Lesión pancreática y resultado de manejo correspondiente (PICO)

El trauma pancreático, aunque es poco común, presenta dilemas diagnósticos y terapéuticos desafiantes para los cirujanos de trauma. De hecho, las lesiones del páncreas se han asociado con tasas de morbilidad informadas cercanas al 45%.

La caracterización de la enfermedad a un nivel terapéutico específico permitirá un mejor manejo de los pacientes tratados. Para ello, la estrategia es integrar registros clínicos prospectivos precisos y extensos datos de tratamientos clínicos en una gran cohorte de pacientes.

Todos los departamentos clínicos que participan en el estudio incluyen pacientes, con una estrecha colaboración entre los departamentos de Trauma, Cuidados Intensivos y Cirugía. Los parámetros demográficos y clínicos se recopilan en una base de datos.

Una vez confirmado el diagnóstico, se realiza la inclusión de los pacientes, antes de una gestión hospitalaria programada, y previa verificación de los criterios de elegibilidad y firma del consentimiento informado. Durante el manejo clínico se recolectan varias muestras: muestras de sangre y piezas quirúrgicas. Como práctica habitual, el tratamiento postoperatorio se prescribirá a criterio del investigador, con la ayuda de un algoritmo preestablecido. Durante este examen también se recolectan varias muestras (muestra de sangre y tejido biológico).

Paralelamente a estos manejos se registran datos clínicos referentes a antecedentes médicos, antecedentes de tratamientos prehospitalarios, antecedentes quirúrgicos, antecedentes de tratamientos, tratamiento postoperatorio si se prescribe, antecedentes de tratamientos entre cirugía y diagnóstico imagenológico. Los datos clínicos también se recogen 12 meses después del alta durante una visita programada organizada como práctica habitual, para un estudio a largo plazo.

Se realizarán varios estudios a lo largo de la configuración de la cohorte:

• Comparación del tratamiento quirúrgico y no quirúrgico del trauma pancreático:
• Comparación del tiempo de diagnóstico y tiempo de tratamiento de pacientes con trauma pancreático y si se pierde o no el tratamiento
• Estudio de tratamiento específico de pacientes con trauma pancreático
• Estudio de métodos quirúrgicos y condiciones intraoperatorias en pacientes con trauma pancreático
• Estudio del tratamiento de reanimación en UCI de pacientes con trauma pancreático
• Estudio de endoscopia y otros tratamientos conservadores para pacientes con trauma pancreático
• Estudio del tratamiento de soporte nutricional para pacientes con trauma pancreático
• Estudio de métodos de tratamiento para control de daño y control de no daño en pacientes con trauma pancreático severo

Todas las muestras biológicas se almacenan en sitios a -80°C, o a temperatura ambiente dependiendo de las muestras: Las muestras recolectadas en tubos, se envían inmediatamente, a temperatura ambiente, al departamento central de patología en el Hospital Jinling, Nanjing, China. Todas las demás muestras, almacenadas a -80°C, se envían al Instituto de Investigación de Cirugía General, Facultad de Medicina de la Universidad de Nanjing, China.

Los análisis de muestras son realizados por un centro de investigación dedicado: extracción de ADN y ARN para análisis de transcriptomas, análisis histológicos, etc.:

Análisis histológicos: Análisis de la estructura del páncreas extirpado o del tejido intestinal.

Biología molecular: los análisis de expresión del genoma completo se realizan mediante microarrays y, a continuación, se realizan análisis de agrupamiento y ontología génica.

Microbiota: la composición bacteriana de la microbiota asociada a la mucosa ileal se analiza en el momento de la cirugía mediante secuenciación 16S (MiSeq, Illumina). Las secuencias obtenidas se analizan utilizando la canalización Qiime para evaluar la composición, la diversidad alfa y beta.

Inmunología: fenotipo de las células inmunitarias: las células inmunitarias se extraen de la sangre y de los tejidos mucosos frescos. El fenotipo de estas células se analiza por citometría.

Análisis de trampas extracelulares de neutrófilos:

Las concentraciones de ADN libre de células, nucleosomas libres de células, elastasa de neutrófilos (NE) y mieloperoxidasa (MPO) se midieron en suero y plasma mediante ELISA de detección de muerte celular humana o ELISA sándwich.

El tejido pancreático se eliminó rápidamente y se dividió en diferentes partes para análisis posteriores. Uno se usó para microscopía confocal y un tercio se congeló instantáneamente en nitrógeno líquido para la cuantificación bioquímica de mieloperoxidasa pancreática (MPO), niveles de histona 3 e histona 4, etc. Uno se fijó en formalina para el análisis histológico.