Uusi diagnostinen lähestymistapa synnynnäiseen toksoplasmoosiin (TOXODIAG)
TOXODIAG: Uusi diagnostinen lähestymistapa synnynnäiseen toksoplasmoosiin
Toxoplasma gondii -bakteerin aiheuttama toksoplasmoosi on enimmäkseen oireeton paitsi immuunipuutteellisilla yksilöillä ja kohdussa infektoituneilla imeväisillä. Synnynnäinen toksoplasmoosi (CT) johtuu loisen kulkeutumisesta istukan läpi, jota esiintyy 30 %:ssa primaarisen infektion tapauksista raskauden aikana. Vastasyntyneen toksoplasmoosin biologinen diagnoosi on olennainen, jos (i) vastasyntyneellä on viittaavia kliinisiä oireita ilman tietoa äidin serologisesta tilasta, (ii) raskauden aikana diagnosoitu serokonversio, (iii) raskaus, jota ei ole seurattu tai se on huonosti seurattu, ja ( iiii) vastasyntyneelle mahdollisimman pian annettavien hoitojen tehokkuuden parantamiseksi. Ottaen huomioon nykyisten diagnostisten testien rajoitukset, vastasyntyneen neosyntetisoiman spesifisen immunoglobuliinin (Ig)G:n karakterisointi auttaisi suuresti TT:n varhaisessa diagnosoinnissa.
TOXODIAG-projektin päätavoitteena on validoida ja arvioida ELISPOT-menetelmää (Enzyme-Linked Immunosorbent SPOT assay) vastasyntyneen B-lymfosyyttien (LyB) havaitsemiseksi, jotka on herkistynyt kohdussa tuottamaan T. gondii -spesifisiä immunoglobuliineja (Ig) äidin ensisijainen infektio raskauden aikana. Tarkemmin sanottuna T. gondiille spesifisen LyB:tä erittävän IgG:n ja IgM:n havaitsemista ja kvantitointia ELISPOT-menetelmällä sovelletaan i) raskauden aikana tapahtuneen toksoplasmisen primoinfektion seurauksena serokonversiossa olevien naisten mononukleaarisiin soluihin ja ii) napanuoraveren mononukleaarisoluihin. TT:tä epäillyistä vastasyntyneistä verrattuna positiivisiin ja negatiivisiin infektiokontrolleihin.
Tämän tavoitteen saavuttamiseksi TOXODIAG on diagnostinen, monikeskinen, prospektiivinen, ei-satunnaistettu, vertaileva ja kontrolloitu tutkimus. Se suoritetaan 3 rinnakkaisessa raskaana olevien naisten ryhmässä, jotka suorittavat synnytystä edeltävää seurantaa ja synnyttävät AP-HP:n kolmen sairaalan (Louis MOURIER, Bichat-Claude Bernard ja Cochin) synnytysosastoilla, jotka varmistavat äidin/lapsen seurannan. ja biologiset näytteet, joilla on laaja gynekologian ja synnytysalan asiantuntemus. Kuusikymmentä naista valitaan ja sisällytetään 3 ryhmään raskauden aikaisen toksoplasmisen serokonversion (n=30), positiivisen (n=15) tai negatiivisen (n=15) toksoplasmaserologian mukaan. Tarvittava biologinen materiaali koostuu ylimääräisistä veriputkista, jotka otetaan samaan aikaan kuin tavanomaisia raskaudenseurantatutkimuksia varten ja jotka vastaavat äidin perifeeristä verta inkluusiossa, serokonversiossa ja synnytyksessä sekä napanuoraverta.