Heidelbergin in vivo konfokaalinen mikroskopia terveiden ja sairaiden yksilöiden silmän pintahäiriöiden arvioimiseksi

Heidelbergin verkkokalvotomografi (HRT) in vivo konfokaalimikroskopia terveiden ja sairaiden yksilöiden silmän pintahäiriöiden arvioimiseksi

Tämän tutkimuksen tarkoituksena on arvioida terveiden ihmisten sarveiskalvoa ja erilaisten systemaattisten sairauksien tapauksia sekä silmän pintasairauksien etiologioita.

1. In vivo konfokaalinen mikroskopia (IVCM)

IVCM:lle on kehitetty kolme pääkonfokaalijärjestelmää:

1. Tandem Scanning Confocal Microscope (TSCM) [4-6]
2. ConfoScan 4 (Nidek Technologies Srl, Padova, Italia) [7-8]
3. Heidelbergin verkkokalvotomografi Rostockin sarveiskalvomoduulilla (HRT-RCM, Heidelberg Engineering, Ges.m.b.H., Dossenheim, Saksa [9-10] HRT-RCM on laserpyyhkäisykonfokaalinen mikroskooppi, joka toimii skannaamalla 670 nm:n lasersädettä rasterissa kuvio näkökentän yli. Järjestelmä käyttää suuren numeerisen aukon 63x objektiivilinssiä (0,9 NA) ja tuottaa kuvia, joissa on suuri kontrasti ja parempi aksiaalinen resoluutio (7,6 µm) kuin muut in vivo -konfokaalijärjestelmät (9 µm TSCM:lle ja 24 µm ConfoScanille). . HRT-RCM tarjoaa uuden sisäänrakennetun ohjelmiston sarveiskalvon rakenteen 3D-kuvaukseen.

Subbasaalihermopunoksen kvantitatiivinen kuvantaminen voidaan suorittaa Manchesterin yliopistossa kehitetyllä räätälöidyllä ohjelmistolla CCMetrics-järjestelmä. [11-12] IVCM:n etuna on kuvantaminen kohtalaisen läpikuultavien kudosten läpi (sarveiskalvon arpeutuminen tai turvotus) ja se tarkkailee myös dynaamista prosessia sarveiskalvossa, eli tulehdusreaktioiden seurantaa tarttuvan keratiitin yhteydessä, haavan paranemista taittoleikkauksen jälkeen.[13] -14]

IVCM:n käyttö tieteellisessä tutkimuksessa on laajentunut nopeasti viime vuosina. Se on myös otettu käyttöön erilaisten silmän pinta-olosuhteiden kliiniseen diagnosointiin sekä seulontatyökaluna hoidossa oleville potilaille. Seuraavat ovat viitteitä IVCM:stä:

1. Normaali keskussarveiskalvo (ikääntyminen, piilolinssien kulumiseen liittyvät muutokset)
2. Kuivan silmän sairaus
3. Sarveiskalvon ektaattiset häiriöt, dystrofiat, rappeumat
4. Iridocorneal endoteelisyndrooma (ICE) -oireyhtymät
5. Keratiitti (mikrobi-, sieni-, lois-, virus-)
6. Sarveiskalvon leikkauksen jälkeinen arviointi (kaihileikkaus, Laser Assisted In situ Keratomileusis-LASIK, Laser Epithelial Keratomileusis-LASEK, Fotorefraktiivinen keratolektomia, keratoplastia)
7. Sarveiskalvon kertymät (pseudoeksfoliaatio-oireyhtymä, lääkkeiden aiheuttama)
8. Systeemiset sairaudet (DM, Parkinsonin tauti, systeeminen lupus erythematosus, nivelreuma, Alzheimerin tauti ja dementia)
9. Sidekalvon arviointi (sidekalvotulehdus, neoplasia)
10. Limbaalisten kantasolujen puutos (kemiallinen tai lämpövaurio, Stevens-Johnsonin oireyhtymä)

Tutkimusmenettelyt Ennen tutkimusta jokainen potilas allekirjoittaa kirjallisen tietoisen suostumuksen. Potilaille tehdään hormonikorvaushoito in vivo konfokaalimikroskopia. Opinnäytetyöt toistetaan 3-6 kuukauden välein sairauden tilasta riippuen. In vivo konfokaalinen mikroskopia on rutiininomaisesti käytetty tutkimusmenetelmä silmän pinnan häiriöissä.

(1) In vivo konfokaalinen mikroskopia In vivo konfokaalinen mikroskopia suoritettiin HRT:llä in vivo konfokaalimikroskopia tosiaikaisella konfokaalimikroskoopilla (Heidelberg Engineering, Ges.m.b.H., Dossenheim, Saksa). Sen automaattinen skannausohjelmisto tarjoaa automaattisen kohdistuksen ja tallennuksen. Tulokset analysoitaisiin Manchesterin yliopistossa kehitetyn CCMetrics-järjestelmän avulla.

Ennen tutkimusta yksi tippa paikallispuudutusliuosta (proparakiini 0,5 %, Alcaine) tiputettiin silmän pinnalle. Kunnollisen valmistelun jälkeen laitettiin yksi tippa Vidisic-geeliä (Bausch & Lomb, Ges.m.b.H., Berliini, Saksa). Potilaita kehotettiin katsomaan mittausaluetta vastakkaiseen suuntaan. Skannaus suoritettiin jatkuvasti pinnallisesta sidekalvosta stroomakerrokseen