Biomarkery krwi do prognozowania wstrząsu mózgu związanego ze sportem

Rozpoznanie i rokowanie w przypadku wstrząśnienia mózgu związanego ze sportem (SRC) nadal opiera się na subiektywnej ocenie opartej na procedurze SCAT5. Nasza wiedza na temat wpływu wstrząsu mózgu związanego ze sportem na sportowca w czasie jest ograniczona, ponieważ wszyscy pacjenci mogą mieć różny czas powrotu do zdrowia po wstrząśnieniu mózgu. Nasze badanie ma na celu ilościowe potwierdzenie, że ocena urazu głowy przewidziała wstrząs mózgu na podstawie oceny klinicznej (SCAT5) oraz że protokół powrotu do gry zapewnia sportowcowi wystarczający czas na regenerację.

Obecnie badane są liczne nowe obszary diagnostyki, w tym biomarkery oparte na białkach. W kontekście SRC, te biomarkery białkowe zazwyczaj składają się z białek neurologicznych normalnie ograniczonych do ośrodkowego układu nerwowego lub związanych z uszkodzeniem komórek neurologicznych. W ostatnich badaniach porównano poziomy biomarkerów w różnych punktach czasowych po postawieniu diagnozy lub zbadano związek między wczesnymi poziomami biomarkerów a czasem powrotu do gry (RTP). Jednak wykorzystanie tych biomarkerów do aktywnej oceny powrotu do zdrowia gracza po SRC nie zostało jeszcze w pełni zbadane. W tym badaniu badacze będą mierzyć poziomy biomarkerów w wielu punktach czasowych po SRC, aby ocenić wartość tych biomarkerów w monitorowaniu regeneracji graczy. Ma to znaczenie dla zminimalizowania przedwczesnego RTP i ostatecznie dla zmniejszenia przewlekłych długoterminowych skutków związanych z SRC.

Aby naprawdę zidentyfikować biomarker specyficzny dla wstrząśnienia mózgu, to badanie będzie wymagało, po pierwsze, analizy krwi pacjentów z wstrząśnieniem mózgu i porównania z oceną kliniczną oceny urazu głowy (HIA), a po drugie, zmierzenia ich poziomów w czasie, aby wskazać powrót do zdrowia może pomóc w bezpiecznym powrocie do gry.

W skrócie, próbki krwi są pobierane od uczestników, którzy wyrazili na to zgodę, na początku sezonu przygotowawczego, aby działały jako punkt odniesienia. Gdy jeden z tych uczestników rozpocznie proces HIA, ich krew zostanie pobrana po urazie, 6 dni po urazie i 13 dni po urazie. Następnie biomarkery są mierzone w próbkach krwi w każdym punkcie czasowym w celu zbadania, czy występuje wzrost/spadek ich poziomu.

Projekt badania:

Prospektywne badanie kohortowe z grupami kontrolnymi bez urazów i bez ćwiczeń.

Populacja:

Wszyscy uczestnicy są zawodowymi graczami rugby z jednego profesjonalnego klubu rugby, którzy zostali początkowo zaproszeni do udziału. Nawiązano pierwszy kontakt z dyrektorem medycznym Irish Rugby Football Union (IRFU) w celu uzyskania pozwolenia na prowadzenie badania przez okres trzech lat. Następnie zwrócono się o zgodę na przeprowadzenie tego badania kohortowego do głównego trenera i personelu medycznego profesjonalnej drużyny rugby.

Kwestionariusz bazowy:

Uczestnicy wypełnią podstawowy kwestionariusz, który zawiera pytania dotyczące historii wstrząsu mózgu, w tym objawów związanych z wcześniejszymi urazami, ich długości i skutków. Kwestionariusz został opracowany zgodnie z wcześniejszymi badaniami wstrząsu mózgu opartymi na sporcie, stosowanymi w hokeju na lodzie i futbolu australijskim

Ramy czasowe

W ramach tego badania każdy uczestnik, który przejdzie standardowy proces HIA, zostanie poddany HIA, ocenie neuropsychometrycznej i pobraniu krwi w następujących punktach czasowych:

1. W ciągu 72 godzin od urazu
2. 6 dni po urazie (± 1 dzień); jest to zgodne z protokołem minimalnego stopniowego powrotu do gry (GRTP) dla zawodowego gracza rugby, żaden zawodnik nie wróci do gry przed upływem 6 dni,
3. 13 dni po urazie (± 1 dzień) w celu zbadania, czy biomarkery są nadal obecne pomimo wyników HIA i oceny neuropsychometrycznej.