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Toksoplasmoosi on kosmopoliittinen loinen, joka vaikuttaa kolmannekseen maailman väestöstä. Tämä Toxoplasma gondii -bakteerin aiheuttama infektio on enimmäkseen oireeton paitsi immuunipuutteellisilla yksilöillä ja kohdussa infektoituneilla imeväisillä. Synnynnäinen toksoplasmoosi (CT) johtuu loisen kulkeutumisesta istukan läpi, jota esiintyy 30 %:ssa primaarisen infektion tapauksista raskauden aikana. Kliiniset seuraukset ovat sitäkin vakavampia, kun sikiön kontaminaatio on varhainen (kuolema kohdussa, ennenaikainen synnytys tai keskeneräinen synnytys periviskeraalisen vaikutuksen kera) ja johtavat pääasiassa hermosolukohtauksiin myöhemmässä kontaminaatiossa. Raskaana olevat tai hedelmällisessä iässä olevat naiset muodostavat siksi riskiryhmän ja altistuvat eri tavalla maantieteellisen sijaintinsa ja ruoan kulutuksensa mukaan. Vastasyntyneen toksoplasmoosin biologinen diagnoosi on olennainen, jos (i) vastasyntyneellä on viittaavia kliinisiä oireita ilman tietoa äidin serologisesta tilasta, (ii) raskauden aikana diagnosoitu serokonversio, (iii) raskaus, jota ei ole seurattu tai se on huonosti seurattu, ja ( iiii) vastasyntyneelle mahdollisimman pian annettavien hoitojen tehokkuuden parantamiseksi. Tämä diagnoosi perustuu pääasiassa vastasyntyneen lapsivesien tai istukan loisten tutkimukseen PCR:llä ja/tai hiirten rokotuksilla sekä serologisiin testeihin. Immunoglobuliinit (Ig) A ja IgM eivät läpäise istukan estettä ja edustavat hyviä synnynnäisen infektion merkkiaineita vastasyntyneellä. Ne eivät kuitenkaan ole spesifisiä akuutille infektiolle, eivätkä ne ole enää havaittavissa syntymähetkellä tapauksissa, joissa äiti on saanut infektioita ennen raskauden 3. kolmannesta. Lapsen syntetisoiman IgG:n havaitsemisella on diagnostista arvoa vasta 6 kuukauden iän jälkeen, kun äidin välittämä IgG on eliminoitu ja äidin ja lapsen IgG-vasteprofiilien vertaaminen useisiin toksoplasmisiin antigeeneihin säilyy. vaikea tulkita (western blot, ELIFA). Se on kuitenkin näiden erilaisten testien yhdistelmä, joka muodostaa vastasyntyneen biologisen TT-diagnoosin päätöspuun. Vastasyntyneen uussyntetisoiman spesifisen IgG:n karakterisointi auttaisi suuresti T. gondiin synnynnäisen infektion varhaisessa diagnosoinnissa. Tämä projekti koostuu B-lymfosyyttien (LyB) läsnäolon määrittämisestä vastasyntyneessä kohdussa tuottamaan spesifistä IgG:tä CT:n tapauksessa. Tämä lähestymistapa voidaan ajatella, koska sikiön LyB on saavuttanut kypsyyden ensimmäisen raskauskolmanneksen lopusta lähtien, minkä osoittaa niiden kyky tuottaa korkean affiniteetin Ig:tä äidin infektion tai vastasyntyneen immunisoinnin tapauksessa.
Tämä tutkimus on diagnostista, monikeskistä, prospektiivista, ei-satunnaistettua, vertailevaa ja kontrolloitua. Se suoritetaan 3 rinnakkaisessa ryhmässä raskaana oleville naisille, jotka suorittavat synnytystä edeltävää seurantaa ja synnyttävät AP-HP:n kolmen sairaalan synnytysosastoilla, jotka varmistavat äidin/lapsen seurannan ja biologisen näytteenoton suurella gynekologian ja synnytysasiantuntemuksella. Kuusikymmentä potilasta valitaan ja otetaan mukaan seuraavan jakauman mukaisesti:
- Positiivinen kontrolliryhmä (naiset, joilla on positiivinen toksoplasmaserologia): 15 potilasta;
- Negatiivinen kontrolliryhmä (naiset, joilla on negatiivinen toksoplasmaserologia): 15 potilasta;
- Ryhmä naisia, joilla on diagnosoitu toksoplasminen serokonversio raskauden aikana: 30 potilasta.
