Poranění pankreatu a odpovídající výsledek managementu (PICO)

Trauma pankreatu, i když je neobvyklé, představuje pro traumatologické chirurgy náročná diagnostická a terapeutická dilemata. Poranění slinivky břišní byla skutečně spojena s hlášenou mírou nemocnosti blížící se 45 %.

Charakterizace onemocnění na specifické terapeutické úrovni umožní lepší management léčených pacientů. Za tímto účelem je strategií integrovat přesné prospektivní klinické záznamy rozsáhlé údaje o klinické léčbě u velké kohorty pacientů.

Všechna klinická oddělení, která se studie účastní, zahrnují pacienty s úzkou spoluprací mezi oddělením traumatologie, intenzivní péče a chirurgie. Demografické a klinické parametry se shromažďují v databázi.

Jakmile je diagnóza potvrzena, je provedeno zařazení pacientů, před plánovaným vedením nemocnice a po kontrole kritérií způsobilosti a podpisu formuláře souhlasu. Během klinické péče se odebírá několik vzorků: vzorky krve a chirurgické vzorky. Jako obvyklá praxe bude pooperační léčba předepsána podle uvážení zkoušejícího s pomocí předem stanoveného algoritmu. Během tohoto vyšetření je také odebráno několik vzorků (vzorek krve a biologické tkáně).

Současně s těmito managementy se zaznamenávají klinická data týkající se anamnézy, historie přednemocniční léčby, chirurgická anamnéza, historie léčby, pooperační léčba, pokud je předepsána, historie léčby mezi operací a obrazovou diagnózou. Klinická data se také shromažďují 12 měsíců po propuštění během plánované návštěvy organizované jako obvyklá praxe pro dlouhodobou studii.

Během sestavování kohorty bude provedeno několik studií:

• Srovnání operační a neoperační léčby traumatu pankreatu:
• Porovnání doby diagnózy a doby léčby pacientů s traumatem pankreatu a zda byla léčba vynechána či nikoli
• Studium specifické léčby pacientů s traumatem pankreatu
• Studium operačních metod a intraoperačních stavů u pacientů s traumatem pankreatu
• Studie resuscitační léčby na JIP u pacientů s traumatem pankreatu
• Studie endoskopie a další konzervativní léčby u pacientů s traumatem pankreatu
• Studie léčby nutriční podpory u pacientů s traumatem pankreatu
• Studium léčebných metod pro kontrolu poškození a kontrolu bez poškození u pacientů s těžkým traumatem pankreatu

Všechny biologické vzorky jsou skladovány na místech při -80 °C nebo při pokojové teplotě v závislosti na vzorcích: Vzorky odebrané do zkumavek jsou okamžitě odeslány při pokojové teplotě do centrálního patologického oddělení v nemocnici Jinling, Nanjing, Čína. Všechny ostatní vzorky, skladované při -80 °C, jsou odeslány do Výzkumného ústavu všeobecné chirurgie, Medical School of Nanjing University, Čína.

Analýzy vzorků provádí specializované výzkumné centrum: extrakce DNA a RNA pro analýzu transkriptomu, histologické analýzy atd.

Histologické analýzy: Analýza struktury vyříznuté slinivky nebo střevní tkáně.

Molekulární biologie: Analýza exprese celého genomu se provádí pomocí microarray a následuje genová ontologie a shlukové analýzy.

Mikrobiota: Bakteriální složení mikrobioty spojené s ileální sliznicí se analyzuje v době operace pomocí sekvenování 16S (MiSeq, Illumina). Získané sekvence jsou analyzovány pomocí potrubí Qiime k posouzení složení, alfa a beta diverzity.

Imunologie: Fenotyp imunitních buněk: Imunitní buňky jsou extrahovány z krve a čerstvých slizničních tkání. Fenotyp těchto buněk je analyzován cytometrií.

Analýza extracelulárních pastí neutrofilů:

Koncentrace bezbuněčné DNA, bezbuněčných nukleozomů, neutrofilní elastázy (NE) a myeloperoxidázy (MPO) byly měřeny v séru a plazmě pomocí Human Cell Death Detection ELISA nebo sendvičové ELISA.

Pankreatická tkáň byla rychle odstraněna a rozdělena na různé části pro pozdější analýzy. Jedna byla použita pro konfokální mikroskopii a jedna třetina byla bleskově zmražena v kapalném dusíku pro biochemickou kvantifikaci hladin pankreatické myeloperoxidázy (MPO), histonu 3 a histonu 4 atd. Jeden byl fixován ve formalínu pro histologickou analýzu.