体时间：6个月
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在研究的产妇中将收集产妇外周血和脐带血。
分离的 MNC 将在 -80°C 下冷冻，直到实现 ELISPOT 测定，并评估婴儿免疫系统的成熟度。
这将通过比较母亲和她的婴儿的 LyB 细胞斑点的模式以及亲和力和亲和力的指示来完成。
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6个月
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使用 I 型或 II 型弓形虫作为捕获抗原进行 ELISPOT 显示的弓形虫 IgG 和分泌 LyB 的 IgM 数量的比较。
大体时间：6个月
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证明适用于弓形虫 IgM 和 IgG 检测的 ELISPOT 检测的普遍性：如果分泌 B 细胞的数量没有差异，将证明普遍性。
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6个月
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妇女组（怀孕期间感染或未感染弓形虫）和婴儿组（疑似先天性弓形虫感染或未感染）之间 LyB 细胞群多样性的比较。
大体时间：6个月
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使用 Ig 光谱分析技术进行分子研究，以研究专门用于抗原识别的 Ig 可变区：它将允许突出显示已被弓形虫致敏的 LyB 种群。
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6个月
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合作者和调查者
调查人员
- 首席研究员：Florence Migot Nabias, PhD、university Paris Descarte
研究记录日期
研究主要日期
学习开始 (实际的)
初级完成 (预期的)
研究完成 (预期的)
研究注册日期
首次提交
首先提交符合 QC 标准的
首次发布 (实际的)
研究记录更新
最后更新发布 (实际的)
上次提交的符合 QC 标准的更新
最后验证
更多信息
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血液额外样本的临床试验
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Centre Hospitalier Universitaire de Saint Etienne完全的