Ei-rekrytoivia keskuksia ovat HUPC- ja HUPNVS-biologian laboratoriot serologisten testien toteuttamiseen ja biologisen diagnoosin asiantuntemukseen sekä IRD UMR 216 koordinointiin, laboratoriokokeisiin ja immunologian asiantuntemukseen.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Colombes, Ranska, 92700
- Hôpital Louis Mourier
-
Paris, Ranska
- Hôpital Bichat
-
Paris, Ranska
- Hôpital Cochin
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
Kaikissa tapauksissa kyseessä ovat raskaana olevat naiset, joiden ikä on ≥ 18 vuotta.
- Serokonversioryhmä: toksoplasmisen serokonversion diagnoosi dokumentoidaan negatiivisella serologialla raskauden alkuvaiheessa, josta tulee positiivinen raskauden aikana spesifisen IgG:n synteesin kanssa;
- Positiivinen kontrolliryhmä: tunnettu ja dokumentoitu positiivinen toksoplasmoosiserologia;
- Negatiivinen kontrolliryhmä: tunnettu ja dokumentoitu negatiivinen serologia toksoplasmoosille 7. raskauskuukauden aikana.
Poissulkemiskriteerit:
Näille kolmelle ryhmälle yhteiset sisällyttämättömyyden kriteerit
- Odotettu synnytys toisessa äitiydessä, joka ei osallistu tutkimukseen;
- Positiivinen serologia HIV:lle;
- Vasta-aihe lisäputkien ottamiseen verinäytteiden aikana, mikä vastaa tavanomaista raskauden seurantaa (anemia, kaikki muut tapaukset seurannasta vastaavan lääkärin arvion mukaan);
- Sosiaalivakuutuksen tai CMU:n tai AME:n puuttuminen;
- Haavoittuva raskaana oleva nainen (huollon tai huoltajan alainen);
- Ei allekirjoitusta tutkimukseen osallistumiselle.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Diagnostiikka
- Jako: Ei satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Muut: negatiivinen kontrolliryhmä
lisäverinäytteitä negatiivisesta kontrolliryhmästä
|
lisänäytteet äidin verestä ja napanuorasta synnytyksen yhteydessä
|
|
Muut: positiivinen kontrolliryhmä
lisäverinäytteitä positiivisesta kontrolliryhmästä
|
lisänäytteet äidin verestä ja napanuorasta synnytyksen yhteydessä
|
|
Muut: serokonversioryhmä
lisäverinäytteitä serokonversioryhmässä
|
lisänäytteet äidin verestä ja napanuorasta synnytyksen yhteydessä
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
T. gondii IgG:n ja IgM:ää erittävän LyB:n havaitseminen/kvantifiointi ELISPOT:lla synnynnäisestä toksoplasmoosista epäiltyjen vastasyntyneiden napanuoraveren mononukleaarisoluissa (MNC).
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Napanuoraveri kerätään syntymän yhteydessä.
Piiri otetaan käyttöön varmistamaan siirto tutkimuslaboratorioon MNC-eristyksen arvioimiseksi alle 24 tunnin kuluessa veren otosta.
Tämän jälkeen eristetyt MNC:t jäädytetään -80 °C:ssa ELISPOT-määrityksen toteuttamiseen saakka käyttämällä testin mukautusta, joka on validoitu toissijaisten tulosten 1, 4 ja 5 mukaisesti (testin kesto; useiden Ig:iden havaitseminen; T-tyypin vaikutus. gondii sieppausantigeeni).
|
6 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
T. gondii IgG:n ja IgM:ää erittävän LyB:n havaitseminen/kvantifiointi ELISPOT:lla raskaana olevien naisten mononukleaarisissa soluissa (MNC), joilla on toksoplasman primaarinen infektio.
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Äitiystutkimuksessa perifeeristä verta kerätään.
