Krevní biomarkery pro prognózu otřesu mozku souvisejícího se sportem

Diagnóza a prognóza otřesu mozku (SRC) stále závisí na subjektivním hodnocení založeném na postupu SCAT5. Naše znalosti o tom, jak otřes mozku související se sportem ovlivňuje sportovce v průběhu času, jsou omezené, protože všichni pacienti mohou mít různé doby zotavení z otřesu mozku. Náš výzkum si klade za cíl kvantitativně potvrdit, že hodnocení poranění hlavy předpovědělo otřes mozku oproti klinickému hodnocení (SCAT5) a že protokol návratu ke hře poskytuje sportovci dostatečnou dobu na zotavení.

V současné době se zkoumá řada nových oblastí diagnostiky, včetně biomarkerů na bázi proteinů. V kontextu SRC se tyto proteinové biomarkery typicky skládají z neurologických proteinů normálně omezených na centrální nervový systém nebo spojených s neurologickým poškozením buněk. Nedávné studie porovnávaly hladiny biomarkerů v různých časových bodech po diagnóze nebo zkoumaly vztah mezi ranými hladinami biomarkerů a dobou návratu do hry (RTP). Použití těchto biomarkerů pro aktivní hodnocení zotavení hráče po SRC však musí být ještě plně prozkoumáno. V této studii budou vyšetřovatelé měřit hladiny biomarkerů ve více časových bodech po SRC, aby vyhodnotili hodnotu těchto biomarkerů pro sledování zotavení hráče. To je významné pro minimalizaci předčasného RTP a v konečném důsledku s cílem snížit chronické dlouhodobé účinky spojené s SRC.

Aby tato studie skutečně identifikovala biomarker specifický pro otřes mozku, bude muset nejprve analyzovat krev pacientů s otřesem mozku a porovnat je s klinickým hodnocením hodnocení poranění hlavy (HIA) a za druhé změřit jejich hladiny v průběhu času, aby bylo možné naznačit zotavení, které může pomoci k bezpečnému návratu ke hře.

Stručně řečeno, vzorky krve se odebírají od schválených účastníků na začátku předsezónní fáze, aby fungovaly jako výchozí. Jakmile jeden z těchto účastníků vstoupí do procesu HIA, je mu po zranění odebrána krev, 6 dní po zranění a 13 dní po zranění. Dále jsou biomarkery měřeny ve vzorcích krve v každém časovém bodě, aby se zjistilo, zda došlo k nějakému zvýšení/snížení jejich hladin.

Studovat design:

Prospektivní kohortová studie s nezraněnými kontrolními skupinami bez cvičení.

Populace:

Všichni účastníci jsou profesionální hráči rugby z jednoho profesionálního ragbyového klubu, kteří byli původně pozváni k účasti. Počáteční kontakt byl navázán na hlavního lékaře Irish Rugby Football Union (IRFU) za účelem povolení k provádění studie po dobu tří let. Další povolení k provedení této kohortové studie bylo požadováno od hlavního trenéra a zdravotnického personálu profesionálního ragbyového týmu.

Základní dotazník:

Účastníci vyplní základní dotazník, který obsahuje otázky týkající se jejich anamnézy otřesu mozku, včetně příznaků spojených s předchozími zraněními, jejich délky a výsledku. Dotazník byl vytvořen v souladu s předchozími sportovními studiemi otřesů mozku používanými pro lední hokej a australský fotbal

Časový rámec

V rámci této studie každý účastník, který vstoupí do standardního procesu HIA, podstoupí HIA, neuropsychometrické vyšetření a odběr krve v následujících časových bodech:

1. Do 72 hodin od zranění,
2. 6 dní po poranění (± 1 den); to je v souladu s protokolem minimálního odstupňovaného návratu do hry (GRTP) pro profesionálního hráče rugby, žádný hráč se nevrátí ke hře dříve než za 6 dní,
3. 13 dní po poranění (± 1 den), aby se zjistilo, zda jsou biomarkery stále přítomny navzdory výsledkům HIA a neuropsychometrickému hodnocení.

