Pankreasverletzung und entsprechendes Managementergebnis (PICO)

Ein Pankreastrauma kommt zwar selten vor, stellt Unfallchirurgen jedoch vor schwierige diagnostische und therapeutische Probleme. Tatsächlich wurden Verletzungen der Bauchspeicheldrüse mit Morbiditätsraten von nahezu 45 % in Verbindung gebracht.

Die Charakterisierung der Krankheit auf einer bestimmten therapeutischen Ebene wird eine bessere Behandlung der behandelten Patienten ermöglichen. Zu diesem Zweck besteht die Strategie darin, präzise prospektive klinische Aufzeichnungen und umfangreiche klinische Behandlungsdaten in einer großen Patientenkohorte zu integrieren.

Alle an der Studie teilnehmenden klinischen Abteilungen umfassen Patienten, wobei eine enge Zusammenarbeit zwischen den Abteilungen Trauma, Intensivpflege und Chirurgie besteht. Demografische Daten und klinische Parameter werden in einer Datenbank gesammelt.

Sobald die Diagnose bestätigt ist, erfolgt die Einbeziehung der Patienten vor einem geplanten Krankenhausmanagement und nach Prüfung der Zulassungskriterien und Unterzeichnung des Einverständnisformulars. Während der klinischen Behandlung werden mehrere Proben entnommen: Blutproben und chirurgische Proben. Wie üblich wird die postoperative Behandlung nach Ermessen des Untersuchers mithilfe eines vorab festgelegten Algorithmus verordnet. Bei dieser Untersuchung werden auch mehrere Proben entnommen (Blut und biologische Gewebeprobe).

Gleichzeitig mit diesen Behandlungen werden klinische Daten zur Krankengeschichte, zur Behandlungsgeschichte vor dem Krankenhausaufenthalt, zur Operationsgeschichte, zur Behandlungsgeschichte, zur postoperativen Behandlung (falls verordnet) und zur Behandlungsgeschichte zwischen der Operation und der bildgebenden Diagnose aufgezeichnet. Klinische Daten werden auch 12 Monate nach der Entlassung während eines geplanten, wie üblich organisierten Besuchs für Langzeitstudien gesammelt.

Im Rahmen des Kohortenaufbaus werden mehrere Studien durchgeführt:

• Vergleich operativer und nichtoperativer Behandlung von Pankreastrauma:
• Vergleich der Diagnosezeit und der Behandlungszeit von Patienten mit Pankreastrauma und ob die Behandlung versäumt wird oder nicht
• Studie zur spezifischen Behandlung von Patienten mit Pankreastrauma
• Untersuchung chirurgischer Methoden und intraoperativer Bedingungen bei Patienten mit Pankreastrauma
• Studie zur Intensiv-Wiederbelebungsbehandlung von Patienten mit Pankreastrauma
• Untersuchung der Endoskopie und anderer konservativer Behandlungen für Patienten mit Pankreastrauma
• Studie zur ernährungsunterstützenden Behandlung von Patienten mit Pankreastrauma
• Untersuchung von Behandlungsmethoden zur Schadenskontrolle und Nicht-Schadenskontrolle bei Patienten mit schwerem Pankreastrauma

Alle biologischen Proben werden an Standorten bei -80 °C oder je nach Probe bei Raumtemperatur gelagert: In Röhrchen gesammelte Proben werden sofort bei Raumtemperatur an die zentrale Pathologieabteilung im Jinling Hospital, Nanjing, China, geschickt. Alle anderen bei -80 °C gelagerten Proben werden an das Forschungsinstitut für Allgemeine Chirurgie der Medizinischen Fakultät der Universität Nanjing, China, geschickt.

Probenanalysen werden von einem speziellen Forschungszentrum durchgeführt: DNA- und RNA-Extraktion für Transkriptomanalysen, histologische Analysen usw.:

Histologische Analysen: Analyse der Struktur des herausgeschnittenen Pankreas- oder Darmgewebes.

Molekularbiologie: Expressionsanalysen des gesamten Genoms werden mithilfe von Microarrays durchgeführt, gefolgt von Genontologie- und Clusteranalysen.

Mikrobiota: Die bakterielle Zusammensetzung der mit der Ileumschleimhaut assoziierten Mikrobiota wird zum Zeitpunkt der Operation mithilfe der 16S-Sequenzierung (MiSeq, Illumina) analysiert. Die erhaltenen Sequenzen werden mithilfe der Qiime-Pipeline analysiert, um Zusammensetzung, Alpha- und Beta-Diversität zu bewerten.

Immunologie: Phänotyp von Immunzellen: Immunzellen werden aus Blut und frischem Schleimhautgewebe gewonnen. Der Phänotyp dieser Zellen wird zytometrisch analysiert.

Analyse extrazellulärer Neutrophilenfallen:

Die Konzentrationen von zellfreier DNA, zellfreien Nukleosomen, neutrophiler Elastase (NE) und Myeloperoxidase (MPO) wurden in Seren und Plasma mittels Human Cell Death Detection ELISA oder Sandwich ELISA gemessen.

Das Pankreasgewebe wurde schnell entnommen und für spätere Analysen in verschiedene Teile geteilt. Eines wurde für die konfokale Mikroskopie verwendet und ein Drittel wurde in flüssigem Stickstoff zur biochemischen Quantifizierung der pankreatischen Myeloperoxidase (MPO), Histon 3- und Histon 4-Spiegel usw. eingefroren. Einer wurde zur histologischen Analyse in Formalin fixiert.