Eristetty MNC jäädytetään -80 °C:ssa ELISPOT-määrityksen toteuttamiseen asti keskittyen kahteen pääsäätöön: testin kestopäivien määrän pienentäminen muodossa 7 2:een; IgM:n ja IgG:n samanaikainen havaitseminen.
|
6 kuukautta
|
|
ELISPOT:n paljastaman T. gondii IgG:n ja IgM:ää erittävän LyB:n lukumäärän vertailu kolmen synnytyksen jälkeisen äitiryhmän välillä: positiivinen kontrolliryhmä, negatiivinen kontrolliryhmä ja serokonversioryhmä.
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Äitiystutkimuksessa perifeeristä verta kerätään.
Eristetty MNC jäädytetään -80 °C:ssa ELISPOT-määrityksen toteuttamiseen asti, ja odotetut tulokset perustuvat T. gondii -serologiseen tilaan luovutushetkellä.
|
6 kuukautta
|
|
ELISPOT:n paljastaman T. gondii IgG:n ja IgM:ää erittävän LyB:n määrän vertailu äideillä serokonversion biologisen diagnoosin aikana ja synnytyksen aikana.
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Äitiystutkimuksessa perifeeristä verta kerätään.
Eristetty MNC jäädytetään -80 °C:ssa, kunnes ELISPOT-määritys suoritetaan anti-T:n kinetiikkaa arvioiden.
gondii IgM:tä ja IgG:tä erittävät solut.
|
6 kuukautta
|
|
ELISPOT:n paljastamien spesifisten IgG:tä ja IgM:ää erittävien LyB:n lukumäärän vertailu T. gondii -primaarisesti tartunnan saaneilla äideillä synnytyksen aikana ja vastasyntyneillä.
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Äidin perifeeristä verta sekä napanuoraverta kerätään tutkimuksen äitiydellä.
Eristetty MNC jäädytetään -80 °C:ssa siihen asti, kunnes ELISPOT-määritys suoritetaan, jolloin arvioidaan vauvan immuunijärjestelmän kypsyys.
Tämä tehdään vertaamalla äidin ja hänen vauvansa LyB-solutäplien kuvioita sekä affiniteetin että aviditeetin osoittamiseen.
|
6 kuukautta
|
|
ELISPOT:lla paljastetun T. gondii IgG:n ja IgM:ää erittävän LyB:n määrän vertailu suoritettuna käyttämällä joko T. gondii tyyppiä I tai tyyppiä II sieppausantigeeninä.
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
T. gondii IgM- ja IgG-detektioon sovelletun ELISPOT-määrityksen yleisyyden osoittaminen: yleisyys osoitetaan, jos erittävien B-solujen määrät eivät ole erilaisia.
|
6 kuukautta
|
|
LyB-solupopulaatioiden monimuotoisuuden vertailu naisryhmien (toksoplasmatartunnan saaneiden tai ei raskauden aikana) ja imeväisten (epäillään synnynnäisestä toksoplasmainfektiosta tai ei) välillä.
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Molekyylitutkimus käyttäen Ig-spektratyypitystekniikkaa antigeenien tunnistamiseen erikoistuneen Ig:n vaihtelevan alueen tutkimiseksi: sen avulla voidaan korostaa LyB-populaatioita, jotka T. gondii on herkistynyt.
|
6 kuukautta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Tutkijat
- Päätutkija: Florence Migot Nabias, PhD, university Paris Descarte
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
- Keskushermoston sairaudet
- Hermoston sairaudet
- Infektiot
- Vauva, vastasyntynyt, sairaudet
- Alkueläininfektiot
- Parasiittiset sairaudet
- Keskushermoston infektiot
- Kokkidioosi
- Keskushermoston loisinfektiot
- Keskushermoston alkueläininfektiot
- Synnynnäiset, perinnölliset ja vastasyntyneiden sairaudet ja poikkeavuudet
- Toksoplasmoosi
- Toksoplasmoosi, synnynnäinen
Muut tutkimustunnusnumerot
- 2017-A02208-45
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .