Heidelbergská in vivo konfokální mikroskopie k hodnocení poruch očního povrchu u zdravých a nemocných jedinců

Heidelbergův retinální tomograf (HRT) in vivo konfokální mikroskopie k hodnocení poruch očního povrchu u zdravých a nemocných jedinců

Účelem této studie je zhodnotit rohovku zdravých osob a případy různých systematických onemocnění a také etiologie onemocnění povrchu oka.

1. In vivo konfokální mikroskopie (IVCM)

Pro IVCM byly vyvinuty tři hlavní konfokální systémy:

1. tandemový skenovací konfokální mikroskop (TSCM) [4-6]
2. ConfoScan 4 (Nidek Technologies Srl, Padova, Itálie) [7-8]
3. Heidelbergský retinální tomograf s Rostock Corneal Module (HRT-RCM, Heidelberg Engineering, Ges.m.b.H., Dossenheim, Německo [9-10] HRT-RCM je laserový skenovací konfokální mikroskop, pracující na principu skenování 670 nm laserového paprsku v rastru vzor nad zorným polem. Systém používá objektiv s vysokou numerickou aperturou 63x (0,9 NA) a vytváří snímky s vysokým kontrastem a lepším axiálním rozlišením (7,6 µm) než jiné konfokální systémy in vivo (9 µm pro TSCM a 24 µm pro ConfoScan) . HRT-RCM poskytuje nový vestavěný software pro 3D zobrazování struktury rohovky.

Kvantitativní zobrazení subbazálního nervového plexu by mohlo být prováděno systémem CCMetrics, zakázkovým softwarovým programem vyvinutým na univerzitě v Manchesteru. [11-12] Výhodou IVCM je zobrazení přes středně neprůhledné tkáně (jizvení nebo edém rohovky) a také pozorování dynamického procesu v rohovce, tj. monitorování zánětlivé reakce u infekční keratitidy, hojení ran po refrakčních operacích.[13] -14]

Použití IVCM ve vědeckém výzkumu se v posledních letech rychle rozšiřuje. Byl také implementován pro klinickou diagnostiku různých stavů očního povrchu a také jako nástroj pro screening pacientů podstupujících léčbu. Následující jsou indikace IVCM:

1. Normální centrální rohovka (stárnutí, změny související s nošením kontaktních čoček)
2. Onemocnění suchého oka
3. Rohovkové ektatické poruchy, dystrofie, degenerace
4. Syndrom iridokorneálního endoteliálního syndromu (ICE).
5. Keratitida (mikrobiální, plísňová, parazitární, virová)
6. Pooperační vyšetření rohovky (operace katarakty, laserem asistovaná in situ keratomileuza-LASIK, laserová epiteliální keratomileuza-LASEK, fotorefrakční keratektomie, keratoplastika)
7. Depozita rohovky (pseudoexfoliační syndrom, vyvolaný léky)
8. Systémová onemocnění (DM, Parkinsonova choroba, systémový lupus erythematodes, revmatoidní artritida, Alzheimerova choroba a demence)
9. Vyšetření spojivek (konjunktivitida, neoplazie)
10. Nedostatek kmenových buněk končetin (chemické nebo tepelné poškození, Stevens-Johnsonův syndrom)

Postupy studie Před vyšetřením každý pacient podepíše písemný informovaný souhlas. Pacienti podstoupili HRT in vivo konfokální mikroskopii. Diplomová zkouška se bude opakovat každých 3-6 měsíců podle stavu onemocnění. In vivo konfokální mikroskopie je rutinně používaná vyšetřovací modalita pro poruchy očního povrchu.

(1) In vivo konfokální mikroskopie In vivo konfokální mikroskopie byla provedena pomocí HRT in vivo konfokální mikroskopie konfokálním mikroskopem v reálném čase (Heidelberg Engineering, Ges.m.b.H., Dossenheim, Německo). Jeho software pro automatické skenování zajišťuje automatické zarovnání a záznam. Výsledky by byly analyzovány pomocí systému CCMetrics, zakázkového softwarového programu vyvinutého na univerzitě v Manchesteru.

Před vyšetřením byla na povrch oka nakapána jedna kapka topického anestetického roztoku (proparakain 0,5%, Alcain). Po řádné přípravě byla aplikována jedna kapka gelu Vidisic (Bausch & Lomb, Ges.m.b.H., Berlín, Německo). Pacienti byli instruováni, aby se dívali ve směru opačném k oblasti měření. Skenování bylo prováděno kontinuálně od povrchové spojivky po stromální vrstvu