Mikroskopia konfokalna Heidelberga in vivo do oceny zaburzeń powierzchni oka u osób zdrowych i chorych

Heidelberg Retina Tomograf (HRT) In vivo Mikroskopia konfokalna do oceny zaburzeń powierzchni oka u osób zdrowych i chorych

Celem pracy jest ocena rogówki osób zdrowych oraz przypadków różnych chorób układowych, a także etiologii chorób powierzchni oka.

1. Mikroskopia konfokalna in vivo (IVCM)

Dla IVCM opracowano trzy główne systemy konfokalne:

1. tandemowy skaningowy mikroskop konfokalny (TSCM) [4-6]
2. ConfoScan 4 (Nidek Technologies Srl, Padwa, Włochy) [7-8]
3. the Heidelberg Retinal Tomograph with Rostock Corneal Module (HRT-RCM, Heidelberg Engineering, Ges.m.b.H., Dossenheim, Niemcy [9-10] HRT-RCM to laserowy skaningowy mikroskop konfokalny, działający na zasadzie skanowania wiązki laserowej 670 nm w rastrowym wzór nad polem widzenia. System wykorzystuje obiektyw o dużej aperturze numerycznej 63x (0,9 NA) i tworzy obrazy o wysokim kontraście i lepszej rozdzielczości osiowej (7,6 µm) niż inne konfokalne systemy in vivo (9 µm dla TSCM i 24 µm dla ConfoScan) . HRT-RCM zapewnia nowe wbudowane oprogramowanie do obrazowania 3D struktury rogówki.

Ilościowe obrazowanie splotu nerwu podpodstawnego można wykonać za pomocą systemu CCMetrics, niestandardowego oprogramowania opracowanego na Uniwersytecie w Manchesterze. [11-12] IVCM ma tę zaletę, że umożliwia obrazowanie przez umiarkowanie nieprzejrzyste tkanki (bliznowacenie lub obrzęk rogówki), a także obserwuje dynamiczny proces w rogówce, tj. monitorowanie reakcji zapalnej w zakaźnym zapaleniu rogówki, gojenie się ran po chirurgii refrakcyjnej.[13 -14]

Wykorzystanie IVCM w badaniach naukowych szybko się rozwijało w ostatnich latach. Został również wdrożony do diagnostyki klinicznej różnych stanów powierzchni oka, a także jako narzędzie przesiewowe dla pacjentów poddawanych leczeniu. Następujące wskazania wskazują na IVCM:

1. Normalna centralna rogówka (starzenie się, zmiany związane z noszeniem soczewek kontaktowych)
2. Choroba suchego oka
3. Zaburzenia ekstatyczne rogówki, dystrofie, zwyrodnienia
4. Zespoły śródbłonka tęczówki i rogówki (ICE).
5. Zapalenie rogówki (drobnoustrojowe, grzybicze, pasożytnicze, wirusowe)
6. Ocena pooperacyjna rogówki (operacja zaćmy, Laser Assisted In situ Keratomileusis-LASIK, Laser Epithelial Keratomileusis-LASEK, Fotorefrakcyjna keratektomia, keratoplastyka)
7. Złogi rogówki (zespół pseudoeksfoliacji, polekowy)
8. Choroby ogólnoustrojowe (DM, choroba Parkinsona, toczeń rumieniowaty układowy, reumatoidalne zapalenie stawów, choroba Alzheimera i demencja)
9. Ocena spojówek (zapalenie spojówek, nowotwory)
10. Niedobór komórek macierzystych rąbka (uszkodzenie chemiczne lub termiczne, zespół Stevensa-Johnsona)

Procedury badania Przed badaniem każdy pacjent podpisuje pisemną świadomą zgodę. Pacjenci poddawani są HTZ in vivo mikroskopii konfokalnej. Egzamin dyplomowy będzie powtarzany co 3-6 miesięcy w zależności od stanu chorobowego. Mikroskopia konfokalna in vivo jest rutynowo stosowaną metodą badania zaburzeń powierzchni oka.

(1) Mikroskopia konfokalna in vivo Mikroskopię konfokalną in vivo przeprowadzono za pomocą mikroskopu konfokalnego w czasie rzeczywistym do mikroskopii konfokalnej HRT (Heidelberg Engineering, Ges.m.b.H., Dossenheim, Niemcy). Jego oprogramowanie do automatycznego skanowania zapewnia automatyczne wyrównanie i nagrywanie. Wyniki zostaną przeanalizowane przy użyciu systemu CCMetrics, niestandardowego programu opracowanego na Uniwersytecie w Manchesterze.

Przed badaniem na powierzchnię oka wkroplono jedną kroplę roztworu środka znieczulającego miejscowo (proparakaina 0,5%, Alcaine). Po odpowiednim przygotowaniu aplikowano jedną kroplę żelu Vidisic (Bausch & Lomb, Ges.m.b.H., Berlin, Niemcy). Pacjentów poinstruowano, aby patrzyli w kierunku przeciwnym do obszaru pomiaru. Skanowanie prowadzono w sposób ciągły od powierzchownej spojówki do warstwy podścieliska