Nowe podejście diagnostyczne do wrodzonej toksoplazmozy (TOXODIAG)

Toksoplazmoza to kosmopolityczna parazytoza, która dotyka jedną trzecią światowej populacji. Ta infekcja, wywołana przez Toxoplasma gondii, jest w większości bezobjawowa, z wyjątkiem osób z obniżoną odpornością i niemowląt zakażonych in utero. Wrodzona toksoplazmoza (CT) wynika z przejścia pasożyta przez łożysko, które występuje w 30% przypadków pierwotnego zakażenia w czasie ciąży. Konsekwencje kliniczne są tym poważniejsze, gdy zakażenie płodu jest wczesne (śmierć in utero, przedwczesny poród lub poród o czasie z zajęciem tkanek okołotrzewnych) i w przypadku późniejszego zakażenia skutkują głównie atakami nerwowo-ocznymi. Kobiety w ciąży lub kobiety w wieku rozrodczym stanowią zatem grupę ryzyka i są na nie narażone w różny sposób w zależności od ich położenia geograficznego i spożycia żywności. Biologiczna diagnostyka toksoplazmozy u noworodków jest niezbędna w przypadku (i) sugestywnych objawów klinicznych u noworodka bez informacji o stanie serologicznym matki, (ii) serokonwersji stwierdzonej w czasie ciąży, (iii) braku lub niedostatecznej kontroli ciąży oraz ( iiii) dla zwiększenia skuteczności zabiegów podawanych jak najszybciej noworodkowi. Rozpoznanie to opiera się głównie na badaniach pasożytów w płynie owodniowym lub łożysku noworodka metodą PCR i/lub inokulacji u myszy, a także na badaniach serologicznych. Immunoglobuliny (Ig) A i IgM nie przenikają przez barierę łożyskową i są dobrymi markerami zakażenia wrodzonego u noworodka. Niemniej jednak nie są one specyficzne dla ostrej infekcji i nie są już wykrywalne przy urodzeniu w przypadku infekcji nabytych przez matkę przed trzecim trymestrem ciąży. Wykrycie IgG syntetyzowanej przez dziecko ma wartość diagnostyczną dopiero po 6 miesiącu życia, gdy IgG przenoszone przez matkę zostały wyeliminowane, a techniki porównujące profile odpowiedzi IgG matki i dziecka na wiele antygenów toksoplazmatycznych pozostają trudne do interpretacji (western blot, ELIFA). Niemniej jednak połączenie tych różnych testów tworzy drzewo decyzyjne dla biologicznego rozpoznania CT u noworodków. Charakterystyka specyficznych IgG neosyntetyzowanych przez noworodka byłaby bardzo pomocna we wczesnym rozpoznaniu wrodzonej infekcji T. gondii. Niniejszy projekt polega na określeniu obecności u noworodka limfocytów B (LyB) uwrażliwionych in utero do produkcji swoistych IgG w przypadku CT. Takie podejście można przewidzieć ze względu na dojrzałość nabywaną przez płodowe LyB od końca pierwszego trymestru ciąży, wykazaną przez ich zdolność do wytwarzania Ig o wysokim powinowactwie w przypadku zakażenia matki lub immunizacji noworodka.

Badania te mają charakter diagnostyczny, wieloośrodkowy, prospektywny, nierandomizowany, porównawczy i kontrolowany. Zostanie on przeprowadzony w 3 równoległych grupach kobiet ciężarnych prowadzących obserwację prenatalną i rodzącą na oddziałach położniczych 3 szpitali AP-HP, które zapewniają obserwację matki/dziecka i pobieranie próbek biologicznych, dysponując dużą wiedzą z zakresu ginekologii i położnictwa. Sześćdziesięciu pacjentów zostanie wybranych i włączonych zgodnie z następującym rozkładem:

• Pozytywna grupa kontrolna (kobiety z pozytywnym wynikiem serologicznym toksoplazmy): 15 pacjentek;
• Negatywna grupa kontrolna (kobiety z ujemnym wynikiem serologicznym toksoplazmy): 15 pacjentek;
• Grupa kobiet z serokonwersją toksoplazmatyczną w czasie ciąży: 30 pacjentek.

Ośrodkami nierekrutacyjnymi będą laboratoria biologiczne HUPC i HUPNVS do realizacji badań serologicznych i ekspertyz z zakresu diagnostyki biologicznej oraz IRD UMR 216 do koordynacji, eksperymentów laboratoryjnych i ekspertyz z zakresu immunologii.