Účastníci sériového HIA, kteří trpí podezřením na SRC, dokončí protokol HIA ve výše uvedených časových bodech. Toto je forma SCAT5, která byla upravena pro profesionální rugby a GRTP. Toto posouzení provede lékař profesionálního rugbyového klubu.

Neuropsychometrické hodnocení Během předsezónní přípravy hráči dokončí základní neuropsychometrické hodnocení založené na počítačích – ImpPACT. Toto hodnocení měří různé kognitivní domény včetně vizuální paměti, rychlosti vizuálního zpracování, reakční doby a pracovní paměti a také pozornosti. Hráči po zranění jsou znovu posouzeni, jakmile jsou bez příznaků, aby se určilo zotavení těchto domén a aby se vyhodnotily jakékoli přetrvávající vzorce deficitu. Toto hodnocení tvoří součást celkového hodnocení a plánu řízení otřesů.

Odběr krve:

Lékař a/nebo klinická sestra odeberou vzorky krve ve výše uvedených časových bodech. Lékař nebo sestra obvykle odebírá vzorek krve z předloktní žíly na paži.

Krev odebírá člen studijního týmu od lékaře nebo sestry poté, co účastník odejde, aby byla zajištěna důvěrnost. Používají se tři typy lahviček se vzorky, aby bylo zajištěno použití různých typů biochemických technik a vyšetření určitých markerů; sérum, plazmou a plnou krví. Vzorky plné krve se okamžitě rozdělí na alikvoty do 2ml kryozkumavek po 1-1,5 ml. U vzorků séra se krev ve zkumavce nechá srážet po dobu až 30 minut. Lahvičky se sérem i plazmou se centrifugují při 2 000 xg po dobu 10 minut při 4 °C. Sérum a plazma se opatrně odpipetují a alikvoty se rozdělí do příslušných 2ml kryozkumavek s ne méně než 400 ul v každé kryozkumavce. Všechny alikvotní kryozkumavky jsou umístěny do skladovacích boxů v mrazáku -80 °C pro dlouhodobé skladování. Každý alikvot lze odebrat za účelem sondy pro různé biomarkery bez vícenásobných cyklů zmrazení a rozmrazení na vzorku jádra.

Krevní biomarkery Biomarkery založené na krvi, které lze analyzovat pomocí standardních biochemických technik pro cílené postupy a postupy založené na hypotézách pomocí souprav ELISA nebo multiplexních testů Luminex. Vzorky séra a plazmy umožňují analyzovat velké množství cílů, které se mohou nacházet v séru nebo plazmě. Pro tento typ analýzy lze použít společné cíle k porovnání napříč časovými body. Zkoumané biomarkery mohou být, ale bez omezení, s100p, ubikvitin karboxy-terminální hydroláza isoenzym L1, gliální fibrilární kyselý protein a celkové, Tau protein a neurotrofní faktor odvozený z mozku.

Výsledky Každý účastník, o kterém se předpokládá, že má SRC, vstoupí do procesu HIA. Tito účastníci budou mít klinická hodnocení provedená v předem definovaných časových bodech v souladu se směrnicemi World Rugby. V těchto časových bodech budou také odebrány vzorky krve pro kvantifikaci hladin krevních biomarkerů. Hladiny biomarkerů budou korelovány s výsledky HIA a neuropsychometrických hodnocení. To usnadní předběžné zkoumání korelace mezi klinickými hodnoceními a hladinami biomarkerů, aby se určilo, zda lze biomarkery použít k objektivnímu posouzení obnovy SRC

Vyšetřování:

Mezi touto výzkumnou skupinou a Univerzitou v Limericku (UL) existuje vztah spolupráce na podporu klinického výzkumu (CRSU). CRSU poskytovalo poradenství a podporovalo realizaci tohoto výzkumného projektu na nejvyšší úrovni výzkumu a klinického řízení v souladu s požadavky pokynů ICH pro správnou klinickou praxi (ICH-GCP) a všemi platnými regulačními požadavky. Kontaktní prvek této studie pro účastníky byl proveden dodržováním systému řízení kvality CRSU (QMS).