Uczestnicy seryjnego HIA, u których podejrzewa się SRC, wypełnią protokół HIA w punktach czasowych określonych powyżej. Jest to forma SCAT5, która została zmodyfikowana dla profesjonalnego rugby i GRTP. Ocena ta zostanie przeprowadzona przez oficera medycznego zawodowego klubu rugby.

Ocena neuropsychometryczna Podczas okresu przedsezonowego gracze przechodzą podstawową ocenę neuropsychometryczną opartą na obliczeniach - ImPACT. Ta ocena mierzy różne domeny poznawcze, w tym pamięć wzrokową, szybkość przetwarzania wizualnego, czas reakcji i pamięć roboczą, a także uwagę. Zawodnicy po kontuzji są poddawani ponownej ocenie, gdy objawy ustąpią, w celu ustalenia powrotu do zdrowia w tych domenach i oceny ewentualnych trwałych deficytów. Ta ocena stanowi część ogólnej oceny wstrząsu mózgu i planu postępowania.

Rysunek krwi:

Lekarz i/lub pielęgniarka kliniczna pobiorą próbki krwi w punktach czasowych określonych powyżej. Lekarz lub pielęgniarka zwykle pobiera próbkę krwi z żyły łokciowej w ramieniu.

Krew pobiera członek zespołu badawczego od lekarza lub pielęgniarki po wyjściu uczestnika, aby zapewnić poufność. Stosowane są trzy rodzaje fiolek z próbkami, aby zapewnić możliwość zastosowania różnych rodzajów technik biochemicznych i zbadania niektórych markerów; surowica, osocze i krew pełna. Próbki pełnej krwi są natychmiast dzielone na porcje w 2 ml kriofiolkach po 1-1,5 ml każda. W przypadku próbek surowicy krew może krzepnąć w probówce przez maksymalnie 30 minut. Zarówno fiolki z surowicą, jak i osoczem odwirowuje się przy 2000 xg przez 10 minut w temperaturze 4°C. Surowicę i osocze ostrożnie pipetuje się i rozdziela na porcje do odpowiednich 2 ml kriofiolek z nie mniej niż 400 µl w każdej kriofiolce. Wszystkie kriofiolki podzielone na porcje umieszcza się w pudełkach do przechowywania w zamrażarce w temperaturze -80°C w celu długoterminowego przechowywania. Każdą porcję można pobrać w celu zbadania różnych biomarkerów bez wielokrotnych cykli zamrażania i rozmrażania próbki rdzenia.

Biomarkery krwi Biomarkery krwi, które można analizować przy użyciu standardowych technik biochemicznych dla ukierunkowanych i opartych na hipotezach procedur przy użyciu zestawów ELISA lub testów multipleksowych Luminex. Próbki surowicy i osocza umożliwiają analizę wielu celów, które można znaleźć w surowicy lub osoczu. W przypadku tego typu analizy wspólne cele mogą być używane do porównywania różnych punktów czasowych. Badane biomarkery mogą obejmować między innymi s100β, izoenzym L1 hydrolazy końca karboksylowego ubikwityny, kwaśne i całkowite białko fibrylarne gleju, białko Tau i czynnik neurotroficzny pochodzenia mózgowego.

Wyniki Każdy uczestnik, który prawdopodobnie ma kod SRC, zostanie poddany procesowi HIA. Uczestnicy ci zostaną poddani ocenie klinicznej przeprowadzonej we wcześniej określonych punktach czasowych, zgodnie z wytycznymi World Rugby. W tych punktach czasowych zostaną również pobrane próbki krwi w celu ilościowego określenia poziomów biomarkerów krwi. Poziomy biomarkerów zostaną skorelowane z wynikami HIA i ocen neuropsychometrycznych. Ułatwi to wstępne badanie korelacji między ocenami klinicznymi a poziomami biomarkerów w celu ustalenia, czy biomarkery można wykorzystać do obiektywnej oceny odzyskiwania SRC

Badania:

Istnieje współpraca między tą grupą badawczą a Jednostką Wsparcia Badań Klinicznych Uniwersytetu w Limericks (UL) (CRSU). CRSU udzielała porad i wspierała realizację tego projektu badawczego zgodnie z najwyższymi standardami zarządzania badaniami i klinicznymi, zgodnie z wymogami wytycznych ICH Good Clinical Practice (ICH-GCP) i wszystkimi obowiązującymi wymogami regulacyjnymi. Element kontaktu z uczestnikiem tego badania został przeprowadzony zgodnie z Systemem Zarządzania Jakością (QMS) CRSU.